鹰嘴豆对小鼠的抗氧化作用研究

赵雪洁，梁楚燕，李 杰，严群超，陈有军

(1.广州中医药大学，广东广州 510006；2.昌吉州丝路弘毅农业科技有限公司，新疆昌吉 831109；3.暨南大学医学院，广东广州 510632；4.广州宏韵医药科技股份有限公司，广东广州 510663)



鹰嘴豆对小鼠的抗氧化作用研究

赵雪洁1，梁楚燕1，李 杰2，严群超3，陈有军4*

(1.广州中医药大学，广东广州 510006；2.昌吉州丝路弘毅农业科技有限公司，新疆昌吉 831109；3.暨南大学医学院，广东广州 510632；4.广州宏韵医药科技股份有限公司，广东广州 510663)

通过检测丙二醛(MDA)、蛋白质羰基、超氧化物歧化酶(SOD)、还原性谷胱甘肽(GSH)等指标含量，探究鹰嘴豆对 D- 半乳糖所致衰老模型小鼠的抗氧化作用。结果显示，鹰嘴豆中剂量组小鼠体重增长速度较快，其余各组差异不大；模型组小鼠丙二醛、蛋白质羰基含量与空白对照组相比差异显著(P<0.05)，SOD活力和GSH含量显著降低(P<0.05)；给药组小鼠MDA含量下降明显，与模型组相比差异极显著(P<0.01)，SOD活力升高，其中鹰嘴豆高、中剂量组差异显著(P<0.05)，GSH含量虽有升高的趋势，但无显著差异(P>0.05)。提示鹰嘴豆对 D-半乳糖所致衰老小鼠有一定的抗氧化作用。

鹰嘴豆；抗氧化；衰老模型

鹰嘴豆(chickpeas)属于豆科鹰嘴豆属(CicerarietinumL.)，一年生或多年生草本植物，因形如鹰头，在种脐附近有咏状突起而得名，别名桃豆、鸡豌豆，是世界上栽培面积较广的食用豆类品种之一，目前在豆科作物中居第2位。鹰嘴豆富含蛋白质、脂肪、粗纤维、维生素及钙、镁、铁等成分[1]，其中蛋白质含量达22.50%，高于燕麦以及核桃，人体必需氨基酸达7.91%[2]。能够满足人体每日足够的蛋白质和必需氨基酸需求。鹰嘴豆富含人体所需要的18种氨基酸及蛋白质、膳食纤维、钙、钾、锌等多种微量元素和维生素等营养物质，被誉为“营养之花，豆中之王”，因此，鹰嘴豆及制品已成为一种新型粮谷营养健康食品[3]。鹰嘴豆具有降血脂、降血糖、抗氧化及抗肿瘤等药理作用[4-11]。但是否具有抗氧化作用目前尚不清楚，本试验拟探究鹰嘴豆对D-半乳糖所致衰老小鼠体内过氧化产物的水平是否具有调节作用，研究鹰嘴豆是否具有抗氧化的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品 鹰嘴豆粉末，批次：20150624，由广州宏韵医药科技有限公司提供。

1.1.2 仪器和试剂 移液器，BS110S型分析天平，T1000电子天平，CT14RD型高速冷冻离心机，1510型Thermo全波长酶标仪，4 D-(+)-Galactose；注射用生理盐水，丙二醛，超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒，蛋白羰基含量测试盒，微量还原型谷胱甘肽(GSH)测试盒。

1.1.3 实验动物 雌性昆明小鼠，23 g～26 g，购自广州中医药大学实验动物中心(许可证号：SCXK(粤) 2013-0020)。

1.2 方法

1.2.1 实验动物饲养管理 动物饲养在广州中医药大学实验动物中心，饲养温度与湿度：20 ℃～25 ℃，40%～70%，采用12 h∶12 h昼夜间断照明，自由进食饮水，饮用水为实验动物中心制备的蒸馏水。小鼠维持饲料为广东省医学实验动物中心 SCXK(粤)2013-0002，营养成分含量为粗蛋白18%、粗脂肪4%、粗纤维5%、钙1.0%～1.8% 、磷 0.6%～1.2%、能量比为粗蛋白21%、粗脂肪11%、碳水化合物68%、总能量3.5 kcal/g。

1.2.2 动物分组及处理 1周后，将小鼠按照体重随机分为空白组、衰老模型组、鹰嘴豆高(0.8 g/kg)、中(0.4 g/kg)、低剂量组(0.2 g/kg)，每组各14只。对模型组和鹰嘴豆各剂量组腹腔注射D-半乳糖150 mg/kg制备衰老模型；空白对照组皮下注射等体积的生理盐水；连续8周。造模的同时对试验组灌胃给以不同剂量鹰嘴豆，空白组给予等容量的蒸馏水。试验结束后，取血清按试剂盒说明检测丙二醛、蛋白质羰基、超氧化物歧化酶、还原性谷胱甘肽等指标含量。

2 结果

2.1 试验期间各组小鼠体重的变化

给药8周后，鹰嘴豆中剂量组小鼠增长速度较快，其余各组差异不大(图1)。

2.2 SOD、蛋白质羰基、SOD、GSH检测结果

给药8周后，取血清检测丙二醛、蛋白质羰基、超氧化物歧化酶、还原性谷胱甘肽等指标含量。与空白组比较，模型组小鼠血清MDA、蛋白质羰基含量明显升高(P<0.05)，SOD活力、GSH含量降低(P<0.05)；与模型组相比，给药组小鼠MDA含量下降明显，各剂量组均具有统计学差异(P<0.01)，SOD活力升高，其中鹰嘴豆中、高剂量组有统计学差异(P<0.05)，GSH含量虽有升高的趋势，但差异均无统计学意义(表1～表4)。说明鹰嘴豆具有一定的抗氧化作用。

N.空白组；M.模型组；DL.鹰嘴豆低剂量组；DM.鹰嘴豆中剂量组；DH.鹰嘴豆高剂量组

3 讨论

正常机体拥有一套完整的抗氧化防御体系，包括SOD[12]、CAT[13]和谷胱甘肽过氧化物酶[4]等，从而机体内自由基保持一种动态平衡。但当抗氧化系统遭到破坏时，就会产生过量的MDA等脂质过氧化物，从而引起细胞损伤。SOD是一种超氧化物歧化酶，能催化超氧阴离子产生歧化反应，生成过氧化氢(H2O2)。

D-半乳糖致亚急性衰老动物模型最初根据衰老代谢紊乱学说为指导研制而成，方法是在一定时间内连续给动物注射大剂量的D-半乳糖，使机体细胞内半乳糖浓度增高，在醛糖还原酶的催化下还原成半乳糖醇，半乳糖醇不能被细胞进-步代谢而堆积在细胞内，影响细胞正常渗透压，导致细胞肿胀、功能障碍、代谢紊乱，最终致使衰老发生[14]。近年来对D-半乳糖致衰老模型的大量研究证实，D-半乳糖在体内的堆积不仅引起机体代谢紊乱，而且还可导致其他如免疫功能低下、过氧化水平增加、学习记忆障碍等与人类自然衰老相似的一系列改变。 本试验通过建立D-半乳糖致衰老模型小鼠研究了鹰嘴豆的抗氧化作用，结果显示，造模后动物SOD活力明显下降，MDA、蛋白质羰基含量升高，提示对动物造成氧化损伤；给药8周后，小鼠氧化损伤指标SOD活力、MDA含量等均有改善，表明鹰嘴豆对D-半乳糖所致衰老模型小鼠具有一定的抗氧化作用。

表1 鹰嘴豆对D-半乳糖致衰老模型小鼠MDA含量的影响

注： “**”表示与模型对照组相比差异极显著(P<0.01)， “##”表示与空白对照组相比差异极显著(P<0.01)。

Note:"**" indicates extremely significant difference compared with model control group(P<0.01); "##" indicates extremely significant difference compared with negative control group(P<0.01).

表2 鹰嘴豆对D-半乳糖致衰老模型小鼠蛋白质羰基含量的影响

注： “#”表示与空白对照组相比差异显著(P<0.05)。

Note:"#" indicates significant difference compared with negative control group(P<0.05) .

表3 鹰嘴豆对D-半乳糖致衰老模型小鼠SOD含量的影响

注：“*”表示与模型对照组相比差异显著(P<0.05);“**”表示与模型对照组相比差异极显著(P<0.01);“##”表示与空白对照组相比差异极显著(P<0.01)。

Note:"*" indicates significant difference compared with model control group(P<0.05); "**" indicates extremly significant difference compared with negative control group(P<0.05); "##" indicates extremely significant difference compared with negative control group(P<0.01).

表4 鹰嘴豆对D-半乳糖衰致老模型小鼠GSH含量的影响

注： “#”表示与空白对照组相比差异显著(P<0.05)。

Note:“#”indicates significant difference compared with negative control group(P<0.05).

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Study on Antioxidation Activity of Chickpeas in Aging Mice Induced by D-Galactose

ZHAO Xue-jie1,LIANG Chu-yan1,LI Jie2,YAN Chao-qun3,CHEN You-jun4

(1.GuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicine，Guangzhou，Guangdong，510006，China；2.ChangjiStateDooouAgriculturalScienceandTechnologyCo.,Ltd，Changji，Xinjiang，831109，China；3.SchoolofMedicineJinanUniversity，Guangdong，Guangzhou，510632，China；4.GuangzhouHongyunMedicalScientificandTechnologicalCo.,Ltd，Guangzhou，Guangdong，510663，China)

To explore the antioxidation activity of chickpeas in aging mice induced by D-galactose,the content of MDA,protein carbonyl,SOD and GSH were detected.The results showed that mice in chickpeass middle dose group obtained faster body weight gain than that in other groups; Compared with the negative control group,the serum MDA and protein carbonyl content in mic of model control group were significant increased(P<0.05 ),SOD vitality and GSH content were decreased significantly (P<0.05); Compared with the model control group,MDA content in three doses of chickpeas groups was decreased significantly (P<0.01),SOD activity was increased,with significant difference in chickpeas high and middle dose groups (P<0.05),GSH content had a rising trend,but without significant difference (P>0.05).In total,this study showed that chickpeas has antioxidant effect on D-galactose induced aging mice.

chickpeas; antioxidation; aging mice

2016-04-22

赵雪洁(1991-)，女，安徽阜阳人，硕士研究生，主要从事免疫药理学研究。*通讯作者

S853.71

A

1007-5038(2017)05-0073-04