儿童支气管哮喘患者血清骨桥蛋白和嗜酸细胞趋化因子表达及临床意义

兰芙蓉 陈文燕 王明章

儿童支气管哮喘患者血清骨桥蛋白和嗜酸细胞趋化因子表达及临床意义

兰芙蓉 陈文燕 王明章

目的 研究支气管哮喘患儿血清骨桥蛋白(OPN)和嗜酸细胞趋化因子(Eotaxin)的表达情况，探讨支气管哮喘发病机制。方法 89例支气管哮喘患儿为研究对象，观察急性期与缓解期血清骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子及嗜酸性粒细胞(Eos)的检测情况，以49例健康儿童为对照组。研究骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子与嗜酸性粒细胞的相关性。结果 支气管哮喘急性期、缓解期以及对照组三组骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子与嗜酸性粒细胞依次降低。组间差异均有统计学意义；支气管哮喘患儿骨桥蛋白(r=0.635)、嗜酸细胞趋化因子(r=0.678)与嗜酸性粒细胞均呈正相关。结论 骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子及嗜酸性粒细胞的研究于支气管哮喘发病机制的研究以及治疗均提供了一个新的角度，对支气管哮喘的防治有重要的临床价值。

支气管哮喘；骨桥蛋白；嗜酸性粒细胞；嗜酸细胞趋化因子

支气管哮喘为多炎性细胞及介质参与的气道慢性炎性疾病，可见于各年龄段。据有关资料统计[1]：在我国儿童支气管哮喘的发病率在3%-7.45%，疾病的反复发作引起气道重塑导致疾病的迁延性。支气管哮喘的发病机制尚未完全明确，变态反应、炎症以及气道的高反应性均被认为与支气管哮喘密切相关[2]。骨桥蛋白(OPN)为骨组织中一种基质蛋白，近年，研究显示其作为细胞因子在变态反应性疾病中作用是关键[3]。嗜酸细胞趋化因子为一类特异性地募集、趋化和活化嗜酸性粒细胞(Eos)的β-趋化因子。本研究着重于支气管哮喘患儿血清骨桥蛋白和嗜酸细胞趋化因子的表达情况，探讨骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子在支气管哮喘防治的临床应用价值。

资料与方法

一、一般资料及分组

89例支气管哮喘患儿来源于2013年1月至2016年1月我院儿科住院患者设为支气管哮喘组，男34例，女55例，年龄2-9岁，平均年龄(5.3±2.7)岁，诊断参考2008年中华医学会颁布的《儿童支气管哮喘诊断和防治指南》[4]，另选同期49例健康儿童为对照组，男19例，女30例，年龄2-9岁，平均年龄(5.5±2.5)岁，两组性别、年龄构成无统计学差异(P>0.05)，具有可比性。研究对象的选择，注意排除感染性疾病患者，受试者1月内无激素抗胆碱类、抗组胺类药物使用史，无严重内科疾患。受试者家属均签署知情同意书。

二、研究方法

对支气管哮喘患儿进行详细病史记录及体格检查，于患儿入院急性发作期空腹取血5mL检测骨桥蛋白、嗜酸性粒细胞及嗜酸细胞趋化因子，缓解期(临床缓解期系指经过治疗或未经治疗症状、体征消失，肺功能恢复到急性发作前水平，并维持3个月以上)空腹取血5mL复检骨桥蛋白、嗜酸性粒细胞及嗜酸细胞趋化因子，对照组空腹取血作相关检测。比较支气管哮喘患儿急性期、缓解期以及对照组三组骨桥蛋白、嗜酸性粒细胞及嗜酸细胞趋化因子的差异，研究骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子与嗜酸性粒细胞的相关性。

三、实验室检查

酶联免疫吸附法检测骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子，试剂盒由武汉博士德生物有限公司提供，严格按试剂说明书操作，全自动血细胞计数仪(东亚)检测嗜酸性粒细胞，试剂使用中山创艺产品，当日室内质控保证结果的有效性。

四、统计学处理

采用统计学软件SPSS19.0进行研究数据分析处理，多组均值比较采用方差分析，组间两两比较采用SNK法，pearson直线相关分析骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子与嗜酸性粒细胞相关性，以P<0.05有统计学意义。

结 果

一、三组骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子与嗜酸性粒细胞比较

支气管哮喘急性期、缓解期以及对照组三组骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子与嗜酸性粒细胞经方差分析均有统计学差异(P<0.05)，组间两两比较，经SNK法比较，也均有统计学差异(P<0.05)，气管哮喘急性期、缓解期以及对照组三组骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子与嗜酸性粒细胞依次降低。(见表1)。

表1 三组骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子与

注：与对照组比较：*P<0.05，与缓解期比较：#P<0.05，其他P>0.05

二、支气管哮喘患儿骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子与嗜酸性粒细胞的相关性分析

支气管哮喘患儿骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子与嗜酸性粒细胞经pearson直线相关性分析均呈正相关，均有统计学意义(P<0.05)，相关系数以嗜酸细胞趋化因子较高。(见表2)。

表2 支气管哮喘患儿骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子与

讨 论

支气管哮喘急性发作系指突然发生喘息、气促、咳嗽、胸闷等症状或原有症状急剧加重，伴呼吸困难，呼气流量降低，常因接触变应原、刺激物或呼吸道感染等因素诱发。支气管哮喘的发病机制尚未完全明确，有研究报导[5]：变态反应、气道慢性炎症、气道高反应性、气道神经调节失常、遗传机制、呼吸道病毒感染、神经信号转导机制和气道重构及其相互作用等因素均与支气管哮喘有关。嗜酸性粒细胞浸润为支气管哮喘的一大特点，研究发现嗜酸性粒细胞升高的程度与支气管哮喘严重程度呈正相关[6]。嗜酸性粒细胞大量沉积于气道上皮内，并释放诸如嗜酸性粒碱性蛋白及阳离子蛋白等多种效应分子介导气道上皮炎性损伤及重塑。骨桥蛋白具备细胞外基质蛋白及细胞因子特性，嗜酸细胞趋化因子在嗜酸性粒细胞募集与浸润上起重要的促进作用，各类细胞因子网络失衡被认为是支气管哮喘发病的基础[7]。研究骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子及与嗜酸性粒细胞的关系在支气管哮喘发病机制的探讨上有重要的临床意义。

研究数据显示：支气管哮喘患儿急性期血清骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子及嗜酸性粒细胞大幅升高，缓解期出现一定程度的降低但仍高于正常对照组，三组间差异具有统计学意义。相关性分析显示：支气管哮喘患儿骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子与嗜酸性粒细胞均呈正相关，相关系数以嗜酸细胞趋化因子较高。哮喘发病机制为超敏反应，动物实验显示[8]：变应原进入小鼠的致敏阶段，骨桥蛋白具有促炎作用而在激发阶段具有抗炎作用，激发阶段予以小鼠外源性骨桥蛋白会刺激嗜酸粒细胞的增多。Kohan[9]等研究发现：骨桥蛋白与气道平滑肌纤维化及气道重塑关系密切。骨桥蛋白上调IL-13、金属蛋白酶-9、血管内皮生长因子等表达促进平滑肌纤维化及新生血管的生成。部分难治性哮喘血清及痰液中均可检测到骨桥蛋白的高表达。糖皮质激素在支气管哮喘的治疗上疗效良好，其药理为减少机体骨桥蛋白mRNA的表达水平及促进嗜酸性粒细胞的凋亡[10]。嗜酸细胞趋化因子可选择性结合嗜酸粒细胞表面的趋化因子受体，促使嗜酸粒细胞向炎性聚集。研究人员在致敏小鼠模型注入抗嗜酸细胞趋化因子抗体可导致哮喘豚鼠肺泡灌洗液嗜酸粒细胞减少[11]。嗜酸细胞趋化因子被认为是反应支气管哮喘急性发作的客观指标[12]。研究数据符合上述观点，随着支气管哮喘急性期的缓解，血清骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子及嗜酸性粒细胞均出现不同程度的降低。数据说明骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子及嗜酸性粒细胞的升高一定程度反映了患儿支气管哮喘疾病病情。

综上所述，骨桥蛋白、嗜酸细胞趋化因子及嗜酸性粒细胞的研究，对支气管哮喘发病机制的研究以及治疗均提供了一个新的角度，对支气管哮喘的防治有重要的临床价值。

[1] Uchida M, Shiraishi H, Ohta S, et al. Periostin, a matricellular protein, plays a role in the induction of chemokines in pulmonary fibrosis[J]. Am J Respir Cell Mol Biol， 2012， 46(5): 677-686.

[2] Ontsuka K, Kotobuki Y, Shiraishi H, et al. Periostin, a matricellular protein, accelerates cutaneous wound repair by activating dermal fibroblasts[J]. Exp Dermatol， 2012，21(5): 331-336.

[3] Singh M, Foster CR, Dalal S, Singh K. Osteopontin: role in extracellular matrix deposition and myocardial remodeling post-MI[J]. J Mol Cell Cardiol, 2010,48(3): 538-543.

[4] 洪建国. 中国儿童支气管哮喘防治指南修订要点的探讨[J]. 临床儿科杂志, 2014, (2):101-103.

[5] Sidhu SS, Yuan S, Innes AL, et al. Roles of epithelial cell-derived periostin in TGF-beta activation, collagen production, and collagen gel elasticity in asthma[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2010,107(32): 14170-14175.

[6] Tischer C, Chen CM, Heinrich J. Association between domestic mould and mould components, and asthma and allergy in children: a systematic review[J]. Eur Respir J, 2011, 38(4): 812-824.

[7] 张永明, 林江涛, 苏楠,等. 支气管哮喘患者气道炎症表型研究[J]. 中华结核和呼吸杂志, 2015,38(5): 348-351.

[8] Puxeddu I, Berkman N, Ribatti D, et al. Osteopontin is expressed and functional in human eosinophils[J]. Allergy, 2010,65(2): 168-174.

[9] Kohan M, Breuer R, Berkman N. Osteopontin induces airway remodeling and lung fibroblast activation in a murine model of asthma[J]. Am J Respir Cell Mol Biol, 2009, 41(3): 290-296.

[10] Kurokawa M, Konno S, Matsukura S, et al. Effects of corticosteroids on osteopontin expression in a murine model of allergic asthma[J]. Int Arch Allergy Immunol, 2009,149(Suppl 1): 7-13.

[11] 朱述阳, 吕丽丽, 夏春伟,等. Eotaxin和CCR3在哮喘豚鼠肺和骨髓组织的表达及调控[J]. 细胞与分子免疫学杂志， 2007， 23(6): 543-545.

[12] 耿秀娟, 徐波, 李双拾,等. 支气管哮喘患者血清骨桥蛋白和嗜酸细胞趋化因子表达及临床意义[J]. 中国免疫学杂志， 2011， 27(1): 68-69.

Study on serum osteopontin and eotaxin expression in children with bronchial asthma and its clinical significance

LANFu-rong,CHENWen-yan,WANGMing-zhang

the404thHospitalofMianyang,Mianyang,Sichuan621000,China

Objective To study the expression of serum osteopontin (OPN) and eosinophil chemotactic factor (Eotaxin) in bronchial asthma children, and to explore the pathogenesis of bronchial asthma. Methods 89 patients with bronchial asthma were selected to observe the levels of serum osteopontin, eosinophil chemotaxis factor and eosinophil eosinophil (EOS) during acute and remission period. Another 49 healthy children were taken as the control group. The correlation between osteopontin and eosinophils eotaxin level and eosinophils was studied. Results The level of osteopontin (OPN), eosinophil chemotaxis factor and EOS decreased gradually in the acute group, the remission group and the control group. Osteopontin (r=0.552) and eosinophil chemotactic factor (r=0.678) were positively correlated with eosinophil eosinophil. Conclusion The detection of osteopontin, eosinophil chemotactic factor and eosinophile granulocyte provides a new point of view in the pathogenesis of bronchial asthma research and treatment, which has important clinical value on prevention and treatment of bronchial asthma.

asthma; osteopontin; eosinophil; eosinophil chemotactic factor

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.05.028

621000 四川 绵阳，绵阳四○四医院儿科

2016-09-27]