雄激素受体和NF-κB在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

陈双龙 付 莉 杜好信

(厦门大学附属第一医院乳腺外科，福建 厦门 361000)

雄激素受体和NF-κB在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

陈双龙 付 莉1杜好信

(厦门大学附属第一医院乳腺外科，福建 厦门 361000)

目的 探讨雄激素受体(AR)和核因子(NF)-κB在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法 200例乳腺癌患者中三阴型乳腺癌98例及非三阴型乳腺癌102例。免疫组化法检测两组AR、NF-κB的表达情况并收集患者临床病理资料，分析两指标与临床特征的关系。结果 三阴乳腺癌组AR表达阳性率低于非三阴乳腺癌组，NF-κB表达阳性率高于例非三阴乳腺癌组(P<0.05)；三阴乳腺癌患者AR表达阳性与乳腺癌肿瘤坏死和组织浸润呈负相关(P<0.05)，非三阴乳腺癌患者AR表达阳性与乳腺癌瘤体大小、肿瘤坏死和组织浸润呈负相关(P<0.05)；三阴乳腺癌组织NF-κB表达阳性与乳腺癌肿瘤大小、肿瘤坏死和组织浸润呈负相关但与组织分级呈正相关(P<0.05)，而在非三阴乳腺癌中，NF-κB表达阳性仅与乳腺癌肿瘤大小、肿瘤坏死和组织浸润呈负相关(P<0.05)。结论 乳腺癌组织中AR、NF-κB异常表达，可能参与乳腺癌的发生、发展及转移，可能成为理想的乳腺癌预测标志物。

雄激素受体；核因子κB；乳腺癌

参与机体防御反应、组织损伤和应激、细胞分化和凋亡的转录核因子(NF)-κB在乳腺癌的抗凋亡机制中发挥重要作用〔1，2〕。NF-κB被激活后进入细胞核启动靶基因转录，通过上调与细胞增殖相关的基因表达或抑制凋亡通路而发挥抗凋亡作用〔3〕。文献报道，雄激素受体(AR)在乳腺肿瘤中通常过表达，与相应配体雄激素结合后而发挥肿瘤抑制作用。本研究旨在探讨AR和NF-κB在乳腺癌中的作用机制。

1 对象和方法

1.1 对象 选取2010年1月至2012年2月厦门大学附属第一医院就诊的200例术前未经过放、化疗治疗的乳腺癌患者手术标本，通过B超、钼靶X线检查及细胞学穿刺检查以排除类似乳腺癌的囊肿、纤维腺瘤等病变。乳腺癌患者均为女性，年龄35～75岁，平均(50.53±1.64)岁。通过对肿瘤组织免疫组化检查为雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和原癌基因Her-2均为阴性而将患者分为三阴型乳腺癌组(98例)及非三阴型乳腺癌(102例)。试剂：AR单克隆抗体(兔抗人)、NF-κB单克隆抗体(兔抗人)、β-actin单克隆抗体(兔抗人)、SP Human HRP Kit(DAB)试剂盒等均购于Santa Cruz公司。

1.2 方法

1.2.1 免疫组化 收集乳腺癌患者的手术切除标本，一部分经多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，5 μm切片，石蜡切片经二甲苯脱蜡、乙醇梯度水化，再去除切片组织内的内源性过氧化酶，最后在微波炉内加热柠檬酸缓冲液进行热抗原修复。用已知阳性切片作阳性对照，用正常小鼠非免疫血清和磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作阴性对照，DAB显色，苏木精对比染色，100倍光镜下观察〔4〕。AR、NF-κB在乳腺癌组织的表达判断按下述方法：AR、NF-κB存在于细胞核和细胞质中，阳性表达时呈浅棕色或深棕色。根据组织的染色强度对阳性表达进行分类：组织染色强度弱(+)，仅个别细胞经染色呈淡黄色至棕黄色；染色强度强()，细胞经染色呈棕黄至棕褐色；中等染色强度()，组织染色强度介于弱阳性与强阳性之间。染色强度×阳性细胞的比例(%)为每例乳腺癌组织表达的综合计分，合计分≥1为表达阳性，计分<1则为表达阴性。

1.2.2 资料收集 收集病例的临床资料包括：肿瘤大小、淋巴结转移、组织分级、肿瘤坏死和肿瘤浸润等。

1.3 统计学方法 采用SPSS19.0软件进行χ2检验。

2 结 果

2.1 AR和NF-κB在乳腺癌中的表达水平 三阴乳腺癌组AR阳性率〔20.41%(20/98)〕低于非三阴乳腺癌组〔73.53%(75/102)〕(P<0.05)；NF-κB阳性率〔77.55%(76/98)〕高于非三阴乳腺癌组〔47.06%(48/102)〕(P<0.05)。见图1。

图1 免疫组化法检测乳腺癌组织切片组织AR、NF-κB表达(DAB，×100)

2.2 AR和NF-κB表达水平与临床病理特征的关系 由表1可知，乳腺癌肿瘤坏死和组织浸润是三阴乳腺癌患者AR表达阳性的影响因素(P<0.05)；非三阴乳腺癌患者AR表达阳性与乳腺癌瘤体大小、肿瘤坏死和组织浸润呈负相关(P<0.05)。在三阴乳腺癌组NF-κB表达阳性与乳腺癌肿瘤大小、肿瘤坏死和组织浸润呈负相关且与乳腺癌组织分级呈正相关(P<0.05)；而非三阴乳腺癌组NF-κB表达阳性与乳腺癌肿瘤大小、肿瘤坏死和组织浸润呈负相关(P<0.05)。

表1 AR、NF-κB阳性表达与乳腺癌临床病理特征的关系〔n(%)〕

3 讨 论

乳腺癌是一类异质性肿瘤，常根据其临床病理特征和分子特征分为不同类型〔5〕。由于免疫组化有操作简单的优点，应用检测ER、PR、CK5/6、C-erbB-2、EGFR、Ki-67为乳腺癌分型被大家推崇〔6〕。近年来随着基因表达谱分析应用于临床后，乳腺癌的分子分型逐渐被人认识，研究者根据乳腺癌的基因微阵列分析和免疫表型特征将其分为5个亚型：luminal A、luminal B、HER-2过表达型、basal-like以及normal-like乳腺癌，将其中basal-like与normal-like乳腺癌归属于三阴性乳腺癌，其占全部乳腺癌的10%～17%。目前关于关于其预后的判断指标，已经发现了许多有临床上有应用价值的标志物，例如AR、NF-κB、聚腺苷酸二磷酸核糖合成酶(PARP)1、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、表皮生长因子受体(EGFR)等〔7〕。AR被认为是影响三阴性乳腺癌预后的重要因素〔8〕。有研究还发现，NF-κB在雌激素受体阴性的乳腺癌中表达率高于雌激素受体阳性的乳腺癌〔9〕。研究表明，AR能够直接影响乳腺癌细胞的增殖，其表达是影响乳腺癌预后的重要因素，AR在其阳性表达的原位癌临近浸润性癌中的表达量高于其在原位癌中的表达量，这表明AR与肿瘤浸润密切相关〔10〕，此外，还有研究表明乳腺癌中AR表达水平与淋巴结转移呈正相关〔11，12〕。已证实NF-κB具有转录调节作用，参与应激反应和免疫细胞的活化、增殖、分化、凋亡及肿瘤形成等相关的基因转录调控〔13〕，因此，NF-κB的表达与人体肿瘤发生、浸润转移、预后有着密切关系〔14，15〕。本研究结果表明，AR、NF-κB在乳腺癌组织中异常表达，可能在乳腺癌的发生、发展及转移中具有重要作用，且与某些特定的乳腺癌分子亚型可能有关系。

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〔2016-07-15修回〕

(编辑 郭 菁/滕欣航)

福建省卫生厅青年科研课题(No.2012-2-77)

杜好信(1962-)，男，博士，主任医师，主要从事乳腺外科研究。

陈双龙(1979-)，男，副主任医师，主要从事乳腺外科研究。

R73

A

1005-9202(2017)09-2185-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.09.046

1 厦门大学附属第一医院病理科