白术多糖对小鼠免疫调节作用的影响

李鹏　贺颂　朱鸿翔　徐圭?肖宇辰

【摘要】目的 研究中草药白术多糖成分对正常小鼠的免疫调节作用。方法 分别以白术多糖浓度为125，250，500 mg/（kg·d）小鼠灌胃，对照组予以等量的生理盐水，在连续灌胃30 d之后，通过血清抗体的测定、小鼠碳廓清实验的检测、脾脏以及相关脏器指数来观察白术多糖在免疫调节上的作用。结果 在250～500 mg/（kg·d）剂量范围之内，尤其是在300 mg左右我们发现白术多糖在小鼠碳廓清指数一级Con A所诱导的小鼠脾脏淋巴细胞转化能力有明显的提高。结论 白术多糖对正常小鼠具有一定的免疫调节作用。

【关键词】白术；多糖；免疫调节

【中图分类号】R285.5 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-6681.2016.32.0.01

多糖存在于动植物中，是由单糖形成的天然高分子的化合物，近年来，许多国内外的科学家们发现动植物的多糖及其多糖复合物在参与和介导细胞免疫和凋亡等调节上具有很大的作用。大量研究实验表明动植物多糖具有免疫调节生物活性和抗肿瘤活性的作用[1-2]。主要是基于其毒性小，作用广泛，以及功能较多，目前已成为医药界的热门研究领域。然而白术作为最常用的中草药，具有健脾胃肠、燥湿利水、益气补中、安胎、止汗以及促进血液循环之功效。本文就白术多糖的免疫学的研究领域进一步的探索。

1 材料与方法

1.1 材料

实验动物小鼠是来自于昆明，雌雄并重兼用体重的范围是在（21±2.1）g，由温州医科大学实验动物中心提供。

1.2 试剂白术多糖

惠州市绿源保健品有限公司；灵芝多糖：南通市力健保健品有限公司。

1.3 实验仪器与设备离心机

日本波速科技有限公司、HP CLASS100培养箱、超净工作台来自江苏安泰苏净集团空气技术有限公司、MK3553 酶联免疫吸附检测仪来自于Thermo Labsystems 公司；倒置显微镜来自浙江光电仪器科技公司；型号UV-1800 紫外-可见分光光度计韩国岛津公司。

1.4 动物分组

取雌雄并重昆明小鼠150只，按照随机数字法进行随机分成3组，每组50只。实验方案：分为初次免疫和加强免疫；初次免疫即在实验的第一天在三组小鼠的大腿内侧腹股沟的皮下进行注射相对于的抗原，对照组按照相对于的比例进行生理盐水的注射，排除其他的因素。1周后加强免疫，即和初次免疫相同。在实验进行到第14天，进行小鼠眼球的采血，并立即加入3 mL 0.1%碳酸钠的溶液中，设定在波长675 nm处进行OD值的测定，同时以碳酸钠溶液作空白对照。最后将小鼠进行颈椎脱臼处理，分别称取脾脏、肝脏的质量进行测量[3-5]。

1.5 白术多糖对Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的实验过程中，按照1.5节的方法对小鼠进行实验分组并且进一步的给药，然后进行无菌情况下取小鼠脾脏约5 g，放入预冷后的PBS溶液中，再将其捣碎，进行上清溶液的吸取，放入离心机进行1500 r/min离心。弃掉上清液，用1 mL无菌水重悬细胞沉淀以裂解红细胞，静置40 s之后，加入1.5%

NaCl溶液将其调整到等渗状态。台盼兰染色计数，活细胞数大于 95%，将脾细胞悬液加入96孔培养板中，每孔100 μL，实验孔加入10 μL 50 μg/mL ConA，对照孔加入

10 μLRPMI-1640培养液，然后放置于5% CO2培养箱时间为48 h，再者每孔加入20 μL 5 mg/mL MTT溶液，继续培养4 h，加入异丙醇100 μL/孔，于5% CO2 37℃培养箱放置过夜后，最后用酶标仪进行测量各孔OD值，参考波长为

630 nm、测定波长为570 nm。

1.6 统计学方法

应用SPSS 16.0统计学软件对数据进行分析处理，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

在以上实验中，白术多糖组的校正碳廓清指数α要明显的高于对照组，同时，250 mg，500 mg两组数据要交对照组有显著的差异（P<0.05），这就表示白术多糖能够显著的提高单核巨噬细胞的吞噬活性，同时增强小鼠的免疫能力，加速碳粒的清除。低剂量的白术多糖与空白对照有明显的差异，表明白术多糖有一定的免疫作用，白术多糖的各组计量之间的的胸腺指数没有显著性差异（P>0.05）。

3 结 论

在本次的白术多糖实验过程中，并没有发现白术多糖的高剂量对小鼠的免疫功能强于中低计量的情况，这个很可能是和多糖在量效之间有一定的关系，当然还有和白术多糖分子有很大的关系，当然上述的研究结果可以表明，白术多糖可以通过免疫调节的作用，增强巨噬细胞的活性，进一步的提高免疫细胞在应对抗原入侵时的抵抗力，能更好的发挥免疫的调节作用。

参考文献

[1] 胡启明，梅余霞，梁运祥.桑黄多糖体外免疫活性研究[J].食品科技，2013，38（9）：142-145.

[2] 吕 峰，林勇毅，陈代园.惹该仁活性多糖对小鼠的免疫调节作用[J].中国食品学报，2013（6）：20-24.

[3] 徐贤柱，饶 华，蔡险峰，等杜仲叶多糖提取及对小鼠免疫功能影响研究[J].时珍国医国药，2013（3）：541-542.

[4] 刘亚娟，陈赛娟，李海丽，等.枸杞多糖对生长獭兔生产性能及血清生化指标的影响[J].中国饲料，2013（20）：22-25.

[5] 尹美珍，胡 岗，李仲娟，等.艾叶多糖对小鼠腹腔巨噬細胞内酶活性的影响[J].时珍国医国药，2013，24（9）：2118-2120.

本文编辑：刘帅帅