苏州地区临床用血浆中亚甲蓝残留量及安全性调查分析*

曹 燕 曹维娟

苏州地区临床用血浆中亚甲蓝残留量及安全性调查分析*

曹 燕 曹维娟

目的 通过对血浆病毒灭活后亚甲蓝残留量检测，探讨临床用血浆安全性。方法 随机抽取213份病毒灭活血浆，采用高灵敏荧光光度法检测不同规格的病毒灭活血浆中亚甲蓝残留量，并对亚甲蓝残留量检测结果进行分析。结果

亚甲蓝 残留量 荧光分光光度法

为了降低临床上输血感染病毒的风险，增加输血的安全性，一般采用亚甲蓝光化学法灭活血浆中的病毒。亚甲蓝灭活血浆病毒的有效浓度为（1.0～5.0） μmol/L（即亚甲蓝释放量），以保证病毒的有效灭活；在灭活病毒以后，需使用特制的一次性病毒灭活过滤器滤除亚甲蓝，使最大残留量不超过0.3 μmol/L（临床用血浆的亚甲蓝残留量），以保证大剂量输血后亚甲蓝在体内的累积不会过多，从而保证用血安全。本文利用基于阴离子型环糊精超分子包合物高灵敏荧光光度分光法检测血浆中残留亚甲蓝[1]，现将2012年至今随机抽取的213份病毒灭活血浆亚甲蓝残留量检测结果报告如下。

材料与方法

1 仪器与材料 LS-55 荧光分光光度计（ 美国Perkin Elmer 公 司，病毒灭活柜由中保康医疗器具公司提供），亚甲蓝（ 纯度大于 98. 5%，TCI公司） ，羧甲基-β-环糊精（ 纯度大于98%，山东滨州智源生物科技有限公司） ，其他试剂均为分析纯。

2 方法

2.1 按照《全血和成分血质量要求》，每月随机抽取病毒灭活血浆，100 ml、150 ml、200 ml血浆各71袋。

2.2 溶液配制：称取亚甲蓝0.074 5 g，置于100ml量瓶中，用磷酸盐缓冲液（PBS，pH 7.2）溶解并稀释至刻度。准确量取5.00 ml，用PBS定容到100 ml，得贮备液（100 μmol/L），避光、密封保存。

2.3 血浆样品的制备：向420 μl的待测血浆中加入344μl羧甲基-β-环糊精饱和溶液（0.01 mol/ L），使羧甲基-β-环糊精浓度为4.5 mmol/L，充分混匀，避光放置20 min，即得待测溶液。同时，用空白血浆按前述方法配制不含亚甲蓝的待测溶液，即得空白溶液。

2.4 荧光分光光度法测定血浆中亚甲蓝含量：将待测溶液（或空白溶液）置于荧光比色皿中，以665 nm 为激发波长、680 nm为发射波长、激发狭缝宽度5 nm、发射狭缝宽度5 nm、激发光程2 mm、发射光程10 mm，测定其荧光强度，由标准曲线计算亚甲蓝含量。

结 果

苏州市中心血站向各医院供应病毒灭活血浆，血浆容量为75 ml、100 ml、150 ml、200 ml四种规格，其中75 ml和100 ml血浆病毒灭活时采用同一种过滤器，除过滤时造成血浆容量损耗外，不会对75 ml血浆亚甲蓝残留量产生影响，故未对75 ml病毒灭活血浆进行亚甲蓝残留量检测。213袋病毒灭活血浆亚甲蓝残留量结果显示，60袋血浆亚甲蓝残留量低于高灵敏度荧光分光光度法的最低定量限0.089 μmol/L[3]，亚甲蓝残留量浓度为0.089～0.20 μmol/L 157袋，0.21～0.30 μmol/L 12袋。病毒灭活血浆亚甲蓝残留量均低于0.3 μmol/L，符合国家标准。三种规格的病毒灭活血浆亚甲蓝残留量检测结果如表1。

表1 三种不同规格病毒灭活血浆亚甲蓝残留量检测结果

从表1中可以看出，三种规格的血浆采用标准容量的滤器，亚甲蓝残留量随血浆量的增加而增加，但均符合质量要求。

讨 论

病毒灭活作为一种降低输血风险的新技术，除了能有效灭活血液或血液成分中可能存在的病毒、对血液成分的功能无显著不良影响外，更重要的是病毒灭活剂的残留不能对用血者的安全方面造成影响[2]，因此各血站均对病毒灭活后亚甲蓝残留量进行质量检测。

从本站病毒灭活血浆残留量检测的结果分析，三种规格的血浆均符合国家质量要求。由于滤器对血浆的损耗，建议厂家能提供用于75 ml甚至更小规格血浆的灭活耗材；本站血浆分离全部采用全自动血液成分分离机分离，血浆容量标准化，与一次性病毒灭活耗材匹配；100 ml和150 ml血浆采用同一款过滤器过滤血浆中亚甲蓝，滤盘材质与直径完全相同，只是后者所用一次性病毒灭活耗材所加入的亚甲蓝量多于前者。该滤器对亚甲蓝的滤除效果较好。血浆在病毒灭活光照后在过滤的过程中由于滤器材质对血浆的粘附与截留，会对血浆容量产生损耗，厂家提供的滤器也考虑了容量的损耗与过滤效果的平衡。随着血浆容量的增大，过滤时间延长，亚甲蓝过滤效果可能下降，因此建议在全血分离时定量取浆便于病毒灭活耗材的选择。

在日常的病毒灭活过程中常会遇到过滤不畅，不得不人为用力挤压光照袋才能流入的情况，均有可能对亚甲蓝残留量产生影响，建议采用无菌接驳的方式更换滤器再次过滤，保证亚甲蓝残留量，加强血浆病毒灭活后残留亚甲蓝的质量控制，进一步降低临床上输血感染病毒的风险，提高血浆输注的安全性。

1 周群刚，谢莲，方敏，等.基于阴离子型环糊精超分子包合物高灵敏荧光光度分光法检测血浆中残留亚甲蓝[J].中国药房，2014，25（6）：519-521.

2 于建华，王明静.病毒灭活血浆若干问题探讨[J].中国现代医生，2010，4（12）：20-22.

3 谢莲，周群刚.血浆中亚甲蓝释放量和残留量的超分子荧光分析[J].化学研究与应用，2014，26（3）：432-435.

（本文编辑：2016-11-17）

R457.1+4

A

1671-2587（2017）02-0125-02

王敏）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.02.008

*本课题受苏州市科教兴卫项目（No.KJXW2012034）资助

215006 江苏省苏州市中心血站

曹燕（1981–），女，江苏苏州人，主管护师，学士，主要从事成分制备与质量控制工作，（E-mail）55176352@qq.com。

病毒灭活血浆亚甲蓝残留量均符合国家标准。结论 通过对病毒灭活耗材的原料监测，采用高质量的过滤器材，并加强制备过程中关键控制点的监测，可以避免亚甲蓝残留量超标现象，保证输血安全。