PRRSV阳性血清驯化对后备母猪繁殖性能的影响

张宁 刘德清 洪绍峰 郭旋 梁强 蓝常力 蒋振南 吴志君

摘要：【目的】对比分析猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）阳性血清驯化和疫苗免疫两种方式对猪场后备母猪免疫抗体水平及繁殖性能的影响，为规模养殖场选择适宜免疫方式防控猪繁殖与呼吸综合症（PRRS）提供参考依据。【方法】以血清驯化和疫苗免疫两种方式分别免疫90日龄后备母猪，1个月后经前腔静脉窦采血检测抗体水平，同时测定后备母猪第一胎的受胎率、分娩率、胎产仔数、胎产活仔数、产弱仔率、产死胎率、产畸形及木乃伊率等繁殖性能指标。【结果】血清驯化与疫苗免疫后备母猪的血清抗体阳性率分别为100.00%和99.30%，但疫苗免疫后備母猪的抗体水平离散度相对较低，且较集中。血清驯化与疫苗免疫后备母猪第一胎的受胎率（96.79% vs 97.11%）、分娩率（88.55% vs 88.96%）、胎产仔数（11.26 vs 11.41）、胎产活仔数（10.3 vs 10.5）、产弱仔率（3.61% vs 3.32%）、产死胎率（2.96% vs 2.99%）、产畸形及木乃伊率（4.35% vs 4.13%）相近，二者差异不显著（P>0.05），但均优于对照后备母猪。【结论】在确定养猪场内只流行一种血清型PRRSV时，可采用血清驯化替代疫苗免疫防控PRRS，除了能有效提高后备母猪的繁殖性能外，还具有成本低廉、操作简单的特点。

关键词： 后备母猪；猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）；血清驯化；疫苗免疫；抗体水平；繁殖性能

中图分类号： S858.28 文献标志码：A 文章编号：2095-1191（2017）06-1113-06

Abstract：【Objective】Effects of porcine reproductive and respiratory syndrome virus（PRRSV） positive serum acclimation and vaccine immunization on immune antibody level and reproductive performance of gilts were analyzed， in order to provide reference for large-scale farms to select the proper immunity method to control porcine reproductive and respiratory syndrome（PRRS）. 【Method】Gilts of 90 days were immunized with serum acclimation and vaccine immunization respectively. Blood samples were obtained from vena cava anterior to detect antibody level. Meanwhile， indexes of reproductive performance were measured， including conception rate of the firstborn， delivery rate， litter size， number born alive of litter， weak piglet rate， stillbirth rate， deformity and mummy rate of gilts. 【Result】Serum antibody positive rates of serum domestication group and vaccine immunization group reached 100.00% and 99.30% respectively. Antibody level dispersion of vaccine immunization group was low and its antibody level was concentrated. Conception rate of the firstborn（96.79% vs 97.11%）， delivery rate（88.55% vs 88.96%）， litter size（11.26 vs 11.41）， number born alive of litter（10.3 vs 10.5）， weak piglet rate（3.61% vs 3.32%）， stillbirth rate（2.96% vs 2.99%）， deformity and mummy rate（4.35% vs 4.13%） of gilts in serum domestication group and vaccine immunization group were close. The difference between the two groups was insignificant（P>0.05）. The performances of the two groups were both better than that of control. 【Conclusion】It is suitable way to immune pig with serum acclimation to prevent and control PRRSV when there is only a serotype PPRSV prevalent in pig farm. This vaccine method not only enhances the reproduction performance of gilts， but also costs less and operates easily.

Key words： gilt； porcine reproductive and respiratory syndrome virus（PRRSV）； serum acclimation； vaccine immunization； antibody level； reproductive performance

0 引言

【研究意义】猪繁殖与呼吸综合症（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是一种严重损害猪繁殖与呼吸系统的急性病毒性传染病，由猪繁殖与呼吸综合症病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起，可导致成年母猪流产、死胎、木乃伊胎等繁殖障碍及各年龄段猪群（尤其是仔猪）的呼吸系统疾病（Albina，1997；孟春花等，2015；张华等，2016）。PRRS于1987年在美国北卡罗来纳州首次被发现（Keffaber，1989），之后蔓延至整个北美洲及欧洲。1991年初PRRS在我国台湾首次暴发（代军等，2014），此后我国养猪业一直受PRRS困扰，尤其在2006年我国多省（区、市）猪群暴发以体温高热、皮肤发绀、呼吸困难及高发病率和死亡率为症状的猪高热病（Tian et al.，2007；杨汉春，2007），给养猪业造成极大的经济损失。因此，急需探索出能有效防控PRRS的技术措施。【前人研究进展】目前，市场上尚无治疗PRRS的特效药物，只能采取疫苗免疫及生物安全体系等措施进行防控。常用的PRRS疫苗类型有灭活疫苗和弱毒疫苗，PRRS弱毒疫苗能有效诱导机体产生体液免疫及细胞免疫，其效果优于灭活疫苗。弱毒疫苗免疫可在很大程度上预防同源PRRSV毒株的感染，保护感染猪群不再发病，但对异源毒株的保护率低下（张鹤，2015；张华等，2016）。此外，部分猪场开始采用血清驯化方式防控PRRS。Fano等（2005）研究发现，经血清驯化的后备母猪病情稳定，按计划实施一年后的猪群PRRSV阳性率显著下降，且生产的断奶仔猪均呈PRRSV阴性。杨玉坚和樊福好（2011）将采自发烧保育猪的PRRSV阳性血清肌肉接种后备种猪进行驯化，驯化后的猪群健康指数虽降低，但仍维持在100以上，表明血清驯化发挥了较好的免疫效果。张军等（2012）认为，在我国现有的养猪条件下要实现PRRS净化十分困难，而使用血清驯化控制PRRSV在猪群中稳定感染是当前猪场防控PRRS的最实用方案。曹玉美等（2013）对两个规模商品种猪场进行血清驯化，发现驯化一年后母猪的分娩率和产活胎数明显上升，且猪群中的PRRS抗体水平相对稳定，说明血清驯化对PRRS防控起到一定作用；随后又通过仔猪攻毒试验证实，20个PRRSV拷贝数即可感染仔猪，为确定血清驯化措施中的血清病毒含量提供了参考（曹玉美等，2016）。曾昭芙等（2015）研究表明，血清驯化能在很大程度上提高母猪的生产性能。【本研究切入点】目前，PRRSV已普遍存在我国各养猪区域，因其具有遗传多变性，疫苗毒株在猪体内经反复复制而极易出现基因变异的疫苗样毒株，甚至出现毒力返强，导致疫苗免疫效果不佳。为了规避疫苗免疫的弊端，临床上通常采用血清驯化方式以求穩定猪群病情发展及停止排毒，从而达到防控PRRS的目的。【拟解决的关键问题】对比分析血清驯化和疫苗免疫两种方式对猪场后备母猪免疫抗体水平及繁殖性能的影响，为规模养殖场选择适宜免疫方式防控PRRS提供参考依据。

1 材料与方法

1. 1 试验材料

后备母猪由广西农垦永新畜牧集团金光有限公司提供，体重45～50 kg/头，共7个批次（血清驯化组3批，疫苗免疫组3批，对照组1批），每批次约150头。供试疫苗为勃林格公司生产的Ingelvac■ PRRS MLV疫苗（245-E50）；供试血清为广西农垦永新畜牧集团金光有限公司养猪场保存的PRRSV阳性血清，其测序结果显示为VR-2332-like亚型，且该猪场只流行一种血清型毒株，适合进行血清驯化。驯化血清稀释度1∶120。PRRSV抗体X3检测试剂盒购自IDEXX公司，检测结果以计算样品与阳性对照的比值（S/P）进行判定：当S/P低于0.50，判定为PRRSV抗体阴性；S/P大于或等于0.50，则判定为PRRSV抗体阳性。

1. 2 试验方法

1. 2. 1 血清驯化后备母猪 将含PRRSV的血清按1∶120比例用生理盐水稀释，加入抗生素使其质量浓度达0.01 g/mL，于后备母猪90日龄时经左右两边鼻孔各喷1.0 mL，2 d后重复感染1次，第2次感染1个月后于前腔静脉窦采血。制备血清：用一次性注射器于前腔静脉窦无菌采集血液，然后置于37 ℃温箱中静置30 min以上，待血液完全凝固后3000 r/min离心8 min，取上清液，分装，-80 ℃保存或直接用于血清抗体检测。后备母猪感染PRRSV后3～5 d，密切关注猪群体温及临床表现，对发烧严重、精神状态较差的母猪采集血液进行病原检测，并给予治疗。

1. 2. 2 疫苗免疫后备母猪 按照PRRS MLV疫苗说明进行免疫，于后备母猪90日龄时肌注1头份PRRS MLV疫苗，110日龄时进行加强免疫（二免）。二免后1个月于前腔静脉窦采血，析出血清用于血清抗体检测。

1. 3 繁殖性能指标测定

繁殖性能指标包括后备母猪第一胎的受胎率、分娩率、胎产仔数、胎产活仔数、产弱仔率、产死胎率、产畸形及木乃伊率等生产成绩。

1. 4 统计分析

试验数据采用Excel 2007进行统计处理，再以SPSS 17.0进行差异显著性分析。

2 结果与分析

2. 1 猪群驯化结果

经血清驯化或疫苗免疫后，筛选健康度及体况良好的后备母猪进行采血，从血清抗体检测平均合格率来看，血清驯化后备母猪的合格率为98.07%，疫苗免疫后备母猪的合格率为97.62%（表1），两种处理方法的血清抗体检测合格率差异不显著（P<0.05，下同）。

2. 2 后备母猪血清抗体检测结果

由表2可看出，血清驯化后备母猪抗体阳性率为100.00%，疫苗免疫后备母猪为99.30%，二者差异不显著。在实际生产中以S/P>0.50为合格，得知血清驯化和疫苗免疫后备母猪的平均合格率分别为98.0%和97.6%。血清驯化后备母猪的平均S/P均在2.00以上，而疫苗免疫后备母猪的在1.30～1.50，且血清驯化后备母猪的S/P均极显著高于疫苗免疫后备母猪（P<0.01）。血清驯化后备母猪的抗体水平离散度为32.6%～

34.7%，平均为33.9%；疫苗免疫后备母猪的抗体水平离散度为26.3%～32.7%，平均为30.5%，即疫苗免疫组的S/P离散度相对较低，且较集中。

2. 3 后备母猪受胎率

由表4可看出，血清驯化后备母猪的平均受胎率为96.79%，疫苗免疫后备母猪为97.11%，二者差异不显著，但均高于对照后备母猪（94.67%），说明无论采取血清驯化还是疫苗免疫均能有效提高后备母猪的受胎率。

2. 4 后备母猪的分娩率

由表5可看出，血清驯化后备母猪的平均分娩率为88.55%，疫苗免疫后备母猪为88.96%，二者差异不显著，但均高于对照后备母猪（80.28%），说明采取血清驯化和疫苗免疫均可有效提高后备母猪分娩率。

2. 5 后备母猪平均胎产仔数

由表6可看出，血清驯化后备母猪的平均胎产仔数11.26头，疫苗免疫后备母猪为11.41头，二者差异不显著，但明显高于对照后备母猪（10.40头），说明采取血清驯化和疫苗免疫均可有效提高后备母猪的胎产仔数。

2. 6 后备母猪胎产活仔数

由表7可看出，血清驯化后备母猪的平均胎产活仔数为10.33头，疫苗免疫后备母猪为10.47头，二者差异不显著，但明显高于对照后备母猪（9.20头），说明采取血清驯化和疫苗免疫均可有效提高后备母猪的胎产活仔数。

2. 7 后备母猪产弱仔率

由表8可看出，血清驯化后备母猪的平均产弱仔率为3.61%，疫苗免疫后备母猪为3.32%，二者明显低于对照后备母猪（6.21%），说明采取血清驯化和疫苗免疫均可有效降低后备母猪的產弱仔率。

2. 8 后备母猪产死胎率

由表9可看出，血清驯化后备母猪的平均产死胎率为2.96%，疫苗免疫后备母猪为2.99%，二者差异不显著，但明显低于对照后备母猪（4.89%），说明采取血清驯化和疫苗免疫均可有效降低后备母猪的产死胎率。

2. 9 后备母猪产畸形及木乃伊率

由表10可看出，血清驯化后备母猪的平均产畸形及木乃伊率为4.35%，疫苗免疫后备母猪为4.13%，二者明显低于对照后备母猪（7.00%），说明采取血清驯化和疫苗免疫均可有效降低后备母猪的产畸形及木乃伊率。

3 讨论

PRRS是影响母猪健康的主要疫病之一，PRRSV可通过血液循环感染胎猪，从而导致妊娠后期母猪发生流产、产死胎或产木乃伊胎等（Albina，1997；孟春花等，2015；张华等，2016）。本研究结果表明，以血清驯化和疫苗免疫处理后备母猪后，其血清抗体阳性率分别为100.00%和99.30%；血清驯化后备母猪的S/P普遍较疫苗免疫后备母猪的高，但疫苗免疫后备母猪的S/P离散度相对较低，且较集中。这与周庆华和余兴龙（2010）的研究结果基本一致，即血清驯化能缩短种猪群PRRSV的持续感染时间，使种猪群在较短时间内获得较高的抗体水平。本研究还对后备母猪的第一胎生产成绩进行观察比较，结果表明，后备母猪经血清驯化和疫苗免疫均可提高其受胎率、分娩率、胎产活仔数，有效降低产弱仔率、产死胎率、产畸形及木乃伊率，二者对后备母猪繁殖性能的影响差异不明显，与曹玉美等（2013）的研究结果一致，血清驯化后种猪群的分娩率、窝产活仔数等繁殖性能指标稳定在较高水平，且所产仔猪在产房、保育阶段处于相对稳定的状态。

疫苗免疫的安全性较高，目前国内外有多种血清型疫苗可供选择，也就要求养殖场在选择PRRSV疫苗进行免疫时，需选择与本养殖场流行毒株同源性高的疫苗进行免疫，且免疫后要定期监测猪群抗体水平，不宜频繁变换使用不同血清型毒株的疫苗（周绪斌等，2016）。与疫苗免疫相比，血清驯化能节约疫苗费用，操作简单，但驯化血清的采集和保存必须经严格检测，确定无其他病原菌，且要科学控制血清中的病毒含量，能引起良好的免疫应答，又要防止病毒量过大带来感染发病风险。尤其选择PRRSV阳性血清进行驯化时，首先要确定养猪场内只流行一种血清型毒株，若存在多种血清型毒株，不但驯化无效，反而引起混合感染，造成更严重的经济损失；其次要把握好血清驯化的最佳时机，并确定猪场内无其他病原感染；最后要观察留意血清驯化猪群的日常表现，定期监测猪群抗体水平，特别是PRRSV抗体水平下降或突然上升时要及时采取措施，防止PRRS暴发。

4 结论

在确定养猪场内只流行一种血清型PRRSV时，可采用血清驯化替代疫苗免疫防控PRRS，除了能有效提高后备母猪的繁殖性能外，还具有成本低廉、操作简单的特点。

参考文献：

曹玉美，伍少钦，邓福昌，于俊勇，盘金华. 2013. 规模猪场种猪群PRRS血清驯化效果探索[J]. 中国猪业，（2）：105- 107. [Cao Y M，Wu S Q，Deng F C，Yu J Y，Pan J H. 2013. Study of the effects of herd PRRS serum domestication in intensive pig farm[J]. China Swine Industry，（2）：105-107.]

曹玉美，伍少钦，孙龙，颜辉孟，吴志金，于俊勇，陆江，梁桓英. 2016. 蓝耳病阴性猪PRRSV攻毒试验结果及在血清驯化中的应用[J]. 猪业科学，33（10）：72-73. [Cao Y M，Wu S Q，Sun L，Yan H M，Wu Z J，Yu J Y，Lu J，Liang H Y. 2016. Results of PRRS negative pigs PRRSV poison attack test and its application in serum domestication[J]. Swine Industry Science，33（10）：72-73.]

代军，雷蕾，任志华. 2014. 猪繁殖与呼吸综合征防控研究进展[J]. 动物医学进展，35（4）：97-101. [Dai J，Lei L，Ren Z H. 2014. Progress on prevention and control of porcine reproductive and respiratory syndrome[J]. Progress in Veterinary Medicine，35（4）：97-101.]

孟春花，王春玲，李静心，李隐侠，朱前明，曹少先. 2015. 猪APOBEC3F基因真核表达载体的构建及其在MARC145细胞中的表达定位[J]. 江苏农业学报，31（6）：1344-1349. [Meng C H，Wang C L，Li J X，Li Y X，Zhu Q M，Cao S X. 2015. Construction of eukaryotic vector for porcine APOBEC3F gene and its expression and localization in MARC145 cells[J]. Jiangsu Journal of Agricultural Sciences，31（6）：1344-1349.]

杨汉春. 2007. 猪高热综合征的发生与流行概况[J]. 猪业科学，（1）：78-80. [Yang H C. 2007. Prevalence status of swine high fever syndrome（atypical PRRS）[J]. Swine Industry Science，（1）：78-80.]

杨玉坚，樊福好. 2011. 后备种猪自场血清驯化效果试验[J]. 今日养猪，（1）：24-25. [Yang Y J，Fan F H. 2011. Study of gilt serum domestication serum testing from field[J]. Pigs Today，（1）：24-25.]

曾昭芙，邝贤英，黄助良，傅鹏，刘粮，严景生. 2015. PRRS“驯化”对母猪生产性能的影响[J]. 江西畜牧兽医杂志，（6）：12-14. [Zeng Z F，Kuang X Y，Huang Z L，Fu P，Liu L，Yan J S. 2015. The effects of PRRS domestication on performance of sow production[J]. Jiangxi Animal Husbandry and Veterinary Journal，（6）：12-14.]

張鹤. 2015. 猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗免疫剂量和免疫时间对猪免疫应答的影响[D]. 保定：河北农业大学. [Zhang H. 2015. Effects of innoculation dose and time of porcine reproductive and respiration syndrome attenuated vaccine upon the immune response in pig[D]. Baoding：Hebei Agricultural University.]

张华，李世静，李涛，王慧，李照伟. 2016. 贵州省猪繁殖与呼吸综合征的血清学调查[J]. 贵州农业科学，44（6）：112-114. [Zhang H，Li S J，Li T，Wang H，Li Z W. 2016. Seroepidemiological survey on porcine reproductive and respiration syndrome in Guizhou Province[J]. Guizhou Agricultural Sciences，44（6）：112-114.]

张军，林杨洲，余苏英，章红兵.2012. 病毒驯化是当前猪场蓝耳病防控的实用方案[J]. 猪业科学，（2）：89-91. [Zhang J，Lin Y Z，Yu S Y，Zhang H B. 2012. PRRS serum domestication is a practical solutions to PRRS prevention and control at present[J]. Swine Industry Science，（2）：89-91.]

周庆华，余兴龙. 2010. 规模猪场种猪群PRRS血清驯化的血清学抗体监测与分析[J]. 湖南畜牧兽医，（5）：15-17. [Zhou Q H，Yu X L. 2010. Serological antibodies monitoring and analysis of herd PRRS serum domestication in scale pig breeding[J]. Hunan Animal Science & Veterinary Me-

dicine，（5）：15-17.]

周绪斌，李黎，鲁立柱，柏庆，汪萍，张海雷，黎作华，万春燕. 2016. 不同猪繁殖与呼吸综合征减毒活疫苗在猪体内的动态学及临床免疫效果比较[J]. 中国兽医学报，36（12）：2019-2023. [Zhou X B，Li L，Lu L Z，Bai Q，Wang P，Zhang H L，Li Z H，Wan C Y. 2016. Comparison of dynamics and efficacy of three porcine reproductive and respiratory syndrome virus attenuated vaccine[J]. Chinese Journal of Veterinary Science，36（12）：2019-2023.]

Albina E. 1997. Epidemiology of porcine reproductive and respiratory syndrome（PRRS）：An overview[J]. Veterinary Mi-

crobiology，55（1-4）：309-316.

Fano E，Olea L，Pijoan C. 2005. Eradication of porcine reproductive and respiratory syndrome virus by serum inoculation of naive gilts[J]. Canadian Journal of Veterinary Research，69（1）：71-74.

Keffaber K K. 1989. Reproductive failure of unknown etiology[J]. Am Assoc Swine Pract Newsletter，1：1-10.

Tian K，Yu X，Zhao T，Feng Y，Cao Z，Wang C，Hu Y，Chen X，Hu D，Tian X，Liu D，Zhang S，Deng X，Ding Y，Yang L，Zhang Y，Xiao H，Qiao M，Wang B，Hou L，Wang X，Yang X，Kang L，Sun M，Jin P，Wang S，Kitamura Y，Yan J，Gao G F. 2007. Emergence of fatal PRRSV variants：Unparalleled outbreaks of atypical PRRS in China and molecular dissection of the unique hallmark[J]. PLoS One，2（6）：e526.

（责任编辑 兰宗宝）