抗-HCV抗体、HCV-RNA定量与ALT检测相关性分析

林晓渊

(福建中医药大学附属厦门市中医院检验科，福建厦门361000)

抗-HCV抗体、HCV-RNA定量与ALT检测相关性分析

林晓渊

(福建中医药大学附属厦门市中医院检验科，福建厦门361000)

目的比较不同实验方法检测丙型肝炎诊断的准确性，并观察丙型肝炎抗体与HCV－RNA病毒载量及ALT异常之间的相关性。方法对118例高敏化学发光法(CIA)检测丙肝抗体初筛结果呈阳性(S/Co＞1)的标本，并对其进行荧光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）进行HCV－RNA病毒载量检测及应用贝克曼全自动生化仪丙氨酸转氨酶(ALT)指标。结果118例丙肝抗体初筛阳性患者中，HCV RNA阳性率为46．6%（55/118）不同HCV抗体检测值在不同区间HCV－RNA检测阳性率不全相同，差异有统计学意义（χ2=62．745，P＜0．05）；在55例HCV－RNA阳性(HCV RNA＞103copies/ml)的样本中，有43例ALT结果异常，ALT异常率为78．1%（43/55），其ALT异常率随着HCV RNA含量的增高而升高，即呈正相关(r=0．96，P＜0．01)。结论化学发光法检测血清HCV抗体诊断HCV与荧光PCR检测方法均可能存在假阳性或假阴性情况；荧光PCR检测结果阳性率低于CIA检测结果；在临床诊断中丙肝抗体的检测应与荧光定量聚合酶链反应一起使用，可以降低漏诊，应联合丙肝抗体、HCV－RNA、ALT检测为临床抗病毒提供有效评估提供依据。

丙型肝炎；高敏化学发光法；荧光定量聚合酶链反应；丙氨酸转氨酶

HCV是肠道外传播的非甲乙型肝炎的主要病原体，所导致的肝炎称为丙型肝炎，是常见的慢性肝病之一。丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的一种重要的世界性传染病[1]。HCV感染呈世界性分布，据世界卫生组织统计，全球HCV的感染率约为2．8%，估计约1．85亿人感染了HCV，每年新发丙型肝炎病例约3．5万例，我国丙型肝炎病毒（HCV）感染率约为2．5%～4．9%，多数HCV感染都是无症状性的，少数引起急性肝炎的患者，其症状也比甲型和乙型急性肝炎的症状轻不幸的是，HCV病毒感染初期可引起肝脏慢性炎症坏死和纤维化，进一步发展成为肝硬化、肝癌等终末期肝病，严重危害人类健康[2]。因此，早期准确诊断和合理治疗具有重要的临床意义。

HCV抗体是反映HCV是否感染的主要指标。HCV RNA是HCV复制的标志，越来越多的肝病实验室已经把它作为判断丙肝感染和丙肝治疗疗效的主要参考。而Sysmex高敏化学发光仪的出现，使一种更加灵敏、结果更加准确的丙肝抗体检测新方法成为人们关注的焦点。本实验旨在探讨丙肝抗体检测中的临床价值，结合患者HCV RNA定量检测及ALT指标，为丙肝的实验诊断、治疗以及疗效提供参考。

1 材料与方法

1．1一般资料118例标本均来自我院2015年1月－2016年2月门诊和住院患者，经高敏化学发光法(ECIA)检测丙肝抗体，初筛结果呈阳性(S/Co)＞1。其中：男性78例，女性40例，年龄平均(23±58)岁。1．2方法空腹采集病人抽取2ml外周静脉血于EDTA－K2抗凝及真空抗凝管中并分离血清，用于丙肝抗体测定及ALT，并按照天根RNA提取试剂盒提取RNA用于HCV－RNA病毒载量测定。丙肝抗体测定ECIA检测采用日本希森美康HISCL－5000的免疫诊断系统及希森美康医用电子（上海）有限公司的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂；ALT采用贝克曼全自动生化仪及配套试剂检测；HCVRNA病毒载量采用荧光定量聚合酶链反应使用厦门安普利生物工程有限公司生产的丙肝肝炎病毒核酸定量检测试剂盒（荧光PCR法）。

1．3结果判定抗HCV结果的判断根据厂家说明书检测初筛结果(S/Co)＞1为阳性；ALT结果大于40U/L为异常；HCV－RNA病毒载量检测结果以5．0×103IU/ml≤HCV RNA≤5．0×108IU/ml判断为阳性，直接报告定量结果；样本中病毒载量检测结果＞5．0×108IU/ml，判断为阳性，报告为＞5．0×108IU/ ml；样本中病毒载量检测结果＜5．0×103IU/ml，判断为阴性，报告为＜5．0×103IU/ml。

1．4统计学方法统计学处理采用SPSS 17．0对数据进行统计分析，计量资料用均值±标准差（x±s）表示，采用t检验，计数资料比较采用χ2检验，P＜0．05为差异有统计学意义。组率的比较采用χ2检验，抗HCV、HCV－RNA与ALT之间关系采用相关分析。

2 结果

2．1 HCV抗体检测不同区间值中HCV－RNA载量的阳性率比较将118例抗体阳性者按HCV抗体检测值由低到高排序，对118例HCV抗体阳性者的HCV抗体检测值在不同区间HCV－RNA检测阳性率进行统计分析，总阳性率为46．6%（55/ 118），不同HCV抗体检测值在不同区间HCVRNA检测阳性率不全相同，差异有统计学意义（χ2=62．745，P＜0．05），见表1。

2．2 HCV RNA含量与ALT检测结果分析在55例PCR检测结果呈阳性(HCV RNA＞103copies/ml)的样本中，有43例ALT结果异常，ALT异常率为78．1%（43/55）；按HCV RNA病毒载量将55例标本分成107～108、106、105、103～104和＜103copies/ml 5组，分析HCV RNA含量与ALT结果间的关系，发现：HCV RNA含量呈阳性的样本，其ALT异常率随着HCV RNA含量的增高而升高，即呈正相关(r=0．96，P＜0．01)。

表1 不同抗HCV抗体区间值中HCV-RNA载量阳性率比较

表2 HCV RNA含量与ALT检测结果分析

3 讨论

丙型肝炎是丙型肝炎病毒RNA经血液传播的一种病毒感染性疾病，它发病率虽低于乙型肝炎，但其危害远远高于乙型肝炎病毒感染。发病呈全球性流行，极易发展为慢性丙型肝炎，严重者会进一步转化为肝硬化或肝癌，对患者生命安全造成严重威胁，是欧美及日本等国家终末期肝病的最主要原因。因此，控制丙型肝炎只能从传染源和传播途径入手，早期准确诊断和发现HCV感染者就是防控丙型肝炎传染源、阻断传播途径最为有效的手段[4]。

人体感染HCV后抗－HCV一般15个月内可在病人血清中被检测到[5]，HCV抗体主要用于流行病学调查、丙肝感染患者的诊断筛查。HCV－RNA是HCV复制活跃的一项可靠指标，感染2周内即可检出[6]。HCV－R NA主要用于临床丙肝确诊以及治疗效果评估指标。目前临床常联合HCV抗体和丙肝病毒HCV－R NA定量检测以明确是否感染了丙肝病毒及实施治疗措施，HCV－R NA阳性(＞103copies/ ml）的患者可以直接作为HCV感染的有效证据，并且表明HCV病毒复制活跃具有一定传染性[7]。HCV-R NA比HCV抗体出现的时间更早，可作为丙肝感染的早期诊断和筛查，HCV-R NA阴性可作为患者治疗效果以及预后指标，HCV-R NA阴性表明患者经治疗后病毒被清除，传染性弱。本研究中118例丙肝抗体初筛阳性患者中，HCV RNA阳性率仅为为46.6%（55/118）可能主要的原因有：⑴由于自然界RNA降解酶存在导致HCV RNA降解而出现的假阴性；⑵患者采取过抗病毒治疗等因素有关，血清中HCV-RNA载量未达到最低检测量；⑶机体HCV病毒己被清除，HCV-RNA已为阴性，但HCV抗体持续存在一段时间[7-10]。综合分析本研究对象中118例HCV抗体阳性样本中不同HCV抗体检测值在不同区HCV-RNA检测阳性率不全相同，差异有统计学意义（χ2=62.745，P＜0.05），可能观察对象处于抗病毒治疗的患者，呈现HCV-RNA病毒载量检测阳性率不一致的现象。ALT主要存在于肝细胞的线粒体以及细胞质中，是肝细胞实质损害一个主要指标（参考值0～40IU/L），常联合其他多种指标用于肝功能临床诊断评估[11，12]。

在实际工作中我们发现，CIA方法自动化程度更强，操作更加简便，降低了操作人员感染的风险。HCV-RNA病毒载量的测定能更早期用于丙肝的诊断及抗病毒治疗的疗效判断，化学发光法检测血清HCV抗体诊断HCV与荧光PCR检测方法均可能存在假阳性或假阴性情况。临床实际应用中应联合HCV抗体及HCV-RNA病毒载量测定从可以降低丙肝感染的漏诊，同时联合ALT以反应肝细胞实质损害程度，为临床治疗丙肝提供有效的诊疗实验数据。

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R512．6+3，R446．62，R446．11+2

A

1674－1129(2017)02－0236－03

10．3969/j.issn.1674－1129．2017．02．031

2016-10-19；

2016-12-23)