蒙药枸杞子-7与P4503A和GSH-Px活性相关性研究△

白梅荣 伊丽娜 韩晓静 王亮亮 廉荣梅

(内蒙古民族大学 内蒙古 通辽 028000)

蒙药枸杞子-7味散处方来源于《观者之喜》，蒙药名为朝努音·哈日木格-7，异名为七味庞巴列散(《中国医学百科全书·蒙医学》)、庞巴列-7(《方剂学》)。该处方由枸杞子、沙棘、木香等7味药组成。本方性温，临床常用于治疗妇女血瘀症[1-3]。本实验研究枸杞子-7与小鼠肝脏Ⅰ相代谢酶P4503A和Ⅱ相代谢酶谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的相关性研究，了解枸杞子-7体内代谢过程，为临床合理用药提供科学依据。

1 实验材料

1.1 仪器设备:酶标仪、离心机、P4503A试剂盒、GSH-Px试剂盒、移液枪、AUW120D电子天平(沈阳龙腾电子有限公司)。

1.2 实验动物:40只昆明种小鼠，雄性，体重20±2g，许可证号码：SCXK(吉)-2011-0004，由长春市亿斯实验动物技术有限责任公司提供。

2 实验方法

2.1 动物处理方法:取小鼠40只，雄性，随机分成正常对照组，枸杞子-7高、中、低剂量组，每组10只，灌胃给药，1天灌胃1次，连续灌胃10天，末次给药10min后，取各组小鼠肝组织，放入冷生理盐水中洗去浮血，滤纸吸干后称取0.5g，按1:9加入冷生理盐水，冷浴匀浆，匀浆液以3000r/min离心10min,得组织上清液，冰箱低温保存，待测P4503A与GSH-PX酶活性[4-6]。

2.2 P4503A和GSH-Px活性测定方法：从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。

除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37度恒温箱温育60min，弃去液体，吸水纸上拍杆，每孔加满洗涤液，静置1min,甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗版5次。

每孔加入底物A、B各50μL，37度避光孵育15min。

每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果见表。

3 实验结果

与正常对照组相比，枸杞子-7高、中、低3个剂量均明显降低GSH-Px活性(P<0.05)；与正常对照组相比，枸杞子-7中剂量组明显升高肝组织P4503A活性(P<0.05),结果见表1。

表1 蒙药枸杞子-7与P4503A和GSH-Px活性的相关研究

注：与正常对照组比较※P<0.05

4 结论

实验结果提示，蒙药枸杞子-7可能既是GSH-Px抑制剂，又是P4503A诱导剂。枸杞子-7体内代谢与P4503A有关。

5 讨论

细胞色素P450是一种高铁血红素的蛋白，广泛分布于肝脏、小肠等器官,是体内最重要的Ⅰ相药物代谢酶。现代研究表明[1-2],P4503A占肝脏及肠道中P450酶系总含量的50%以上，参与90%以上口服药物的催化代谢，因此了解药物对P4503A酶活性的影响,将对药物的临床合理用药有着十分深远的指导意义。

GSH-Px几乎存在于所有组织和细胞中，但主要存在于肝脏、结肠和生殖腺中的Ⅱ相代谢酶之一。主要清除脂类氢过氧化物、清除H2O2、减轻有机氢过氧化物对机体的损伤、参与前列腺素合成的调节等作用。检测GSH-Px活性是衡量机体抗氧化力的重要指标。因此，通过药物与该酶的相关性研究，可评价其药物是否存在抗氧化能力。

本实验结果显示，①枸杞子-7 明显下调肝组织中GSH-Px活性。可见，枸杞子-7具有明显的抗氧化作用。②枸杞子-7可明显上调肝组织P4503A活性。提示，枸杞子-7体内代谢与P4503A有关，而枸杞子-7通过诱导P4503A活性可加速本身代谢，降低体内药物含量。因此，临床口服应用枸杞子-7时适当加大剂量才能保证其临床有效剂量，发挥其较好疗效。

[1]巴根那.蒙医方剂学[M].呼和浩特：内蒙古人民出版社，2007,112.

[2]布和巴特尔，奥·乌力吉.传统蒙药与方剂[M].赤峰：内蒙古科学技术出版社，303.

[3]内蒙古自治区卫生厅编著.内蒙古蒙药材标准[S].赤峰:内蒙古科技出版社,1987.

[4] 李平,程建峰.地塞米松、苯巴比妥钠和利多卡因对昆明种小鼠肝P450 3A酶的影响[J]. 第四军医大学学报，2001，26-28.

[5] 佘集凯,萨仁高娃,霍万学,等. 地锦草提取物对小鼠肝组织GSH- PX和CAT活性的影响[J].内蒙古民族大学学报(自然科学版),2005,191-139.

[6] 王传鹏. 芹菜素对雄性小鼠肝脏 SOD、GSH-Px、CAT活力影响[J].中国实用医药,2013,21-22.