整合素αvβ3在食管肿瘤中的表达及意义

李丹丹,张 斌,张赫恂，李长锋,王学菊,韩志峰

(1.吉林大学中日联谊医院 a.内镜中心；b.病理科；c.胸外科，吉林 长春130033;2.延边大学医学院)

整合素αvβ3在食管肿瘤中的表达及意义

李丹丹1a,张 斌1a,张赫恂2，李长锋1a,王学菊1b,韩志峰1c*

(1.吉林大学中日联谊医院 a.内镜中心；b.病理科；c.胸外科，吉林 长春130033;2.延边大学医学院)

目的 探讨整合素αvβ3在不同食管肿瘤中的表达及其意义。方法 分别收集10例正常食管组织标本、10例食管平滑肌瘤标本及30例食管癌标本，分为3组，应用免疫组织化学方法对标本中整合素αvβ3的表达进行分析。结果 食管癌组织中可见整合素αvβ3呈明显阳性表达；正常食管组织及食管平滑肌瘤组织则不表达或弱表达。食管癌组整合素αvβ3的表达与正常食管组和食管平滑肌瘤组差异具有统计学意义(P<0.05)，而正常食管组与平滑肌瘤组之间则无明显差异(P>0.05)。食管癌组整合素αvβ3的表达与肿瘤的浸润深度无关(P>0.05)，而与肿瘤分化程度及淋巴结转移相关(P<0.05)。结论 整合素αvβ3的表达可作为判断食管癌恶性程度及预后的重要生物学指标。

整合素αvβ3；食管癌；预后

(ChinJLabDiagn,2017,21:0571)

恶性肿瘤的生长、侵袭、转移受多种因素的影响，其中整合素作为细胞粘附分子在其中起着重要的调节作用，它参与细胞-细胞之间、细胞-细胞外基质的相互作用[1]。多项研究证实整合素αvβ3在多种恶性肿瘤中高表达，且与其恶性行为密切相关。为进一步研究整合素αvβ3与食管癌生物学行为的关系，我们采用免疫组化方法对食管良性及恶性肿瘤组织标本进行检测，探讨整合素αvβ3与食管癌的侵袭、转移及其对预后评价的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料

收集我院外科食管癌手术标本共30例，其中男23例，女7例，年龄范围40-79岁，平均年龄60.6岁，体重45-73 kg，平均体重65 kg。并于距肿物大于5.0 cm的阴性切缘部位取材食管正常组织10例，外科及内镜食管平滑肌瘤手术标本10例作为对照组。

1.2 试剂与方法

50例标本均经4%甲醛固定、石蜡包埋、4 μm连续切片，行常规HE染色确定取材的食管组织性质。采用免疫组化SP法，一抗选用抗整合素αvβ3多克隆抗体(美国Abbiotec公司)，具体操作按说明书步骤进行。根据免疫组化染色结果判定整合素αvβ3在食管正常组织和肿瘤组织中的表达。

1.3 结果判定

整合素αvβ3表达阳性时，镜下可见细胞膜和细胞浆内黄色颗粒，且染色强度高于背景。其阳性结果的判定需将染色强度及阳性细胞占肿瘤细胞总数的百分比综合计分。染色强度的评分：无色(-)为0分，淡黄色(+)为1分，棕黄色(++)为2分，深棕色(+++)为3分。阳性细胞的百分数评分：在高倍镜(400倍)下对每张切片随机选取5个视野，每个视野计数200个细胞，共记录每1000个细胞中所含的阳性细胞数，然后计算百分比。0为0分，≤25%为1分，26%-50%为2分，51%-75%为3分，76%-100%为4分。当染色强度的评分与阳性细胞百分数评分之和≥3，即为免疫组化阳性。

1.4 统计学分析

2 结果

经HE染色病理组织学检查确定30例食管癌标本均为食管鳞癌。于肿瘤阴性切缘留取的10例正常食管组织HE染色未见异型肿瘤细胞，且整合素αvβ3免疫组化染色结果显示无色或淡黄色。食管平滑肌瘤染色呈淡黄色。食管癌组织中可见肿瘤细胞及血管内皮细胞的细胞膜和细胞浆内着色程度不一的黄色、棕黄色或棕褐色颗粒，细胞核不着色，间质淡染(见图1，2)。经两两比较发现，食管癌组织中的整合素αvβ3阳性表达率显著高于正常食管组织和食管平滑肌瘤(P<0.001)，见表1。

a：正常食管；b：食管平滑肌瘤；c：食管癌

图1 不同食管组织整合素αvβ3免疫组化染色结果

a：HE染色图片(×400)示食管中分化鳞癌；b：免疫组化染色示肿瘤细胞及新生血管内皮细胞膜和细胞浆内见整合素αvβ3表达(×400)。

图2 食管癌组织HE染色及整合素αvβ3免疫组化染色

表1 整合素αvβ3在食管组织中的表达及相关性

注释：* FISHER精确概率法；a：与正常食管组织相比，P<0.05；b：与食管平滑肌瘤相比，P<0.05。

对30例食管癌标本整合素αvβ3表达与临床病理分期的关系进行研究，发现整合素αvβ3的表达与肿瘤组织的浸润程度无关，而与其分化程度相关(P<0.05)。在有或者无淋巴结转移者中整合素αvβ3的表达差异显著(P<0.05)，见表2。

3 讨论

多项研究证实，不同组织来源的恶性肿瘤细胞和血管内皮细胞的表面都存在整合素αvβ3的高表达[2-8]，这与多种肿瘤的不良预后以及早期转移密切相关。除此之外，多种基于上述结论的恶性肿瘤整合素αvβ3受体显像特异性靶向示踪剂的研究也如火如荼的开展起来[9-12]，从而进一步证实了整合素αvβ3在肿瘤新生血管形成及侵袭转移中的作用。

在本研究中，食管癌组织中整合素αvβ3在癌细胞和血管内皮细胞呈现过量表达，而在正常食管组织和平滑肌瘤中几乎不表达或微量表达，有统计学差异(P<0.05)。有研究报道整合素αvβ3的表达在恶性程度不同的同一种肿瘤细胞中也不一致，随着癌组织分化程度的降低，整合素αvβ3的表达率呈现上升趋势[8,13-15]。在本研究中同样发现食管癌组织分化越差整合素αvβ3的表达越高，而分化程度越高，表达则越低，且差异有统计学意义(P<0.05)，提示癌细胞分化程度越差，对血液供应的要求越高，其浸润程度可能越明显，预后可能就越差。

表2 整合素αvβ3表达与食管癌患者病理参数的比较

*阳性细胞百分率

有研究证实肺癌脑转移和骨转移组织中整合素αvβ3的阳性表达强度均高于原发肺癌组织[8,16]，均提示整合素αvβ3参与肿瘤的侵袭转移。本研究发现发生淋巴结转移的食管癌组织中整合素αvβ3的表达明显高于无淋巴结转移者，与上述研究结果相符，对于肿瘤的预后评估有一定的指导意义。

综上所述，整合素αvβ3的表达与食管癌的恶性程度及淋巴结转移密切相关，可作为临床上判断预后的一项重要生物学指标。另外，食管癌组织中整合素αvβ3的高表达可为临床上食管癌的治疗提供新的思路。

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Expression and significant of integrin αvβ3 in esophageal tumor

LIDan-dan,ZHANGBin,ZHANGHe-xun,etal.

(EndoscopyCenter,China-JapanUnionHospitalofJilinUniversity,Changchun130033,China)

Objective To investigate the expression and significant of integrin αvβ3 in different esophageal tumors.Methods 10 normal esophageal tissues,10 leimyoma tissues and 30 esophageal carcinoma tissues were collected.Pathological and immunohistochemical methods were used to study the expression of integrin αvβ3.Results The immunohistochemical staining results showed that integrin αvβ3 expressed in the tissues of esophageal carcinoma.None or only faint yellow grain could be seen in the normal esophageal tissues and leimyoma esophageal tissues,with statistical significance to carcinomas (P<0.05).The expression of integrin αvβ3 had relevance to the differentiated degree and lymphatic metastasis of the tumor (P<0.05),but no relevance to the invasive depth(P>0.05).Conclusion Integrin αvβ3 can be used as an important biological indicator to estimate the severity and prognosis of the esophageal carcinomas.

integrin αvβ3；esophageal carcinoma；prognosis

吉林省科技发展计划项目(白求恩专项20160101064JC);吉林大学第三临床医学院优青培养计划支持经费(419080500365)

1007-4287(2017)04-0571-03

R735.1

A

2016-07-18)

*通讯作者