仔猪关节炎病原的分离鉴定

郭世栋 穆娟 李乐

摘要：某一养猪场，60日龄的断奶仔猪2000头，其中，12多头60日龄的断奶仔猪，出现精神沉郁，食欲废觉，发烧41～42℃，出现了严重的食欲废觉，个别的60日龄的断奶仔猪出现了典型的症状后肢关节对称性肿胀，关节炎及肿大，个别的断奶仔猪不表现任何的症状出现突然死亡。为了确定引起60日龄的断奶仔猪关节炎及突然死亡的病原菌，对突然死亡及关节炎的60日龄的断奶仔猪进行剖检，无菌采集肝脏、关节渗出液等病料组织进行细菌的分离与鉴定，分离1株病原菌，对从死亡的仔猪体内分离的1株病原菌通过培养特性鉴定、形态学观察、生化特性鉴定、致病性试验等鉴定方法，分离到的1株病原菌被鉴定为致病性链球菌。因而，证实了引起60日龄的断奶仔猪关节炎及突然死亡的病原菌为致病性链球菌，因此，对分离的仔猪致病性链球菌进行药敏试验。结果显示，分离的仔猪致病性链球菌对头孢曲松、氨苄西林、阿莫西林、头孢拉啶、恩诺沙星、青霉素6种药物高度敏感。

关键词：仔猪；链球菌；分离鉴定；

随着我国养猪业的发展，在我国的大部分地区猪的养殖已经形成集约化养殖及规模化养殖。猪的相关的传染性疾病越来越多，越来越复杂。养殖户对猪的相关的传染性疾病也愈来愈重视。一般的猪的相关的传染性疾病主要包括病毒性、细菌性疾病。其中，链球菌病是断奶仔猪急性死亡和关节肿胀的主要病原菌，仔猪感染了链球菌后，死亡率均较高能达到70%以上，仔猪的链球菌病，严重危害着养猪业的发展。因此，断奶仔猪的链球菌病成为临床上常见的细菌性传染性疾病之一，仔猪链球菌病是由链球菌引起不同阶段猪的一种急性、热性、败血性传染病，断奶仔猪的链球菌可以感对不同阶段的猪，断奶仔猪的链球菌感染率和死亡率均较高。尤其对仔猪的致病性最强，危害最严重。断奶仔猪的链球菌发病无明显的季节性，常年均有引发仔猪发病，临床上主要表现为急性败血症，关节肿胀等，表现神经症状，浑身抽搐，麻痹死亡。本文作者通过60日龄发病突然死亡和关节炎斷奶仔猪的临床症状表现、病理剖检变化、实验室综合诊断技术、致病性试验，确定引起60日龄的断奶仔猪关节炎及突然死亡的病原菌为链球菌，并对链球菌进行了药敏试验，分析其耐性。

（1）发病情况。某一养猪场，60日龄的断奶仔猪2000头，其中，12多头60日龄的断奶仔猪，出现精神沉郁，食欲废觉，发烧41～42℃，出现了严重的食欲废觉，个别的60日龄的断奶仔猪出现了典型的症状后肢关节对称性肿胀，个别的断奶仔猪不表现任何的症状出现突然死亡。

（2）仔猪的临床证状。60日龄的断奶仔猪2000头，其中，12多头60日龄的断奶仔猪，出现精神沉郁，食欲废觉，发烧41～42℃，出现了严重的食欲废觉，个别的60日龄的断奶仔猪出现了典型的症状后肢关节对称性肿胀，关节肿大，个别的断奶仔猪不表现任何的症状出现突然死亡

（3）病理剖检变化。剖检变化可见，仔猪的肝脏肿大、出血，形成出血斑，呈蓝紫色；关节炎肿胀，切开后，有炎性渗出物渗出，关节面肿胀。全身的颌下淋巴结、腹股沟管淋巴结、肠系膜淋巴结出血与肿大；病死猪的腹腔内有大量的淡黄色渗出液，气管、喉头剖检可见有不同程度的肿胀、出血；胃底部区及肠道有出血点，肠壁变薄，肠黏膜脱落；

（4）细菌分离培养与形态学观察。无菌采集60日龄断奶死亡的仔猪的肝脏、关节渗出液等病料组织接种于7%绵羊脱纤血液营养培养基上，置 37℃培养箱中培养12-16h后，在7%绵羊脱纤血液营养培养基生长出淡灰色、大小一致透明、圆形小菌落，菌落呈现典型的β溶血现象，呈现典型的β溶血现象的菌落进行革兰氏染色观察，显微镜下可见分离菌株呈单个的或者双排列的阳性球菌。

（5）分离菌株的生化鉴定。挑取7%绵羊脱纤血液营养培养基上单个菌落接种于含5% 血清的TSB 培养基里， 37℃震荡培养12-16h后，调整菌液的浓度为2个麦氏浊度，按照要求加入生化鉴定的试纸条中，置 37℃培养箱中培养24后，根据生化试纸条的变化进行判定细菌的种类。结果显示，分离菌株被鉴定为链球菌。

（6）细菌的的致病性试验。将纯化培养的分离的链球菌的， 置37℃震荡培养12-16h后，调整菌液浓度（108cfu /mL），将20只小白鼠分为2组，每组10只，第一组每只小白鼠肌肉注射剂量为0.5 mL（108cfu /mL），第2组，肌肉注射等量的生理盐水，攻毒12h后开始观察7天，并记录每组小鼠的死亡数和发病情况，结果显示，在攻毒后的48～72h后，第1组小鼠出现死亡，死亡率為90%，至到7d，死亡率100%，第2组小鼠健康的存活，因而，从断奶死亡的仔猪体内分离链球菌对具有很强的致病性。

（7）分离菌株的药敏试验。将纯化培养的分离的链球菌无菌涂布在7%绵羊脱纤血液营养培养基上，贴上药敏纸片，置 37℃培养箱中培养12-16h后测量抑菌直径，药敏试验结果显示，分离的仔猪链球菌菌株对头孢曲松、氨苄西林、阿莫西林、头孢拉啶、恩诺沙星、青霉素6种药物高度敏感。

总之，引起仔猪关节炎和突然死亡的病原菌为致病性链球菌，药敏试验结果显示，致病性链球菌对分离的仔猪链球菌菌株对头孢曲松、氨苄西林、阿莫西林、头孢拉啶、恩诺沙星、青霉素6种药物高度敏感。

参考文献：

[1]邵靓，陈斌，周莉媛，陈弟诗，汤芳，陆承平. 四川地区一株猪链球菌16型菌株的分离与鉴定[J]. 畜牧与兽医，2017，49（05）：109-111.

[2]惠艳华，丁宁，沈莉萍，等.一例猪链球菌2型感染的病原分离鉴定及药敏试验[J].中国动物检疫，2017，34（08）：97-99.