性病门诊378例女性宫颈分泌物的HPV基因型分析

郑 颖，王 宁，周 哲，李志博，任建军

• 临床研究 •

性病门诊378例女性宫颈分泌物的HPV基因型分析

郑 颖，王 宁，周 哲，李志博，任建军

目的 检测和分析性病门诊女性患者宫颈分泌物中人乳头瘤病毒(HPV)的基因型别。方法 收集我院性病门诊就诊的女性患者378例，按患者有无高危接触和宫颈口有无尖锐湿疣症状划分为3组，即有接触有症状组（161例）、有接触无症状组（117例）和无接触无症状组（100例）。取3组患者脱落细胞，采用反向分子杂交法进行HPV基因分型检测。结果 性病门诊378例女性宫颈分泌物HPV阳性率为56.61%(214/378)，有接触有症状组、有接触无症状组和无接触无症状组的阳性率分别为98.75%（159/161）、40.17%（47/117）和8.00%（8/100），3组分别检出22种、14种和5种HPV基因型别，检出的主要型别是HPV6、11、16、58、56、18、33、68。有接触有症状组和有接触无症状组单一感染和复合感染的感染率差异无统计学意义（P＞0.05），在多重复合感染中，以二重和三重感染为主，最多发现八重感染。有接触有症状组低危型121例次（76.10%），高危型99例次（62.26%），有接触无症状组低危型35人次（74.46%），高危型26例次（55.32%），两组感染率较高，但差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 HPV6、11、16、58、56、18、33、68是性病门诊女性患者宫颈感染HPV的主要型别，健康体检者中亦能查出，临床应加强对性病门诊女性就诊者宫颈HPV基因的检测，及对HPV阳性患者进行定期的跟踪随访，尤其是高危型和复合感染患者。

性病门诊；分泌物，宫颈；人乳头瘤病毒；基因分型

郑 颖

[J Pract Dermatol, 2017, 10(1):19-21]

人乳头瘤病毒(human papilloma viruses, HPV)是一种高度异质性、小DNA双链病毒。根据基因组的同源性可将其分为多种型别，目前已有270多种HPV型别被鉴定，其中42种基因型与生殖道疾病有关[1]，30种型别在子宫颈癌中被发现[2]。依据不同型别HPV致癌危险性将其分为低危型和高危型两大类，低危型可引起尖锐湿疣及低度子宫颈上皮内瘤等；高危型可引起尖锐湿疣、外生殖器癌、宫颈癌及高度子宫颈上皮内瘤，其与宫颈癌关系密切[3]。性病门诊女性患者有的因发现疣状增生物而检查治疗，也有因高危接触后害怕传染而要求检查，这两类患者性行为活跃程度较高或接触危险因素较多，其宫颈感染HPV的机率较大，也有要求正常体检的健康者，这类患者宫颈感染HPV的概率多大呢？为了解其HPV感染情况和感染特点，特对我院性病门诊就诊的378例女性患者利用反向分子杂交法检测23种HPV亚型，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病例 2013年9月—2016年5月本院性病门诊首次就诊的女性患者378例，年龄17～63岁，平均年龄（28.32±7.50）岁。根据患者有无高危接触和宫颈口有无尖锐湿疣症状划分3组，即有接触有症状组（161例）、有接触无症状组（117例）和无接触无症状组（100例）。纳入标准：有流行病学接触史，临床上可见宫颈口有疣状增生物的患者纳入有接触有症状组；有流行病学接触史，但临床无尖锐湿疣的症状，则纳入有接触无症状组；无流行病学接触史和无尖锐湿疣的症状患者纳入无接触无症状组。排除标准：均排除梅毒、艾滋病、生殖道沙眼衣原体和淋病。

1.1.2 诊断标准[4]患者有流行病学接触史，临床一般无自觉症状，皮损可表现为局部细小丘疹，针头至绿豆大小，亦可为乳头状、鸡冠状或团块状赘生物，可单发或多发，颜色多为粉红至深红色，有一定的脆性。实验室检查主要有核酸检测。

1.1.3 试剂和仪器 HPV基因分型检测试剂盒（深圳亚能生物技术有限公司），可检测23种HPV基因亚型，包括18种高危型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83)及5种低危型(HPV6、11、42、43、81)。TL988实时荧光定量PCR仪（西安天隆科技有限公司）和FYY-3型分子杂交仪（江苏兴化市分析仪器厂）。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 用无菌棉拭子将宫颈口过多的分泌物擦拭干净，有接触有症状组，更换棉拭子后擦拭增生物表面，其他两组则将棉拭子紧贴子宫颈口，稍微用力转动2周，将脱落细胞置细胞保存管中立即送检，后置-20℃保存，1周内检测完毕。

1.2.2 试验方法 严格按照试剂盒说明书进行操作，试验过程做好质量控制。

1.2.3 统计学方法 利用SPSS19.0统计软件进行统计分析，卡方检验，P＜0.05时为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 性病门诊378例患者宫颈分泌物HPV检测结果

性病门诊378例女性患者宫颈分泌物HPV检测阳性率为56.61%(214/378)，其中有接触有症状组阳性率98.75%（159/161），检测出22种HPV基因型，主要有 HPV6（44.72%）、11（29.19%）、16（15.53%）、58（8.69%）、56（7.45%）、18（6.83%）、33（6.83%）、68（6.83%）。有接触无症状组阳性率为40.17%（47/117），共检测出14种HPV基因型，主要有 HPV 6（17.09%）、11（13.68%）、52（6.84%）、53（5.13%）、16（4.27%）、51（3.42%）、18（2.56%）。无接触无症状组阳性率为8.00%（8/100），共检测出5种HPV基因型，主要有 HPV 6（4.00%）、11（3.00%）、33（1.00%）、16（2.00%）、81（1.00%）。

2.2 性病门诊378例患者宫颈分泌物HPV基因型特点

性病门诊378例患者宫颈分泌物HPV基因型特点分析见表1。有接触有症状组和有接触无症状组单一感染和复合感染的感染率差异无统计学意义（P＞0.05），在复合感染中，均以二重和三重感染为主，最多发现八重感染。有接触有症状组低危型121例次（76.10%），高危型99例次（62.26%）；有接触无症状组低危型35例次（74.46%），高危型26例次（55.32%），两组感染率较高，但差异无统计学意义（P＞0.05）。

3 讨论

预防和消除女性HPV感染，是宫颈癌防治重点，自2006年6月美国食品药品管理局（FDA）正式批准HPV疫苗上市后，世界各国纷纷采取应用疫苗来预防宫颈癌，并逐渐成为共识[5]。目前全球已有100多个国家获准使用宫颈癌预防性疫苗，主要为二价和四价疫苗（HPV16、18型和6、11、16、18型）[6]。本组研究结果显示，性病门诊女性宫颈HPV感染情况复杂多样，性病门诊女性宫颈HPV总感染率56.61%(214／378)，高于文献报道[7]。3组感染HPV基因型别不全相同，有接触有症状组的主要型别为HPV6（44.72%）、11（29.19%）、16（15.53%）、58（8.69%）、56（7.45%）、18（6.83%）、33（6.83%）、68（6.83%），与文献报道的基因类型大致相同[8,9]，与现有的疫苗市场比较不全相同，这有利于我国HPV疫苗研究和药物研发。有资料表明，约有75.00%的性活跃人群在其一生中感染过HPV[10]，本组有接触无症状组和无接触无症状组亦存在一定HPV感染，且有一定比率的高危型HPV患者，说明此部分患者同样应受到临床医生的关注，应扩大HPV的检测人群和加强疫苗预防工作，同时应加强对性活跃女性感染HPV危害性的宣传教育。

表1 性病门诊378例患者宫颈分泌物HPV基因型检测分析 [例（%）]

女性HPV感染常与宫颈癌的发生密切相关，现已明确高危型HPV感染是宫颈癌的发病原因之一[11]，与单纯低危型HPV感染相比，高危型以及高危型合并低危型HPV混合感染患者病程较为顽固，更易复发[12]。同时是否合并感染亦是风险因素，HPV单一型感染使宫颈癌的患病风险增加19.9倍，而复合感染使该风险增加到31.8倍[13]。复合感染型别HPV感染病毒载量高于单一型别HPV感染，癌变相关风险大，致病力较强，病变发展较快，治疗较顽固，复发率较高[14]。本研究有尖锐湿疣症状组含高危型的患者99例次，占61.49%，复合感染76例，占47.80%，其癌变风险最大。临床应加强对就诊者的HPV基因检测，对HPV阳性患者进行定期的跟踪随访，尤其是高危型和复合感染患者。

检测HPV各个基因型的感染率不仅是流行病学调查的需要，其对判断尖锐湿疣患者预后、临床诊疗以及疫苗的研发也有重要的意义[15]。目前HPV的检测方法不断出现，大多原理都是通过检测HPV DNA的存在来确定机体是否受HPV感染，继而对高危型别进行干预治疗，对女性患者宫颈癌变的治疗有重要的临床意义，已受到人们的高度关注。本组采用的是反向分子杂交技术，具有快速、灵敏度高、特异性好且1份标本可同时检测多个HPV基因型别的优点。

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HPV genotype analysis of cervical secretions from 378 female patients of venereal outpatient

ZHENG Ying，WANG Ning，ZHOU Zhe，et al

Xi'an North Hospital Aff liated to Xi'an Medical University, Xi'an 710043, China

Objective To explore the human papilloma virus (HPV) genotypes of female cervical secretions in venereal outpatient. Methods Total 378 cases of female patients from STD clinics were recruited. According to the patients with or without high risk exposure and symptoms of condyloma acuminatum, the patients were divided into three groups, namely a group with contact and symptoms (161 cases), a group with contact and without symptoms (117 cases) and a group without contact and symptoms (100 cases). The exfoliated cells were taken and the method of reverse molecular hybridization was adopted to detect the genotype of HPV. Results HPV positive rate of cervical secretions from 378 female cases of venereal outpatient was 56.61% (214/378). Positive rate of the group with contact and symptoms was 98.75% (159/161), and 22 kinds of HPV genotypes were detected, mainly including HPV6 (44.72%), 11(29.19%), 16 (15.53%), 58 (8.69%), 56 (7.45%), 18 (6.83%), 33 (6.83%) and 68 (6.83%). Positive rate of group with contact and without symptoms was 40.17% (47/117), and 14 kinds of HPV genotypes were detected, mainly including HPV6 (17.09%), 11(13.68%), 52 (6.84%), 53 (5.13%), 16 (4.27%), 51(3.42%) and 18 (2.56%). Positive rate of group without contact and symptoms was 8.00% (8/100), and 5 kinds of HPV genotypes were detected, including HPV6 (4.00%), 11(3.00%), 33 (1.00%), 16 (2.00%) and 81(1.00%). Unitary type infection rate and complex infection rate of the group with contact and symptoms and the group with contact and without symptoms had no statistical difference(P＞0.05). In the multiple complex infection, three and double infection were the main ones, and the most of them were found to be eight infections. Lowrisk type of the group with contact and symptoms was 121cases (76.10%), high-risk pattern was 99 cases (62.26%). Low-risk type of the group with contact and without symptoms was 35 cases (74.46%), high-risk pattern was 26 cases (55.32%). The two groups had high positive rate, but there was no statistical difference(P＞0.05). Conclusion HPV6, 58, 56, 11, 16, 18, 33, 68 are primary genotypes of cervicalsecretions from female cervical in venereal outpatient, which also may be found in healthy examination group. Cervical HPV genetic testing should be strengthened for female venereal patients, and regular follow-up may be carried out on HPV positive patients, especially high risk type and the complex infection patients.

Venereal outpatient；Secretions，cervical；Human papilloma viruses；Genotype

R752.53

A

1674-1293(2017)01-0019-03

2016-08-20

2016-11-10）

（本文编辑 耿建丽）

10.11786/sypfbxzz.1674-1293.20170106

710043，西安医学院附属西安市北方医院（郑颖，王宁，周哲，李志博，任建军）

郑颖，主治医生，专业方向：主要从事皮肤性病专业，E-mail: 279841313@qq.com

任建军，E-mail: 445768825@qq.com