紫丁香蘑液体培养基营养成分初探

张梅琳 徐济责

（吉林农业科技学院，吉林132101）

紫丁香蘑（Lepista nuda）别名裸口蘑、紫晶蘑。隶属担子菌亚门（Basidiomycotina）、层菌纲（Hymenomycetes）、伞菌目（Agaricales）、白蘑科（Tricholomtaceae）、香蘑属Lepista。有记载显示紫丁香蘑与松、榛、山杨等形成外生菌根，是森林生态系统的必要组成部分[1]。紫丁香蘑主要分布于我国黑龙江、福建、青海、新疆、西藏、山西等地区，秋季在林中地上群生，有时近丛生或单生。紫丁香蘑不仅味道鲜美，还具有很高的药用价值，用此菌抗癌试验效果表明：对小白鼠肉瘤S180的抑制为90%，对艾氏癌的抑制率为100%[2]。该蘑菇含有维生素B1，能调节机体糖代谢。李凡[3]等对四种香蘑属真菌子实体抗氧化活性比较分析，其中发现了紫丁香蘑子实体提取物对超氧阴离子亦有一定的清除作用。罗正明[4]等对几种野生食用菌蛋白质的营养价值评价中提到紫丁香蘑子实体蛋白质含量较高，且氨基酸种类齐全，必需氨基酸占氨基酸总量的百分比为38.82%。

关于紫丁香蘑液体发酵培养技术的研究较少。试验以菌丝干重为指标通过单因素试验，筛选紫丁香蘑液体发酵的最适碳源，最适氮源，最适无机盐。现将试验结果初报如下。

1材料和方法

1.1供试材料菌种来源：供试紫丁香蘑菌种为吉林农业科技学院保藏，菌种编号：2016010；主要仪器和设备：电子天平，高压蒸汽灭菌锅，电热恒温鼓风干燥箱，摇床。培养基：马铃薯葡萄糖液体培养基（PDA）为马铃薯 200 g，葡萄糖20 g，水1000 mL，pH自然。120℃灭菌30 min。种子培养基为马铃薯 200 g，蔗糖 20，蛋白胨 4 g，加水 1000 mL，pH自然。

1.2试验方法

1.2.1 碳源试验 分别以蔗糖、可溶性淀粉、乳糖、麦芽糖、葡萄糖五种碳源，代替马铃薯葡萄糖培养基中的葡萄糖（试验为了排除对碳源的影响，故不加入马铃薯）。在250 mL的锥形瓶中加入100 mL培养基，冷却，按5%的量接种。25℃、150 r/min的恒温摇床培养。每组五个重复，培养10 d后测定不同碳源培养基中菌丝体的生物量，并测量菌丝球的直径：用药勺随机的将菌丝球从锥形瓶中捞出，放入盛有蒸馏水的干净平板中，菌丝球处于自然状态，用游标卡尺测量菌丝球的直径。测量完后将菌丝球放入瓶中，然后使用定性滤纸过滤培养液，分离菌丝体和发酵液。菌丝体经蒸馏水冲洗数次，将沉淀的菌丝体于电热恒温鼓风干燥箱（50℃）内烘干至恒重，电子天平称重。数据采用Spss19.0进行差异显著性分析。

1.2.2 氮源试验 分别以蛋白胨、牛肉膏、尿素、硝酸铵、酵母膏为供试氮源，以马铃薯葡萄糖液体培养基为准。以不加氮源为对照。培养基配制、接种、培养、数据观测、记录以及数据的分析方法同碳源试验。

1.2.3 无机盐试验 不同无机盐试验：分别以硫酸铜、硫酸铁、硫酸镁、硫酸铵、硫酸锌为供试无机盐，以马铃薯葡萄糖液体培养基为标准，以不加无机盐为对照。培养基配制、接种、培养、数据观测、记录以及数据的分析方法同碳源试验。

2 结果与分析

2.1碳源对紫丁香蘑液体培养菌丝体生长的影响碳源对菌丝体生长的影响如表1。由表1显示蔗糖为最优，日均生物增长量达到0.0115 g。其次葡萄糖、果糖、麦芽糖为碳源菌丝体生物量比较接近，在以可溶性淀粉为碳源的液体培养基中，菌丝体不生长。

表1 不同碳源对紫丁香蘑液体培养菌丝生长的影响

2.2氮源对紫丁香蘑液体培养菌丝体生长影响氮源对菌丝体生长影响见表2。试验菌株对氮源选择性广泛，但菌丝的生长速度存在较大差异，其中以蛋白胨做氮源时菌丝长速最快，长势最好，日均菌丝生物量达到0.0083 g，明显优于其它氮源。牛肉膏次之，之后依次为酵母膏、硝酸铵。菌丝体在加尿素培养基中，不生长。

表2 不同氮源对紫丁香蘑液体培养菌丝生长的影响

2.3无机盐对紫丁香蘑液体培养菌丝体生长影响无机盐对紫丁香蘑菌丝生长影响见表3。由表3可知硫酸铵做无机盐时菌丝生长速度快，硫酸镁次之，在加入硫酸铜，硫酸锌，硫酸铁液体培养基中紫丁香蘑菌丝均不生长。

表3 不同无机盐对菌丝生长结果影响

3 小结与讨论

对紫丁香蘑菌丝体液体发酵培养基营养条件初步筛选结果表明，最适碳源为蔗糖，最适无机盐为硫酸镁，最适氮源为蛋白胨，这一结果与赵婷[5]紫丁香蘑的菌丝体培养特性及人工驯化研究中的最适碳源最适氮源研究结论相符。当培养基只加入相应碳源，排除其他有效碳源干扰的情况下，可以更准确的得到最适碳源。分析几种氮源，蛋白胨和牛肉膏菌丝生长量相对较多，以尿素为氮源培养基中菌丝不生长，尿素在高温条件下可以发生水解，且随温度升高，水解更加剧烈。因此在培养基灭菌的过程中使尿素水解，液体培养基呈弱碱性，而大多数真菌适于偏酸性，因此加入尿素不利于紫丁香蘑菌丝生长。

试验仅对紫丁香蘑的营养要求做了初步筛选，进一步将对液体发酵液的pH、温度、光照条件做进一步研究。试验为紫丁香蘑的液体菌种培养和菌丝的发酵工艺提供参考。