不同含水量培养基对北虫草生长的影响

娄彦峰(葫芦岛市林业局，辽宁 葫芦岛 125000)

不同含水量培养基对北虫草生长的影响

娄彦峰
(葫芦岛市林业局，辽宁 葫芦岛 125000)

研究了不同含水量培养基配方对北虫草生长的影响，结果表明：小麦与水的质量比为1∶1.3(A2)时北虫草菌丝和子实体的生长良好；小麦与水的比例为1∶1.1(A1)时北虫草菌丝和子实体生长过慢，质量也略差；小麦与水的比例为1∶1.5(A3)和1∶1.7(A4)时北虫草菌丝和子实体因缺氧而生长不良；小麦与水的比例为1∶1.9(A5)时北虫草菌丝生长严重滞后，甚至不出草。根据对北虫草子实体鲜质量的比较证明：A2是培养北虫草的培养基的最佳料水比；A1含水量不足，与A2之间差异明显；A3含水量过高，同样与A2差异明显；A4与A5之间没有显著差别，均为生长不良。

北虫草；料水比；人工培养 ；子实体；产量

北冬虫夏草(Cordycepsmilitaris)又名蛹虫草，蛹草，是有名的虫寄生嗜低温真菌，也是一种天然滋补品和名贵中药材。过去以采挖野生虫草入药，但由于野生虫草的产地具有特殊生态环境和昆虫条件，极大限制了其生长区域和生产量[1]。目前人工栽培北虫草多采用小麦作为培养基[2]。本文通过不同料水比的对比试验，筛选适合北虫草生长的最佳培养基料水比配方，以期为生产提供科学依据，使之获得高产、优质、高效的栽培效果。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验仪器有分析天平、电热恒温干燥箱、高压灭菌锅、温度计、无菌工作台。

供试菌种为沈阳农业大学食用菌研究所提供的固体菌种。

1.2 试验方法

1.2.1 培养基配方 培养基配方见表1。

1.2.2 研究的技术路线 北虫草人工栽培的研究路线如下：

培养料→装瓶→聚丙烯封口→高压灭菌→冷却→接种(无菌条件下)→菌丝生长、转色→原基形成→子实体生长→出草→采收→称重→统计分析。

表1 不同含水量培养基试验

(1)装瓶与灭菌。取洗净的罐头瓶25个，按照表1制作栽培瓶：每5瓶为一组，每瓶均装入小麦30 g，再分别加入水33 mL、39 mL、45 mL、51 mL、57 mL。培养瓶装好后用聚丙烯塑料封口，橡皮圈扎口，整理好后送入高压灭菌锅。高压下保持温度121 ℃ 1 h，温度降下来后出锅。

(2)接种。待培养瓶冷却(温度降至25 ℃以下)后，在无菌条件下进行接种，接种前应对接种室和工作台进行彻底消毒，以免产生杂菌。接种时，在无菌接种室，点燃酒精灯，将接种匙在酒精灯上炙烤一下，然后用接种匙在试管里挖出一块带有菌种的培养基，再迅速地放入栽培瓶内，然后迅速将栽培瓶上的聚丙烯塑料封口封上，以防感染杂菌。

(3)菌丝培养期管理。保证培养室的环境良好是保证出草的前提，所以在接种完毕后，放在通风散射光的环境下。由于北虫草生长初期最容易被污染，所以通风不要过大，控温在16 ℃ 左右[3],光照为自然散射光为好，湿度以地面潮湿即可，培养20 d左右菌丝长满瓶。菌丝长满后，进入转色阶段。此阶段要注意温度均衡，培养瓶不能移动。

当培养5 d后，用肉眼可观察到培养瓶内料面上有白色菌丝出现，但覆盖面积不大，小于20%，室温在11～13 ℃。在培养至第9天时观察，开始有培养瓶中虫草菌丝长满，直到培养至20 d时，部分培养瓶中菌丝覆盖面积接近100%，室温在11～18.5 ℃。

(4)子实体原基形成期管理。待菌丝长满瓶后，菌丝呈白色，此时不要急于见光，继续培养3 d后，做好如下工作:①每天光照12 h，散射光要充足，但不能有直射光.晚上用40 W灯泡两盏补照。②注意通风，但是风不要太大。③白天保持室温20～24 ℃，晚上室温10～14 ℃并维持8～10 h，之后继续升温至20～24 ℃。④空气湿度65%为好，只要地面常湿即可达到。每天按上法管理，12 d左右菌丝扭结。在培养基表面上长出一些小小的瘤状隆起即为原基。此期间把受杂菌污染严重的培养瓶挑出，以免影响调查分析。

在培养至25～30 d时，可观察到料面上长出一些小小的瘤状隆起物，即为虫草子实体原基开始分化。室温在16～20 ℃。并且大部分开始进入转色阶段。(该生长阶段进行了受杂菌污染培养瓶的挑出工作，结果表明部分A4和A5的培养基受杂菌污染较严重，挑出后仍保持试验数量指标)。

(5)子实体生长、出草管理。当菌丝由白色逐渐转变为橘黄色时，就由菌丝生长进入了子实体生长阶段。此期间，温度保持20～24 ℃之间，每天光照时间不少于10 h，要有充分散射光。每天通风两次，瓶口因用橡皮圈扎口，能保证瓶内外有微氧呼吸；湿度增加到80%～90%。通过对温度、湿度、光照、通风各外部条件的调节，加快北虫草子实体的生长。从子实体原基形成到子实体形成需20～30 d。

(6)采收。 经过60～67 d的培养， 待子实体长成上粗下细的棒状，且表面出现橘红色粒状子囊壳，手触不光滑，子实体长达5～8 cm时 ，表明子实体生长成熟，即可采收，采收时用带弯头的小铲小心将子实体从基部铲下，不要伤及子实体。将五组从不同培养基采收的北虫草，分别对5个样品进行称重(鲜质量)以及试验分析。

1.3 观察和测算方法

1.3.1 跟踪观察 从培养瓶上架后，每天仔细观察、记录北虫草每个时期的形态变化和不同培养基配方虫草的生长形态，以及温度等培养条件的变化。

1.3.2 平均鲜质量的计算 由于培养北虫草时条件有限，空气湿度有些不足，菌丝和子实体的生长效果不是太好，但是从实验过程中对子实体的感官观察可以看出本次试验达到预期目标。而因为子实体数量较少，因此子实体的产量用各组平均鲜质量来比较。每组的平均鲜质量的计算公式为：

每组平均鲜质量=每组子实体鲜质量(g)之和/瓶数

2 结果与分析

2.1 测定结果

2.1.1 不同培养基配方对北虫草子实体生长速度的影响 不同培养基配方北虫草子实体生长情况如表2。

表2 不同含水量培养基子实体生长速度的比较

由表2和图1可以看出，A1(1∶1.1)和A2(1∶1.3)配方培养基子实体生长速度最快，但A2与A1之间的差距甚大；A3、A4和A5之间，A3生长较快，A4和A5最慢，但A3、A4和A5生长速度与A1和A2比较，仍显著较慢。

图1 不同含水量培养基菌丝体生长速度的比较柱状图

2.1.2 不同培养基配方对北虫草子实体产量的影响 试验表明：不同含水量的培养基配方对北虫草生长影响很大。

由表3和图2可以看出配方A2生长最好，平均鲜质量为2.10 g瓶-1；其次是配方A1生长较好，平均鲜质量为2.1 g瓶-1；配方A3和A4和A5生长最差，平均鲜质量为0.48 g瓶-1、0.48 g瓶-1和0.62 g瓶-1。由图2可以明显看出，最大值与最小值之间相差很大。

表3 不同配方北虫草子实体鲜质量的比较

图2 不同配方北虫草子实体鲜质量的比较柱状图

2.1.3 不同含水量培养基对北虫草产量的影响 由子实体的长势可以看出：五种不同含水量培养基配方培养出的北虫草子实体外观也各有不同。A1配方培养出的虫草子实体颜色较深，但是子实体较为纤细而且长度较短；A2配方培养出的虫草子实体颜色中等，子实体较为粗壮，长度也最长，为4～9 cm； A3、A4和A5配方培养出的虫草子实体极为稀少，即使有子实体，也形成苔状。

不同培养基配方中以A2培养基最好。可以看出A2培养基培养的北虫草子实体生长粗细均匀且较粗，子实体平均鲜质量较大、出草产量最好；A1培养基培养的北虫草子实体较为纤细而且较短，产量较低； A3、A4和A5培养基配方培养的北虫草子实体最少，产量极低。

2.2 不同含水量培养基配方分析

本试验中采用了小麦作为培养基主要组成成分，以不同水的含量来进行对比，并以此作为根据来检验各种水含量的培养基对北虫草菌丝生长及子实体产量的影响。试验中的观察可得出以下结论：A1培养基含水量过低，导致北虫草菌丝和子实体生长滞后；A3—A5培养基含水量过高，导致北虫草菌丝生长中容易感染杂菌，并且影响子实体产量。

由此可以初步推断：适合北虫草菌丝和子实体生长的配方最佳料水比为1∶1.3。而A1培养基中子实体生长过慢的原因是含水量过低并且空气湿度过低，菌丝生长受影响；A3—A5菌丝和子实体生长慢的原因是培养基含水量过高，导致菌丝呼吸作用受影响，而且导致杂菌易于产生。

所以，适合用于生产的培养集中的最佳料水比为1∶1.3。

3 结论与讨论

3.1 结论

不同含水量培养基配方中以料水比为1∶1.3的培养基最好。A2培养基培养的北虫草子实体生长粗细均匀且较粗，子实体平均鲜质量较大、出草质量最好；A1培养基培养的北虫草子实体纤细且产量不如A2；A3—A5培养基培养出的北虫草因含水量过高质量差，出草量低。 因此，建议采用料水比为1∶1.3的培养基大规模人工培养北虫草。

[1] 葛蓓蕾，江晓璐.北虫草的研究现状[J].中国食用菌，1999，18(1)：26-27

[2] 张会敏,宋健.不同培养基对北虫草氨基酸含量影响分析[J].齐鲁药事,2007，26(12)：725-726

[3] 侯玮，吴亚江.北虫草栽培技术要点[J].中国食用菌，1995(3)：27

Effects of Different Culture Media of Moisture Content on Growth ofCordycepsmilitaris

Lou Yanfeng
(Bureau of Forestry in Huludao City,Huludao 125000,China)

The effects of different culture media of moisture content on growth ofCordycepsmilitariswere studied. Results showed that the growth ofCordycepsmilitarisand the fruiting body are optimal when the mass ratio of wheat to water is 1∶1.3 (A2);the growth of hyphae & fruit body forCordycepsmilitarisis very slow and the quality is much poor while the ratio of wheat to water is 1∶1.1 (A1);the growth of hyphae & fruit body forCordycepsmilitarisis poor due to hypoxia while the ratio of wheat to water are 1∶1.5 (A3) & 1∶1.7 (A4);when the ratio of wheat to water is 1∶1.9 (A5),the growth ofCordycepsmilitarisis seriously lag, even without grass.According to comparison of fresh quality ofCordycepssinensis, the ratio of wheat to water (A2) is the optimal ratio to cultureCordycepsmilitaris; the moisture content is insufficient ;the difference between A1 &A2 are significant; the moisture content of A3 is very high,the difference between A3 &A2 are significant too; the difference between A4 and A5 is not significant,their growth are all poor.

Cordycepsmilitaris; ratio of material to water ; artificial culture; fruiting body;yield

1005-5215(2017)06-0052-03

2017-03-28

娄彦峰(1988-)，男，辽宁葫芦岛人，大学，助理工程师，现从事林业经济管理工作.

Q939.5;R282

A

10.13601/j.issn.1005-5215.2017.06.020