精子DNA碎片率与体外受精实验室结局的关系

2017-06-06陈捷

中国实用医药 2017年12期

【摘要】目的探讨精子DNA碎片率与体外受精（IVF）实验室结局的关系。方法对IVF治疗的男性患者开展常规精液检查、精子DNA碎片率检查以及精子核蛋白不成熟度检查。分析精子DNA碎片率与IVF优胚率的关系。结果精子DNA碎片率与男性年龄呈正相关（r=0.184， P=0.019<0.05），与前向运动精子百分率呈负相关（r=-0.219， P=0.008<0.05），与优胚率呈负相关（r=-0.220， P=0.008<0.05），与精子浓度、正常精子百分率、IVF受精率无明显相关性（P>0.05）。精子核蛋白不成熟度与精子浓度呈负相关（r=-0.327， P=0.001<0.05），与正常精子百分率呈负相关（r=-0.226， P=0.008<0.05），与男性年龄、前向运动精子百分率、优胚率、IVF受精率无明显相关性（P>0.05）。结论开展精子DNA碎片率检测，可对IVF优胚率起到一定的预测作用。

【关键词】体外受精；精子DNA碎片率；优胚率

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.12.040

精子DNA碎片率可对机体遗传物质DNA所受的损伤进行有效反映，对精子DNA碎片率开展检测，可对精子的功能状况进行有效预测[1-5]。本次研究就通过对开展IVF治疗的男性患者开展常规精液检查、精子DNA碎片率检查以及精子核蛋白不成熟度检查，探讨精子DNA碎片率与体外受精实验室结局的关系。报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料选取2016年1～3月本院收治的患有不育症，开展体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗的患者，共112对。男112例，年龄23～41岁，平均年龄（31.5±5.1）岁；女112例，年龄20～40岁，平均年龄（29.6±3.8）岁。对少弱精子症较为严重的患者，或获卵数<5个进行排除。

1. 2 研究方法首先对男性患者的精液进行采集以及处理。按照WHO实验室手册上的相关内容进行操作。采集精液前禁欲2～7 d，采集方法为手淫法，采集后置于恒温板，温度控制37℃，于1 h内开展检测。采用计算机对精子浓度，以及前向运动百分率进行分析，采用Diff-Quik然后对精子的形态学开展分析。采用染色质扩散法对精子DNA碎片开展检测，于预制载玻片上涂抹含精琼脂糖精液，通过变性、去核蛋白、脱水、染色后，借助显微镜对精子进行观察。如精子存在大、中晕环，则为正常精子，其余为碎片异常精子。以碎片精子数与计数总数（500个）之比为精子DNA碎片率[6]。精子核蛋白不成熟度采用苯胺蓝染色法进行检测，检测试剂购自山东德惠生物技术有限责任公司，检测方法参照试剂盒说明书进行。按照常规方法，为患者开展降调节，同时开展促排卵，于卵口取IVF常规法授精，授精完成16～18 h，对受精情况进行观察。第3天对胚胎发育情况进行观察。如胚胎的评分为6Ⅰ、6Ⅱ、7Ⅰ、7Ⅱ、8Ⅰ、8Ⅱ，则为优质胚胎。

1. 3 统计学方法采用SPSS17.0统计学软件进行统计分析。相关性采用Spearman相关分析，双测检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 影响精子DNA碎片率的相关因素精子DNA碎片率与男性年龄呈正相关（r=0.184， P=0.019<0.05），与前向运动精子百分率呈负相关（r=-0.219， P=0.008<0.05），与优胚率呈负相关（r=-0.220， P=0.008<0.05），与精子浓度、正常精子百分率、IVF受精率无明显相关性（P>0.05）。见表1。

2. 2 影响精子核蛋白不成熟度的相关因素精子核蛋白不成熟度与精子浓度呈负相关（r=-0.327， P=0.001<0.05），与正常精子百分率呈负相关（r=-0.226， P=0.008<0.05），与男性年龄、前向运动精子百分率、优胚率、IVF受精率无明显相关性（P>0.05）。见表2。

3 讨论

目前临床上对精子DNA损伤的检测手段主要包括两种，一种是直接法，另一种是间接法。直接法是通过将探针直接结合入精子DNA发生损伤的部位，对DNA的断裂进行直接检测[7]。间接法是通过对碎片化DNA易于变性的特点进行利用，对碎片化DNA的变性易感性进行检测[8]。精子染色质结构分析（SCSA）法的检测基础为流式细胞技术，可测定样本量大，测定结果稳定性强，更为可靠。但该检测方法成本高，花費昂贵，普及度不高。因此本次研究采用的是精子染色质扩散试验（SCD）法，该方法检测结果同SCSA相关性良好，且花费低，耗时短[9-11]。

本次研究结果显示，精子DNA碎片率与男性年龄呈正相关（r=0.184， P=0.019<0.05），与前向运动精子百分率呈负相关（r=-0.219， P=0.008<0.05），与优胚率呈负相关（r=-0.220， P=0.008<0.05），与精子浓度、正常精子百分率、IVF受精率无明显相关性（P>0.05）。与相关的研究结果相符[2]。有学者通过设置生育对照组，并未发现精子DNA碎片率与年龄呈相关性，提示年龄对于精子DNA碎片率所起的并非主要作用[3]。同时本次研究结果显示，精子核蛋白不成熟度与精子浓度呈负相关（r=-0.327， P=0.001<0.05），与正常精子百分率呈负相关（r=-0.226， P=0.008<0.05），与男性年龄、前向运动精子百分率、优胚率、IVF受精率无明显相关性（P>0.05）。和前人的研究结果相符[12-14]。

综上所述，开展精子DNA碎片率检测，可对IVF优胚率起到一定的预测作用。

参考文献

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