WHO墨尔本流感中心对野生鸟类禽流感的监测

马慧玲，王雷之，李 艳，商爱国，党安坤，孙圣福，兰邹然

(1. 山东省动物疫病预防与控制中心，山东济南 250022；2. 临沂市畜牧检测中心，山东临沂 276000；3. 莒南县动物疫病预防控制中心，山东莒南 276002；4. 济宁市动物疫病预防与控制中心，山东济宁 272000）

WHO墨尔本流感中心对野生鸟类禽流感的监测

马慧玲1，王雷之2，李 艳3，商爱国4，党安坤1，孙圣福1，兰邹然1

(1. 山东省动物疫病预防与控制中心，山东济南 250022；2. 临沂市畜牧检测中心，山东临沂 276000；3. 莒南县动物疫病预防控制中心，山东莒南 276002；4. 济宁市动物疫病预防与控制中心，山东济宁 272000）

根据墨尔本世界卫生组织（WHO）流感参考和研究合作中心的监测结果，近10年来，澳大利亚野生鸟类流感病毒监测的年平均阳性率均大于1.0%，2005—2012年分离到了除H14亚型外的所有禽流感亚型病毒，其中最多的是H5亚型低致病性流感病毒，共94株（21.36%），监测中未发现高致病性禽流感病毒。本文总结了该流感中心的机构情况、样品处理流程和野生鸟类禽流感监测计划，以期对我国禽流感防控工作提供借鉴。

澳大利亚；野生鸟类；禽流感；监测；防控

近年来，全球冬季高致病性禽流感疫情暴发严重。2014—2015年高致性禽流感疫情在美国暴发，给美国的养鸡业带了巨大的经济损失[1]。2016年冬季该病又席卷欧洲，危害极大。这些禽流感疫情与野生鸟类的传播不无关系，野生鸟类在禽流感传播中起着越来越重要的作用。因为随着自然界中禽流感病毒的增多，受到感染的野生鸟类也越来越多，携带禽流感病毒的鸟类除了自身是受害者外[2]，还会自然地按照一定规律进行着重复的迁徙活动[3]。全球主要的野生鸟类迁徙路线约有10条（图1）。野生鸟类沿着迁徙路线可能会受到禽流感病毒感染，从而携带禽流感病毒，同时又通过迁徙传播着禽流感病毒，成为全球禽流感传播的重要媒介动物。墨尔本世界卫生组织流感参考和研究合作中心（WHO Collaborating Centre for Reference & Research on Infl uenza，以下简称为WHO墨尔本流感中心）开展了野生鸟类的禽流感监测，由于澳大利亚与我国共享有迁徙路线，因此本文对监测情况予以归纳总结，以期对我国野生鸟类禽流感监测提供借鉴。

图1 全球主要野鸟迁徙路线

1 WHO墨尔本流感中心简介

世界卫生组织（WHO）与全球80个国家有合作，约有超过700家合作中心，其中在西太平洋地区有190个。WHO最早的全球流感监测和应急响应系统网络（GISN）始建于1952年，其6个合作中心分别在墨尔本、东京、北京、伦敦、亚特兰大和孟菲斯，WHO墨尔本流感中心是这6个中心之一。该中心的前身墨尔本联邦血清实验室（CSL），1951年被指定为WHO区域流感中心，于1992年被指定为WHO流感参考和研究合作中心（南半球的第1个合作中心，也是第3个被指定的全球合作中心）。该中心现有员工25名，大多数工作人员负责监测活动和疫苗种毒准备工作，且获得了澳大利亚政府卫生部的支助。该中心的主要工作包括：分析来自世界各地流感病毒样品和病毒分离株，监视哪些病毒株在世界各地循环，参与全球流感疫苗研发，向全球国家流感中心提供培训和实验室支持，开展流感检测、预防和治疗的改进研究等。

2 中心样品处理流程

WHO墨尔本流感中心接收的禽流感样品进入实验室后，先通过实时PCR或测序进行快速鉴定，然后将样品接种MDCK或MDCK-SIAT-1细胞系进行培养，分离流感病毒，或者接种鸡胚进行病毒分离，对分离到的病毒株通过抗原分析、基因序列测定 、抗病毒药物敏感性研究、筛选敏感抗病毒药物、制备雪貂抗血清、确定病毒的抗原和遗传特性等方面研究，完成流感监测任务（图2）。由于病毒株背景清晰，所以有潜力的新毒株将成为全球流感防控的疫苗候选株。在选择疫苗候选株时还需要进行一系列工作，如通过血凝抑制和病毒中和试验，来比较毒株的培养滴度。这一点对于疫苗生产也很重要，因为只有滴度高的毒株，才能生产抗原含量高的疫苗。还需要用流行病学、疫苗有效性、模型预测等方面数据，研究全病毒序列，为全球流感防控提供技术储备和技术支持。

图2 WHO墨尔本流感中心的样品处理流程

3 澳大利亚国家禽流感野生鸟类监测计划

澳大利亚制定了国家禽流感野生鸟类监测计划（NAIWB），参与者包括联邦政府、州政府相关部门以及非政府部门的私有参与者等，而WHO墨尔本流感中心属于参与监测工作的非政府部门。

该计划的主动监测是基于风险的便利抽样监测，样品来源于健康的野生活鸟和被猎杀的野生鸟类，选择靠近家禽与人类活动的地点开展监测，采样地点都是提前设定的；与此同时，在被动监测野鸟类出现不明原因发病和死亡事件时，样品由公众、执业兽医、大学科研人员、动物园工作人员等通过野生动物和动物园协调员系统提交。

4 WHO墨尔本流感中心流感监测结果

4.1 2005—2015年禽流感监测结果

WHO墨尔本流感中心2005—2015年禽流感的监测结果显示（表1），近10年来，每年的野生鸟类流感病毒监测阳性率均大于1.0%，最低为2006—2008年的1.1%，最高为2014—2015年的4.0%，平均为2.1%。监测结果显示，2010年之前流感病毒监测阳性率均低于2.0%，而之后基本要高于3.0%，这与近几年来全球禽流感的流行存在一定的相关性。

表1 2005—2015年WHO墨尔本流感中心野鸟禽流感的监测结果

4.2 2005—2012年分离到的禽流感病毒亚型

2005—2012年，WHO墨尔本流感中心分离到了除H14以外的其 他H1～H16亚型禽流感病毒（图3）。其中，最多的是H5亚型低致病性流感病毒，共94株（21.36%）；其次为H6亚型，共69株（15.68%）；再其次是H3亚型64株（14.55%）和H9亚型34株（7.73%）。目前倍受关注的H7亚型流感病毒排在约第10位，共分离到了17株（3.86%）[4]（表2）。从以上结果可以看出，野生鸟类几乎携带了所有亚型的流 感病毒。由于野鸟传播禽流感具有极高的不确定性，这对于禽流感的控制无疑是一种挑战。

图3 2005—2012年WHO墨尔本流感中心检测到的流感病毒亚型

表2 2005—2015年WHO墨尔本流感中心H5 / H7亚型低致病性流感检测结果

4.3 近10年H5 / H7亚型低致病性流感检测结果

近10年，WHO墨尔本流感中心共检出H5亚型低致病性流感毒株115株，除了2012.7—2013.6年度未检出外，其他年度均检测到该亚型毒株，检出最多的是2011.7—2012.6年度，共检出27株病毒。共检出11株H7亚型低致病性流感病毒，除了2005.7—2006.6、2007.7—2008.6和2010.7—2011.6年度未检出该亚型病毒外，其他年度均检出该亚型病毒。这2个亚型的低致病性流感病毒都可能通过病毒重组进化成为高致病性禽流感病毒，对于禽流感非免疫无疫国的澳大利亚而言将是一种潜在的威胁。

5 思考

随着我国对野生鸟类禽流感监测重视程度的加强，近3年来对野鸟禽流感病原学的监测数量呈依次增长势头，2014、2015和2016年的病原学监测样品数量分别为4 771、12 045和11 953份，但病原学监测阳性样品数量分别为0、1和1份，阳性率极低，这与共享野鸟迁徙路线的澳大利亚WHO墨尔本流感中心开展的野鸟禽流感监测结果差距很大。因此，应积极探讨我国野鸟禽流感病原监测阳性率低的原因，是监测方案设计不科学、监测方案敏感性低、监测采集的样品有问题，还是样品运输和保存条件差、检测方法敏感性低，或是还有其他原因，应认真分析，客观面对。因为野鸟在禽流感传播中作用越来越大，且其在 禽流感暴发中起到的不确定性作用难以排除，只有准确发现野鸟中的禽流感病毒带毒情况，才能更好地预测其将带来的威胁，从而更有效地防止野鸟将禽流感病毒传播到家禽中。因此，我国当前除了应继续加强对野鸟的禽流感监测外，还应重点解决如何提高禽流感监测敏感性的问题，以便及时、准确地发现野鸟中禽流感病毒的存在和分布情况，防止由野鸟引发的禽流感疫情发生。

[1] 李印，韦欣捷，徐全刚，等. 2014年以来美国高致病性禽流感疫情分析[J]. 中国动物检疫，2016，33（1）：5-8.

[2] 阎保平. 科研信息化在青海湖联合科研基地建设中的运用[J]，中国教育网络，2012（6）：25-28.

[3] PETER B. Bird migration：the present view of evolution，control，and further development as global warming progresses[J]. Acta Zoologica Sinica，2002，48（3）：291-301.

[4] GRILLO V L，ARZEY K E，HANSBRO P M，et al. Avian infl uenza in Australia：a summary of 5 years of wild bird surveillance[J]. Australian Veterinary Journal，2015，93（11）：387-393.

（责任编辑：杜宪）

Avian Inf uenza Surveillance for Wild Birds Launched by WHO Collaborating Centre for Reference and Research on Inf uenza in Melbourne

Ma Huiling1，Wang Leizhi2，Li Yan3，Shang Aiguo4，Dang AnKun1，Sun Shengfu1，Lan Zouran1
（1. Shandong Animal Disease Prevention and Control Center，Jinan，Shandong 250022；2. Linyi Testing Center for Animal Husbandry，Linyi，Shandong 276000；3. Junan Animal Disease Prevention and Control Center，Junan，Shandong 276002；4. Jining Animal Disease Prevention and Control Center，Jining，Shandong 272000）

The Melbourne WHO Collaborating Centre for Reference and Research on Influenza conducted avian infl uenza（AI）surveillance for wild birds. According to the surveillance data，in the past 10 years in Australia，the annual average positive rates of AI in wild birds all exceeded 1.0%. Except subtype H14，all of the subtypes of AIV were isolated from 2005 to 2012. Among these isolated strains，H5 subtype low pathogenic avian influenza virus accounted for the fi rst place with 94 virus strains（ratio of 21.36%）. In addition，no high pathogenic avian infl uenza virus was found in the surveillance. Objective to provide reference for AI prevention and control in China，3 key points of the WHO Collaborating Centre were summarized including its organization situation，handling procedure of the samples，and the surveillance plan for AI in wild birds.

Australia；wild bird；avian infl uenza；surveillance；prevention and control

S855.2

：B

：1005-944X（2017）05-0028-04

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.05.008

山东省科技发展计划项目（2015GNC110027）

兰邹然