茶色素对心肌缺血离体蟾蜍心脏活动的预防作用

2017-06-23王子丹刘克敏孙艺平迟鑫明张冬梅赵心宇

中国老年学杂志 2017年11期

关键词：后叶素离体蟾蜍

傅雷王子丹刘克敏孙艺平迟鑫明张冬梅赵心宇

(大连医科大学基础医学院，辽宁大连 116044)

·基础研究·

茶色素对心肌缺血离体蟾蜍心脏活动的预防作用

傅雷王子丹刘克敏孙艺平迟鑫明张冬梅赵心宇1

(大连医科大学基础医学院，辽宁大连 116044)

目的观察茶色素(TPs)预处理对心肌缺血离体蟾蜍心肌收缩力、心率和心电图的影响。方法选取50只蟾蜍随机分为对照组和实验组。对照组分为任氏液组和模型组。实验组分TPs预处理低、中和高剂量(200 mg/L、400 mg/L和800 mg/L)+垂体后叶素组。应用BL-420S生物机能实验系统同时记录离体蟾蜍心肌收缩力和心电图曲线，并进行心肌收缩力、心率和心电图的统计学分析。结果垂体后叶素组与任氏液组比较，心肌收缩力、心率和心电图QRS波峰值均明显减小(均P<0.05)，心电图T波峰值明显增大(P<0.001)。灌流垂体后叶素与灌流不同浓度TPs比较：心肌收缩力，TPs为200 mg/L略有减小，差异无统计学意义(P>0.05)，TPs为400 mg/L和800 mg/L时明显增加(P<0.05)；心率略有变化，但差异无统计学意义(P>0.05)；心电图，QRS波幅和T波峰值略有变化，差异无统计学意义(P>0.05)。结论一定浓度的TPs能预防由垂体后叶素引起的离体蟾蜍心脏活动低下。

茶色素；垂体后叶素；心肌收缩力；心肌缺血

茶色素(TPs)是首先从绿茶中提取的一类水溶性酚性色素，分为茶黄素(TFs)、茶红素(TRs)和茶褐素，并提出了TPs的分子式与结构式。近些年对TPs的研究已有一定进展，尤其是对冠心病、心绞痛、心肌梗死、心力衰竭、心律失常等多种心脑血管性疾病显示出良好的疗效〔1〕。董帅等〔2〕研究发现，TPs在低钙和高钙条件下对离体蟾蜍心肌收缩力有双向调节保护作用。汪洋等〔3〕研究发现，这种保护作用可能与心肌细胞膜上的钙离子通道、M受体及β受体有关，而在心肌缺血状态下TPs对离体蟾蜍心脏活动未见文献报道。本文旨在观察TPs预处理对离体蟾蜍心肌缺血心脏功能的影响。

1 材料与方法

1.1 动物中华蟾蜍50只，体重(85±25)g，由大连医科大学动物实验中心提供。所有蟾蜍分为对照组和实验组。对照组分为任氏液组和模型组；实验组分为低、中和高3个剂量TPs预处理+垂体后叶素组，分别是TPs 200、400、800 mg/L+垂体后叶素。每组10只蟾蜍。

1.2 试剂与仪器 TPs由江西绿色制药有限公司生产并鉴定，鉴定TPs纯度以游离儿茶素计36.27%，批号20150920。垂体后叶素，上海第一生化药业有限公司，批号20140617。任氏液按标准配方配制，所用的NaCl、KCl、CaCl2等试剂均为化学纯级试剂。BL-420S生物机能实验系统和张力换能器由成都泰盟公司生产。

1.3 方法

1.3.1 模型制备蛙心插管模型参照文献〔4，5〕制备。按照文献〔6〕方法，应用含有垂体后叶素0.1 U/ml的任氏液灌流离体蟾蜍心脏制备心肌缺血模型。

1.3.2 给药方法任氏液组离体蟾蜍心脏只灌流任氏液；模型组为任氏液灌流基础上改灌流含有垂体后叶素0.1 U/ml的任氏液；实验组先灌流不同浓度TPs(200、400、800 mg/L)，然后再灌流含有0.1 U/ ml垂体后叶素的任氏液。心室外容积始终固定为1.0 ml，每次换液稳定后记录40 min。

1.3.3 检测指标取2个铁支台放置于实验台上，分别用于固定蛙心插管和张力换能器，参照文献〔7〕同时记录离体蟾蜍心肌收缩力和心电图。

1.4 统计学分析应用SPSS19.0软件行t检验。

2 结果

2.1 心肌缺血对离体蟾蜍心脏活动的影响在正常蟾蜍离体蛙心标本灌流任氏液稳定后，改灌流含有0.1 U/ml垂体后叶素任氏液溶液，换液前后比较心肌收缩力明显减小(P<0.01)，心率明显减少(P<0.05)，心电图QRS波峰值明显减小(P<0.001)，心电图T波峰值明显增大(P<0.001)。见表1，表2。

2.2 TPs对心肌缺血离体蟾蜍心脏活动的影响

2.2.1 TPs预处理对心肌缺血离体蟾蜍心肌收缩力的影响在正常蟾蜍离体蛙心标本灌流任氏液稳定后，改灌流含有不同浓度TPs任氏液后，换液前后心肌收缩力开始增加，灌流含有200 mg/L TPs任氏液溶液后心肌收缩力略有增加，但无统计学意义(P>0.05)；而灌流含有400 mg/L或800 mg/L TPs的任氏液后心肌收缩力明显增加(P<0.05)，见表1。在灌流含0.1 U/ml垂体后叶素任氏液之前，先灌流含有200 mg/L TPs的任氏液，心肌收缩力略有增加，但差异无统计学意义(P>0.05)；而先灌流含有400 mg/L或800 mg/L TPs的任氏液，心肌收缩力显著增加(P<0.05)。即一定浓度的TPs预处理对心肌缺血引起的心肌收缩力下降有对抗作用。

2.2.2 TPs预处理对心肌缺血离体蟾蜍心率的影响在正常

表1 TPs预处理对心肌缺血离体蟾蜍心肌收缩力及心率的影响±s，n=10)

蟾蜍离体蛙心标本灌流任氏液稳定后，改灌流含有不同浓度TPs任氏液溶液，换液前后心率开始增加，但差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。在灌流含0.1 U/ml垂体后叶素任氏液溶液之前，先灌流含有不同浓度TPs任氏液，心率略有增加，但差异无统计学意义(P>0.05)。即一定浓度的TPs预处理对心肌缺血引起的心率下降有对抗作用。

2.2.3 TPs预处理对心肌缺血离体蟾蜍心电图QRS波峰峰值的影响在正常蟾蜍离体蛙心标本灌流任氏液稳定后，改灌流含有不同浓度TPs任氏液，心电图QRS波略有增加，但差异无统计学意义(P>0.05)。在灌流含0.1 U/ml垂体后叶素任氏液溶液之前，先灌流含有不同浓度TPs任氏液，心电图QRS波略有下降，但差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。即一定浓度的TPs预处理对心肌缺血引起的心电图QRS波下降有对抗作用。

表2 TPs预处理对心肌缺血离体蟾蜍心电图QRS波群及T波峰值的影响±s，n=10，mV)

与灌流任氏液时比较：1)P<0.05；2)P<0.001；下表同

2.2.4 TPs预处理对心肌缺血离体蟾蜍心电图T波峰值的影响在正常蟾蜍离体蛙心标本灌流任氏液稳定后，改灌流含有不同浓度TPs任氏液，换液前后心电图T波峰值略有变化，但差异无统计学意义(P>0.05)。在灌流含0.1 U/ml垂体后叶素任氏液之前，先灌流含有不同浓度TPs任氏液，心电图T波峰值略有变化，但差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。即一定浓度的TPs预处理对心肌缺血引起的心电图T波峰值上升有对抗作用。

3 讨论

本实验发现，TPs能对抗心肌缺血后心脏活动下降，起到对心肌缺血的预防作用。垂体后叶素是从动物垂体中提取的，内含加压素和催产素，加压素可以直接收缩小动脉和毛细血管，使冠状动脉收缩从而升高血压，造成心肌缺血。当心肌急性缺血时，心室壁张力降低，引起心功能不全，心电图和心率同样会发生变化〔4〕，本实验与上述结果基本相符。

本实验发现TPs对心肌缺血离体蟾蜍有预防作用，这是因为TPs具有清除氧自由基和抗氧化等作用〔8〕。有研究表明心肌缺血损伤发生的机制之一是组织局部氧自由基产生增加并集聚，且通过对膜的脂质过氧化，加剧心肌损伤。心肌损伤后心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性下降，心肌丙二醛(MDA)含量增高，SOD等氧自由基清除剂的增加可减轻心肌缺血〔9〕。氧自由基生成及脂质过氧化反应增强是心肌缺血损伤的主要机制之一〔10〕。TPs可以提高SOD的活力，降低MDA含量，削弱脂质过氧化作用，清除氧自由基，增强心肌供氧和供血能力〔11〕。SOD活性增强能够清除体内过多的氧自由基，产生大量的氧分子，从而增加血液中氧分子含量，缓解缺氧缺血症状〔12〕。富丽等〔13〕通过邻苯三酚自氧化和抗体外氢氧根法分别测定TPs和维生素C的抗氧化作用发现，虽然TPs不如维生素C降低自氧化速率的能力，但是TPs的体外抗氧化和抗自由基强于维生素C。TPs对心肌缺血更深入的机制探讨尚待进一步研究。

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