丙酮酸钠对鸡精液稀释保存效果的影响

2017-05-30金美林蔡元

畜牧兽医科学 2017年7期

金美林蔡元

摘要：研究不同浓度的丙酮酸钠对鸡精液稀释保存效果的影响，本试验在前期研究所获得基础液的基础上，分别添加不等量的丙酮酸钠，以改善丙酮酸钠对鸡精液稀释的效果。结果表明：各组精液的存活指数、有效存活时间均与对照组无显著性的差异（P>0.05），添加2.5mmol/l的基础液对精液的稀释保存与对照组相比有提高的趋势，而添加其他浓度的稀释液与对照组相比有降低的趋势。

关键词：丙酮酸钠；鸡；精液稀释

中图分类号：S858.31 文献标识码：B 文章编号：2096-3637（2017）07-0002-01

丙酮酸钠是丙酮酸的钠盐，作为内源的能量代谢底物，是三大营养物质的代谢枢纽，对维持组织细胞有氧代谢，保障机体能量代谢具有重要作用和较强的抗氧化作用。在许多细胞组织培养中，丙酮酸盐得到广泛应用，并取得了较好效果。国内外许多学者将丙酮酸盐运用于人和动物精液的稀释低温保存或冷冻保存，取得的效果很好，但在家禽上还很少有人研究。

1 材料

1.1 10只海蓝褐公鸡在西北民族大学生命科学与工程学院6楼饲养，采精后30min内进行精液稀释。

1.2 仪器有电子天平，烘箱，生物显微镜，恒温水浴锅，4℃冰箱，温度计，载玻片，盖玻片，容量瓶，移液枪，采精杯等。

1.3试剂果糖、谷氨酸钠、柠檬酸、氯化钾、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、Tris、青霉素、链霉素、丙酮酸钠。

2 方法

2.1 稀释液制备

果糖1g/100ml，谷氨酸钠0.2g/100ml，氯化钾0.1g/100ml，柠檬酸钠0.2g/100ml，磷酸二氢0.25g/100ml，磷酸氢二钾0.7g/100ml，柠檬0.04g/100ml，和Tris0.04g/100ml所调试的基础液上分别加入0.5mmol/l，1.0mmol/l，1.5mmol/l，2.0mmol/l，2.5mmol/l的丙酮酸钠，准确称取所需要的试剂，（不添加丙酮酸钠的为对照组）溶解后用100ml的容量瓶定容，分别装入250ml的瓶中，100℃高温灭菌30min后，加入10万单位的青霉素和链霉素，蜡封冷却至室温后，放入4℃冰箱中保存备用。

2.2 精液的稀释与保存

供试精液的公鸡，采用背腹联合按摩法采集精液，采集后进行品质评定。将无粪尿污染的精液混合，活率大于 0.7时供稀释保存之用。将采集的混合鲜精液与各稀释液按精液∶稀释液 1∶4 进行等温稀释，再分装于洁净的青霉素空瓶中，加盖后用6层纱布包裹放入4 ℃冰箱中保存。

2.3 精液的品质检查

隔12h观察一次精子的活率并记录，到全部精子死亡，最后计算精子有效存活时间和生存指数。在试验操作过程中始终保持无菌操作和精液保存温度的恒定，试验重复操作5次。

3 数据处理

试验共分6个组，对照组的稀释液为前期研究所获得较好的基础液，试验组1～5的稀释液在对照组的基础上添加不同濃度的丙酮酸钠。对所得的各组数据采用SPSS17.0统计软件进行比较，检验差异的显著性，显著性水平为P<0.05。

4 结果与分析

4.1 不同浓度的丙酮酸钠对鸡精液存活指数的影响

从表1中可以看出，试验组5与对照组相比存活指数有提高了6.77%，而其他试验组与对照组相比存活指数均有所减少了。但试验组与对照组相比差异均不显（P>0.05）。

4.2 不同浓度的丙酮酸钠对鸡精液有效存活时间的影响

从表2中可以看出，对照组与试验组之间差异均不显著（P>0.05），试验组5与对照组相比有效存活时间有提高，而其他试验组与对照组相比有效存活时间均降低。说明在本试验条件下，添加不同浓度的丙酮酸钠对鸡精液稀释保存的有效存活时间没有显著的影响（P>0.05）。

5 讨论