红毛七化学成分研究

刘新桥, 覃彬华, 原文珂，韩海燕

(中南民族大学 药学院，武汉 430074)

红毛七化学成分研究

刘新桥, 覃彬华, 原文珂，韩海燕

(中南民族大学 药学院，武汉 430074)

为研究红毛七根及其根茎的化学成分，采用常压硅胶柱色谱，葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、反相高效液相制备色谱对其进行了分离纯化，并且通过1H NMR和13C NMR波谱技术进行了结构鉴定.最终从乙酸乙酯层中分离出7个化合物，鉴定为升麻素 (1)、香兰素(2)、对羟基苯甲酸(3)、对羟基苯乙醇(4)、阿魏酸(5)、异阿魏酸(6)、obtucarbamate A(7)、其中化合物都1～7为首次分离得到.

小檗科；红毛七；化学成分

红毛七为小檗科红毛七属植物CaulophyllumrobustomMaxim，又名葳严仙、红毛三七、海椒七、鸡骨升麻、红毛细辛、搜山猫等[1]，药用部位为根及根茎，，主要分布于东北、陕西、浙江、湖北、四川、西藏等地，具有活血化瘀，祛风除湿，行气止痛之功效，常用于月经不调、痛经、产后血瘀腹痛、脘腹寒痛、跌打损伤、风湿痹痛[2].目前，国内相关文献报道已经从中分离得到生物碱、三萜皂苷、脂肪酸、甾醇等化学成分， 并且发现其有抗风湿、抗炎镇痛、抑菌、抗细胞毒、抗氧化以及抗肿瘤等活性[3，4].为了继续寻找红毛七中具有药用价值的生物活性成分，本实验对红毛七的化学成分进行了进一步研究，采用系统研究方法，对乙酸乙酯萃取部位进行化学成分分离和结构鉴定，得到7个化合物，分别鉴定为：升麻素 (1)、香兰素(2)、对羟基苯甲酸(3)、对羟基苯乙醇 (4)、阿魏酸(5)、异阿魏酸(6)、obtucarbamate A(7)、化合物1～7均为首次分离得到,结构见图1.

1 仪器和材料

1.1 仪器和试剂

Agilent 400 DD2型核磁共振波谱仪(美国Agilent公司)，Dionex UltiMate 3000型高效液相色谱仪(美国Dionex公司)，C18柱(250 mm×20 mm， 日本YMC公司)，柱色谱硅胶和薄层色谱硅胶(青岛海洋化工厂)，Sephadex LH-20 (Pharmacia)，二氯甲烷(天津富宇精细化工有限公司)，甲醇(国药集团化学试剂有限公司).红毛七于2015年7月采自湖北五峰县，经中南民族大学药学院刘新桥副教授鉴定为红毛七CaulophyllumrobustomMaxim，植物标本保存于中南民族大学药学院.

1)升麻素 ； 2)香兰素；3) 对羟基苯甲酸；4)对羟基苯乙醇;5) 阿魏酸； 6)异阿魏酸；7) obtucarbamate A

2 实验方法

2.1 提取与分离

取干燥红毛七根及根茎30 kg粉碎，用95%及60%乙醇渗漉提取，得到总浸膏，加水混悬，分别用石油醚，乙酸乙酯，水饱和的正丁醇萃取，得到乙酸乙酯部位410 g，通过常压硅胶柱色谱技术，采用石油醚︰乙酸乙酯︰甲醇体系体积比分别为：10∶1∶0，8∶1∶0，6∶1∶0，4∶1∶0，2∶1∶0，1∶1∶0，0∶1∶0，0∶95∶5，0∶9∶1，0∶8∶2，0∶4∶1，得到7个洗脱部分Fr.1～7.Fr.7经过Sephadex LH-20，氯仿-甲醇(1∶1)洗脱，得到2个组分Fr.a1～a2,Fr.a2用ODS-HPLC(40%甲醇)纯化得到化合物1(9.2 mg)，Fr.3经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇(99∶1-85∶15)梯度洗脱，得到9个组分Fr.3a～3l，Fr.3a经Sephadex LH-20，氯仿-甲醇(1∶1)洗脱得到3个组分Fr.3a1～3a3,Fr.3a3用ODS-HPLC(45%甲醇)纯化得到化合物2(3.4 mg)，Fr.3d经Sephadex LH-20，氯仿-甲醇(1∶1)洗脱得到3个组分Fr.3d1～3d3,Fr.3d3用ODS-HPLC(50%甲醇)纯化得到化合物7(5.6 mg)，Fr.3l经Sephadex LH-20，氯仿-甲醇(1∶1)洗脱得到3个组分Fr.3l1～3l3,Fr.3l3用ODS-HPLC(60%甲醇)纯化得到化合物3(13.1 mg)和4(4.6 mg) ，Fr.4经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇(99∶1-85∶15)梯度洗脱，得到8个组分Fr.4a～4h，Fr.4d经Sephadex LH-20，氯仿-甲醇(1∶1)洗脱得到3个组分Fr.4d1～4d3，Fr.4d3用ODS-HPLC(40%甲醇)纯化得到化合物5(4 mg)和6(30 mg).

2.2 结构鉴定

化合物1 白色结晶，1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 6.61 (1H, s, H-8), 6.23 (1H, s, H-3), 4.76 (1H, t,J= 8.6 Hz, H-2′), 4.44 (2H, s, -CH2OH), 3.93 ( 3H, s, -OCH3), 3.34 ( 2H, m, H-3′), 1.30 (3H, s, -CH3), 1.24 (3H, s, -CH3).13C NMR (101 MHz, CD3OD)δ: 179.9(C-4), 168.8(C-2), 167.2(C-5), 161.3(C-7), 157.1(C-8a), 118.6(C-6), 112.4(C-4a), 109.4(C-3), 94.6(C-8), 92.7(C-2′), 72.3(C-4′), 61.3(-CH2OH), 61.19(-OCH3),28.8(C-3′), 25.5(-CH3), 25.4(-CH3).以上波谱数据与文献[5]报道的cimifugin数据一致，故化合物1为升麻素.

化合物2 白色结晶，1H NMR (400 MHz, DMSO)δ：9.76 (1H , s , OH) , 7.41 (1H , dd ,J= 2.0, 8.0 Hz , H-6 ) , 7.38 (1H , d ,J= 2.0 Hz , H-5) , 6.95 (1H , d ,J= 8.0 Hz , H-2) , 3.83(3H , s , -OCH3) ,13C NMR (DMSO , 100 MHz)δ: 190.9 (-CHO) , 153.1 (C-4) , 148.1 (C-3) , 128.6(C-1) , 126.0(C-6) , 115.4 (C-5) , 110.7(C-2) , 55.5 (-OCH3) .以上波普数据与文献[6]报道的Vanillin数据一致，故化合物2为香兰素.

化合物3 白色结晶，1H NMR (400 MHz, DMSO)δ：7.78 (2H, d ,J=8.0, H-2,6) , 6.82 (2H , d ,J=8.0, H-3,5),13C NMR (100 MHz,

DMSO)δ:167.2(C-7), 161.5(C-4), 131.5(C-2,6), 121.5(C-1), 115.1(C-3,5).以上波普数据与文献[7]报道的p-hydroxybenzoic acid数据一致，故化合物3为对羟基苯甲酸.

化合物4 白色晶体，1H NMR (400 MHz, DMSO)δ: 9.15 (1H , s , OH ) , 6.98 ( 2H , d ,J= 8.0 Hz , H-2 , 6 ) , 6.65 ( 2H , d ,J= 8.0 Hz , H-3,5 ) , 4.58 (1H , s , -CH2OH) , 3.63 (2H , t ,J= 2.4 Hz , H-2′) , 2.87 (2H, t ,J= 2.4 Hz , H-1′) .13C NMR (DMSO , 100 MHz)δ: 155.4 (C-4) , 129.7(C-2,6) , 129.4 (C-1) , 114.9(C-3,5) , 62.6 (C-2′) , 38.3 (C-1′) .以上波普数据与文献[8]报道的Tyrosol数据一致，故化合物4为对羟基苯乙醇.

化合物5 白色针状结晶，1H NMR (400 MHz, DMSO)δ：7.48 (1H,d,J= 15.9 Hz, H-7), 7.27 (1H, d ,J= 1.7 Hz, H-2), 7.08 (1H, dd ,J= 8.2, 1.7 Hz, H-6), 6.79 (1H, d ,J= 8.0 Hz, H-5), 6.36 (1H, d ,J= 15.9 Hz, H-8), 3.81 (3H, s , OCH3).13C NMR (100 MHz, DMSO)δ:168.4(C-9), 149.5(C-3), 148.3(C-4), 144.9(C-7), 126.2(C-1), 123.2(C-6), 116.1(C-8), 115.9(C-5), 111.5(C-2), 56.1(-OCH3).以上数据与文献[9]报道的ferulic acid数据一致，故化合物5为阿魏酸.

化合物6 白色针状结晶，1H NMR (400 MHz, DMSO)δ： 6.24(1H,d,J= 15.9 Hz, H-2), 6.94 (1H, d ,J= 8.4 Hz, H-6′), 7.05 (1H, d ,J= 8.4 Hz, H-5′), 7.09(1H, d ,J= 2.1 Hz, H-2′), 7.44(1H, d ,J= 15.9 Hz, H-3), 3.80(3H, s , -OCH3).13C NMR (100 MHz, DMSO)δ:167.7(C-1), 149.8(C-4), 146.6(C-3′), 144.1(C-3),127.1(C-1′), 120.1(C-2), 116.3(C-6′), 114.1(C-5′), 111.9(C-2′), 55.6(-OCH3).以上数据与文献[10]报道的isferulic acid数据一致，故化合物6为异阿魏酸.

化合物7 白色结晶，1H NMR (400 MHz, DMSO)δ：9.55 (1H, s ,1-NH), 8.81 (1H, s, 3-NH), 7.49 (1H, s, H-2), 7.17 (1H, dd ,J=8.2, 1.7 Hz, H-6), 7.06 (1H, d ,J= 8.3 Hz, H-5), 3.64 (6H, s,2-OCH3),13CNMR (101MHz, DMSO)δ: 154.7(1-NHC=O), 153.9(3-NHC=O),137.2(C-1), 136.4(C-3), 130.2(C-5), 125.6(C-4), 115.0(C-6), 114.8(C-2), 51.6(-OCH3),51.5(-OCH3), 17.1(4-CH3).以上数据与文献[11]报道的obtucarbamate A数据一致，故化合物7为obtucarbamate A.

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Research on the Chemical Constituents ofCaulophyllumrobustomMaxim

LiuXinqiao,QinBinhua,YuanWenke,HanHaiyan

(School of Pharmacy, South-Central University for Nationalities, Wuhan 430074, China)

To study the chemical constituents ofCaulophyllumrobustomMaxim, the EtOAc extract of the roots and tubers of the plant were treated by repeated column chromatography with silica gel, Sephadex LH-20 and ODS-HPLC.The results indicated that seven compounds were isolated from the extract.The structures were identified by1H NMR and13C NMR as cimifugin(1), vanillin (2), p-hydroxybenzoic acid (3), Tyrosol (4),ferulic acid(5),isferulic acid(6)，obtucarbamate A(7), It was the first time to isolate compounds 1～7 fromCaulophyllumrobustomMaxim .

Berberidaceae；CaulophyllumrobustomMaxim;chemical constituents

2016-12-27

刘新桥(1978-)，男，副教授，研究方向：天然药物化学，E-mail: 296343430@qq.com

湖北省自然科学基金计划重点项目(创新群体)(2013CFA013)

O629；R284.1

A

1672-4321(2017)01-0061-03