鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感（H9亚型）四联灭活疫苗（La Sota株+M41株+HS25株+HZ株）安全性评价

崔艳丽

（黑龙江省兽药饲料监察所黑龙江哈尔滨150069）

鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感（H9亚型）四联灭活疫苗（La Sota株+M41株+HS25株+HZ株）安全性评价

崔艳丽

（黑龙江省兽药饲料监察所黑龙江哈尔滨150069）

鸡新城疫（ND）、鸡传染性支气管炎（IB）、鸡减蛋综合征（EDS）和禽流感（AI）是危害养禽业最主要的传染病，给我国的养殖业带来了巨大的经济损失。因此，四种疾病的四联苗安全性问题显得尤为重要。该疫苗在使用过程中，会存在复杂多变的情况。因此，该实验主要从单剂量接种、单剂量重复接种和一次性超剂量接种进行全方位的安全性评价，重点观察注射部位的变化，包括注射部位组织病变等，连续观察30 d，注射后疫苗完全吸收，证明该疫苗是安全的，从而为用户的正确使用提供指导。

四联；灭活疫苗；安全性

鸡新城疫（ND）、鸡传染性支气管炎（IB）、鸡减蛋综合征（EDS）和禽流感（AI）是危害养禽业最主要的传染病，给我国的养殖业带来了巨大的经济损失。新城疫和禽流感是禽类的高度接触性传染病，传染性支气管炎、减蛋综合征也对世界各国的养禽业造成了严重的经济损失，因此对这四种疾病的防治具有重要的公共卫生意义。为了有效的控制这四种疾病的流行，结合灭活疫苗的特点，研制了鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征和禽流感（H9亚型）四联灭活疫苗（La Sota株+M41株+HS25株+HZ株），因为灭活疫苗是经理化方法处理而致死的病原体，免疫应激反应小，安全性好，一次免疫持续时间长，有利于制造多价苗或联合苗，并且存储比较方便，能达到减少鸡只免疫应激、降低生产成本，为养禽业的健康发展提供了有力的物质保障。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验用四联灭活疫苗鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征和禽流感（H9亚型）四联灭活疫苗（La Sota株+M41株+HS25株+HZ株）由哈药集团生物疫苗有限公司生产，批号：201601。

1.1.2 试验动物SPF鸡：从山东农科院购买SPF鸡胚，自行孵化，在相对隔离的环境中饲养；商品蛋鸡：从哈尔滨市郊某鸡场购买，隔离饲养；罗曼蛋鸡：购自哈尔滨市某鸡场，隔离饲养。

1.2 主要仪器

1.3 试验方法

1.3.1 单剂量接种安全性试验用28日龄的SPF鸡和134日龄产蛋鸡各15只，每只鸡颈部皮下注射四联灭活疫苗0.5 mL，注射10只，在隔离器内饲养；同时设5只作对照，每只鸡颈部注射0.5 mL的生理盐水。SPF鸡连续观察15 d，然后剖杀部分鸡，重点检查注射部位的变化，包括注射部位组织病变；产蛋鸡连续观察30 d，然后统计1周内平均产蛋率。

1.3.2 单剂量重复接种安全性试验①28日龄SPF鸡单剂量重复接种安全性试验：用15只28日龄的SPF鸡，每只鸡颈部皮下注射0.5 mL疫苗，注射10只，在隔离器内饲养；同时设5只作对照，每只鸡颈部注射0.5 mL的生理盐水。接种2周后，按照相同剂量再重复接种一次，每天观察各组鸡是否出现全身症状。连续观察15 d，然后剖杀部分鸡，重点检查注射部位的变化，包括注射部位组织病变。②134日龄的商品蛋鸡单剂量重复接种安全性试验：用15只134日龄的商品蛋鸡，每只鸡颈部皮下注射0.5 mL疫苗，注射10只；同时设5只作对照，每只鸡颈部注射0.5 mL的生理盐水。接种2周后，按照相同剂量再重复接种一次，每天观察各组鸡是否出现全身症状。连续观察30 d，重点检查注射部位的变化，然后统计1周内的产蛋情况。

1.3.3 一次超剂量接种安全性试验①28日龄SPF鸡一次超剂量接种安全性试验：用15只28日龄的SPF鸡，每只鸡颈部皮下注射1.5 mL（3倍单剂量）疫苗，注射10只，在隔离器内饲养；同时设5只作对照，每只鸡颈部注射0.5mL的生理盐水。连续观察15 d，然后剖杀部分鸡，重点检查注射部位的变化，包括注射部位组织病变。②134日龄的商品蛋鸡单剂量重复接种安全性试验：用15只134日龄的商品蛋鸡，每只鸡颈部皮下注射1.5mL（3倍单剂量）疫苗，注射10只；同时设5只作对照，每只鸡颈部注射0.5mL的生理盐水。每天观察各组鸡是否出现全身症状。连续观察30 d，重点检查注射部位的变化，然后统计1周内的产蛋情况。

2 安全检验结果

2.1 单剂量接种安全性试验

颈部注射后，SPF鸡没有表现出任何临床症状和全身不良反应；观察15 d后剖杀5只鸡，在注射部位存有一定量的疫苗，没有完全吸收，但并没有对组织造成明显的损伤；134日龄产蛋鸡，注射部位无红肿现象，无全身不良反应，注射30 d后，1周产蛋率与对照组比较，没有明显差异。因此，单剂量注射对免疫鸡是安全的。具体结果见表1。

2.2 单剂量重复接种安全性试验

第一次注射2周后，再次以相同剂量重复注射疫苗，注射以后，无论是SPF鸡还是蛋鸡都没有表现出任何临床症状和全身不良反应；观察15 d后剖杀部分鸡，在注射部位存有一定量的疫苗，没有完全吸收，但并没有对组织造成明显的损伤；134日龄产蛋鸡，单剂量重复注射后，注射部位无红肿现象，无全身不良反应，注射30 d后，1周产蛋率与对照组比较，没有明显差异。因此，单剂量重复注射是安全的。结果见表2。

2.3 一次超剂量接种安全性试验结果

一次超剂量注射后（3倍正常使用剂量），在初期（接种后的1～5 d）SPF和蛋雏鸡都表现出轻微的临床症状，与对照鸡相比，饮食量下降、喜卧，精神稍不好，但没有出现死亡；随着时间的推移，鸡的临床症状逐渐消失，精神变好，饮食恢复正常；在观察15 d期间没有出现死亡，15 d后剖杀部分鸡，在注射部位还存有一定量的疫苗，沿着颈部皮肤，有大量的疫苗迁移，但注射部位没有出现出血和水肿症状；134日龄产蛋鸡注射后，无全身不良反应，注射部位无红肿现象，注射30 d后统计产蛋率与对照组比较，没有显著差异。因此，疫苗一次性超剂量接种试验是安全的。结果见表3。

考虑到鸡日龄和品种对灭活疫苗安全性的敏感程度不同，选用了28日龄SPF鸡和罗曼蛋鸡以及134日龄的产蛋鸡。在安全性试验中，设了单剂量注射、重复注射和一次大剂量注射，接种途径为颈部皮下注射。试验中发现单剂量和单剂量重复注射组，在15 d观察期间，没有表现出任何临床不良反应，鸡群正常；对于即将开产的120日龄蛋鸡，观察30 d，然后统计1周产蛋率，与对照组比较，没有明显差异；一次大剂量注射（3倍单剂量），雏鸡（SPF鸡和蛋雏鸡）在15 d观察期间，没有出现死亡，但是在接种后的1～5 d，表现出一定的临床症状，这可能是与接种剂量大有关，在观察后期，症状消失；15 d后剖杀，在注射部位还存有一定量的疫苗，沿着颈部皮肤有大量的疫苗迁移，但注射部位没有出现出血和水肿症状。这可能是由于注射剂量过大，在注射部位形成暂时肿胀，引起局部反应所致，并非疫苗的毒性所致；而134日龄的产蛋鸡，注射后无全身不良反应，注射部位无明显变化，观察30 d后，统计1周内的产蛋率，与对照组比较，无明显差异。■

New Castle Disease,Infectious Bronchitis,Egg Drop Syndrome,Avian Influenza(H9 Subtype)Quadruple Inactivated Vaccines(Lasota Seedlings+M41 Sapling+HS25 Sapling+HZ Sapling)Safety Evaluation

Cui Yanli
(Veterinary medicine feed supervision in heilongjiang province,Harbin Heilongjiang,150069)

The newcastle disease(ND),infectious bronchitis(IB),egg drop syndrome(EDS)and avian influenza are the main infectious diseases to poultry industry,which bring a huge economic losses for our country's farming.The security of quadruple vaccine of these four diseases is particularly important that varieties may be existing in the process of use.Therefore,this experiment was conducted to make a safety evaluation on this vaccine which emphasized on the variation of injection site and pathological changes of tissues with 30 days.It will be safety that the vaccine will be totally absorbed after injection and provide a correct guidance in using it for the farmer.

Quadruple;Inactivated vaccine;Security

表1 单剂量接种安全性试验

表2 单剂量重复接种安全性试验

表3 一次超剂量（3倍单剂量）接种安全性试验

10.3969/j.issn.1008-4754.2017.03.046