斜面包埋手法在组织石蜡包埋中的运用及体会

2017-06-05潘成然张宪菊陈忠政季昌华

临床与实验病理学杂志 2017年3期

杨洋，于洁，潘成然，张宪菊，郭琳，陈忠政，季昌华

杨洋，于洁，潘成然，张宪菊，郭琳，陈忠政，季昌华

病理技术；石蜡包埋；包埋平整；组织制片

石蜡包埋法是目前病理科最常用的组织包埋方法之一[1]，日常工作中，受组织结构及取材等多因素影响，一个脱水盒中需放置多块组织，在石蜡包埋时，多块组织面难以保证在同一包埋面上，不仅导致组织切片切面不全，影响诊断，而且反复深切或重切，会造成局部病变组织缺失、延误诊断等严重后果。实践工作中，我们运用斜面包埋手法，较好地解决了多块数、多层次类组织包埋的平整度，有效避免因包埋导致的切片不全，现将斜面手法应用在石蜡包埋中及注意事项总结如下。

1 材料与方法

1.1 材料常规选取内镜下黏膜剥离标本、肠类管腔样组织标本、各种囊壁样组织标本、乳腺麦默通微创标本、钬激光前列腺剜除术标本、细针穿刺标本等，所有标本均经规范化取材、脱水、浸蜡处理待包埋。

1.2 方法 (1)注蜡：金属包埋模具先接2/3体积的已溶石蜡，太少不宜控制石蜡凝固时间，太多微倾时溢出。(2)模具斜面制作(图1)：包埋模具微倾置小冷台，另一侧微微翘起，倾角控制在5～10°间，形成斜面提供一个石蜡逐步凝固的环境过程[2]。(3)组织放入(图2)：待包埋组织按包埋面沿先接触冷台的一侧依次放入组织，使组织在石蜡未凝固前已放入，微凝固时固定包埋位置，凝固后包埋镊离开并依次放入后续组织。(4)盖脱水盒底座：包埋完成后，放平包埋模具，将脱水盒底座盖一端入包埋模具上，缓缓放平赶出两者间的气泡后再一次灌注适当石蜡，再次灌注体积最好为脱水盒底座体积的1/3，保证组织脱水盒和石蜡的紧实度。(5)成型分离：移至大冷台，带石蜡凝固后将蜡块于包埋模具分离。斜面手法石蜡包埋过程中，在室温下，冷台温度-10～0 ℃，整个模具凝固过程在10～15 s，依此时间决定包埋速度；成型蜡块脱离模具时请勿机械强行分离，易造成局部包埋面断裂，增加制片难度。

①②

图1 模具斜面制作图2 组织的放入

2 结果

标本经规范化固定、取材、脱水、浸蜡处理后，在常规石蜡包埋中，同一包埋盒内的各块组织间包埋面平整度难以确保，切片显示组织结构不全(图3)，影响诊断医师做出全面准确的诊断；应用斜面包埋手法进行石蜡包埋问题得以解决，便于病理技术组能够切出组织层次结构完整的优良切片(图4)，利于诊断医师判读的准确度。

3 讨论

组织包埋是病理技术基本工作；杂乱无序包埋的组织，不仅导致切片显示不全、影响病理诊断，而且影响后续免疫组化、原位杂交、荧光原位杂交等后续检查。

病理组织标本取材时，若为长条形标本，每个脱水盒放入组织应不超过4条，以提高工作效率。若单条组织处理虽能保障包埋质量，但取材数量太多，对组织复原不便，增加工作量。包埋应按相同方向打开脱水盒、相同次序放入组织，组织若菲薄，应按相同方向翻转90°后组织竖立包埋[3]、盖入脱水盒底座时按同样的方向，以确保制片一致，组织层次及复原图能够与之对应，便于确定组织结构和测量相应区域面积等。组织间紧密平行集中排列包埋，便于制片，为后续如免疫组化、原位杂交、荧光原位杂交等实验技术制片节约试剂，利于制出质优价廉的成品切片。取材的厚度应在2～3 mm，若为囊壁或黏膜剥离样标本取材宽度应为2～3 mm，太薄时组织容易弯曲变形、影响组织结构、难以顺利包埋；太厚时组织处理不佳、影响制片。