CD4+、CD8+T细胞及IL-2、IL-6与急性分泌性中耳炎的关联性及临床意义研究

赵兴泉 钟渠

·实验研究·

CD4+、CD8+T细胞及IL-2、IL-6与急性分泌性中耳炎的关联性及临床意义研究

赵兴泉1钟渠1

目的 探究急性分泌性中耳炎患者外周血和中耳积液中CD4+、CD8+T细胞及细胞因子IL-2、IL-6活性特征。方法以我院收治的47例急性分泌性中耳炎患者为观察组，48例健康体检人群为对照组，对比分析两组外周血CD4+、CD8+T细胞百分比及IL-2、IL-4及IL-6水平及CD4+/CD8+与中耳积液IL-2、IL-6活性的相关性。结果观察组患者外周血CD4+、CD8+T细胞数值及CD4+/CD8+比值均显著高于对照组（P＜0.001）。血清IL-2、IL-4及IL-6水平组间比较比较无统计学意义（P＞0.05），但观察组患者中耳积液IL-2、IL-6水平显著高于两组研究对象外周血中的相应指标水平，且中耳积液IL-2、IL-6与患者外周血CD4+/CD8+比值呈正相关趋势，r分别为=0.431（P＜0.001）与0.462（P＜0.001）。结论急性分泌性中耳炎患者外周血CD4+、CD8+T细胞及中耳积液IL-2、IL-6水平显著升高，为本病发病机制研究提供了相关线索。

急性分泌性中耳炎；T细胞亚群；细胞因子；相关性；发病机制

分泌性中耳炎（secretory otitismedia，SOM）是耳鼻咽喉科常见的中耳非化脓性炎性疾病，多由于上呼吸道感染引起[1]，临床表现有听力下降、鼓室积液及耳鸣等症状，可分为急、慢性两种类型，易发于成年人和儿童[2]。急性分泌性中耳炎如不得到及时诊治，比较难治愈且易反复，后期症状加重可能会引起中耳粘连、鼓室硬化等并发症，甚至造成耳聋的风险[3]，严重影响患者的生活质量和健康。因此，急性分泌性中耳炎患者的早期筛查诊断及检测指标的选择就成为如今医学研究的方向。有研究发现，T淋巴细胞亚群在急性分泌性中耳炎患者体内发生异常[4]，IL-2具有免疫激活功能，IL-6可以参与机体感染的免疫调节[5]。所以本文旨在研究T淋巴细胞群中CD4＋、CD8＋细胞和细胞因子IL-2、IL-6在急性分泌性中耳炎患者外周血或中耳积液中的变化及临床意义。

材料与方法

1 研究对象

分析2014年11月～2016年2月在我院接治的47例急性分泌性中耳炎患者的临床资料，并列为观察组，其中男性25例，女性22例，年龄均值（41.32± 11.27）岁。同时选取48例在我院进行健康检查的人群作为对照组，其中20例男性，28例女性，年龄均值（40.51±11.05）岁。入选标准要求观察组患者均经耳鼻咽喉科医生按照症状标准，如耳鸣、耳痛、耳内闭塞感、听力下降等症状，经过鼓气耳镜或耳内镜检查，结合声导抗结果或鼓膜穿刺抽出液体诊断为急性分泌性中耳炎，且在2月内发病；对照组人群均经体检健康，同时两组均排除研究对象伴有肝肾功能不全、心律失常、糖尿病、恶性肿瘤及鼻咽新生异物等疾病；在具有可比性的常规资料比较上，两组研究对象差异比较均无意义（P＞0.05）。

2 检测方法

留取两组受试者5ml静脉血液，取其中2ml静脉血置于EDTA抗凝管混匀后待测，余下3m l进行离心取血清待测。观察组患者在同一医生的操作下，经鼓膜穿刺提取中耳积液0.3ml，要求在耳内镜下进行且避免穿刺血污染耳积液。采用美国贝克尔曼库尔特公司的FC500液式细胞仪、相应的抗体试剂及FACS溶血素，检测EDTA抗凝管血样的辅助细胞（CD4＋）和杀伤抑制细胞（CD8＋），并用贝克曼库尔特自带高效C×P电脑软件获取百分比数据；运用酶联免疫吸附法（ELISA）及相应试剂盒（上海酶联生物科技有限公司的mlb:0系列试剂的ml028590、ml028585、ml028583）检测余下血清及耳积液样本中白介素2（IL-2）、白介素4（IL-4）及白介素6（IL-6）水平。以上操作均按照试剂盒要求及样品检测说明下进行的。

3 观察指标

对比两组研究对象CD4＋、CD8＋T细胞百分比值及细胞因子（IL-2、IL-4及IL-6）水平；分析观察组患者外周血CD4＋/CD8＋与耳积液IL-2、IL-6的相关性。

4 统计学方法

结果

1 一般资料

95例研究对象中，观察组47例，对照组48例。两组研究对象在部分具有可比性资料上差异无意义，P＞0.05，见表1。

表1 两组一般资料

2 两组研究对象CD4＋、CD8＋T细胞检测结果比较

经分析得，观察组研究对象血清中T细胞CD4＋(t＝7.43，P＜0.001)、CD8＋(t＝6.11，P＜0.001)、及CD4＋/ CD8＋(t＝13.07，P＜0.001)百分比值均显著高于对照组，（P＜0.05），见表2。

表2 两组研究对象CD4＋、CD8＋T细胞检测结果比较（，%）

3两组研究对象细胞因子检测结果比较

经分析得，两组研究对象外周血中IL-2、IL-4及IL-6水平比较差异无统计学意义，（P＞0.05）；观察组患者中耳积液中IL-2、IL-6水平显著高于两组研究对象外周血水平，（P＜0.05），见表3。

表3 两组研究对象细胞因子检测结果比较（，pg/m l）

4 观察组患者外周血CD4＋/CD8＋与中耳积液IL-2及IL-6的相关分析比较

用Pearson检验相关性分析观察组IL-2、IL-6与CD4＋/CD8＋的相关性。结果可得，IL-2（r＝0.431, P＜0.001）及IL-6（r＝0.462，P＜0.001）与CD4＋/CD8＋呈正相关。详情如图1，2所示。

图1

图2

讨论

急性分泌性中耳炎是多因呼吸道感染、免疫反应等因素引起的耳鼻咽喉科常见病[6]，患者多表现出耳鸣、耳痛、听力下降等症状[7]，临床上常通过抗感染、改善鼓室通气引流、清理耳积液等方法给予患者治疗，但患者治疗过程中如不得到及时诊治，病情易反复或加重，逐渐发展有耳聋的可能[8]，对患者的身心健康带来损害。目前，急性分泌性中耳炎发病的原因和机制尚未有统一的理论说明，所以早期的预防和筛查就显得格外重要。因此，医学研究方向倾向于如何选择早期急性分泌性中耳炎的诊断指标。

有文献指出，急性分泌性中耳炎与机体免疫反应有关，过程中有T淋巴细胞亚群参与。CD4＋、CD8＋是T细胞免疫调节重要组成部分，CD4＋可以帮助T细胞生成抗体，CD8＋可以抑制T细胞增殖及抗体的合成[9]。细胞因子IL-2多由CD4＋细胞分泌生成[10]，IL-6具有急性期反应调节免疫作用[11]，两者都直接或间接地参与了机体免疫应答反应。因此，本文通过分析CD4＋、CD8＋和IL-2、IL-6在急性分泌性中耳炎患者外周血或中耳积液中的水平变化，来探究其临床意义。

本研究发现，观察组研究对象血清中CD4＋、CD8＋及CD4＋/CD8＋比值均显著高于对照组（P＜0.05），说明急性分泌性中耳炎患者机体发生了炎症感染反应，刺激了机体免疫功能应激反应，T细胞增殖及抗体合成分泌加快，因此CD4＋、CD8＋比值含量要高于正常人群。两组研究对象外周血中IL-2、IL-6水平比较差异无统计学意义（P＞0.05），但观察组患者中耳积液中IL-2、IL-6水平显著高于两组研究对象外周血水平（P＜0.05），说明IL-2、IL-6在外周血没有变化，但在中耳积液中产生应答，可能由于中耳黏膜与炎症因子发生了免疫反应，释放出前列腺素、白细胞因子等炎性介质，通过提高血管透性导致鼓室黏膜水肿，进而发展成中耳炎[12]。同时细胞因子IL-2、IL-6在患者中耳积液中高表达，导致炎症细胞不断迁移激活，可能是造成患者病情反复的因素[13]。用Pearson检验分析观察组患者耳积液IL-2、IL-6与外周血CD4+/CD8+的相关性得出，IL-2、IL-6与CD4+/CD8+呈正相关，说明患者中耳炎症感染侵袭引起免疫反应的CD4+、CD8+T细胞表达与细胞因子IL-2、IL-6作用同步，且存在平行上升趋势。

综上所述，急性分泌性中耳炎患者CD4+、CD8+细胞及IL-2、IL-6水平均存在高表达，且之间存在正相关，可以为临床的早期诊断提供参考指标，但由于本文研究的样本量有限，所得结论还有待进一步的研究。

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（收稿：2016-06-27）

Correlation of the numbers of CD4+and CD8+T cells,the levels of IL-2 and IL-6 with acute secretary otitismedia and their clinical im plications

ZHAO Xingquan,ZHONG Qu
Department of Otolaryngology,the Second Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College，the 404thHospital ofMianyang,Sichuan,621000,China

ObjectiveTo explore the characteristics of the numbers of CD4+and CD8+T cells,the levels of IL-2 and IL-6 in peripheral blood and in the effusion of middle ear among patients with acute secretary otitismedia.MethodsIncluded in this study were 47 cases with acute secretary otitismedia treated in our Hospital as the observation group(OG)and 40 healthy persons as control group(CG).Their blood sampleswere collected from peripheral venous vessels and effusion samples collected from middle ear to determine the numbers of CD4+and CD8+T,the levels of IL-2,IL-4 and IL-6 for a comparing analysis between the two groups to explore their correlations with the lesion ofmiddle ear among these patients.ResultsThe numbers of CD4+and CD8+T cells in peripheral blood were significantly higher in cases of OG than that of CG,with an obviously elevated ratio of CD4+/CD8+T cell values in OG,while no significantly statistical significance seen in the differences of IL-2,IL-4 and IL-6 levels between these 2 groups.However,the levels of IL-2 and IL-6 in effusion ofmiddle ear were significantly higher than that of peripheral blood among cases in either group.Furthermore,the levels of IL-2 and IL-6 in the effusion ofmiddle ear showed positive correlations with the ratio of CD4+/CD8+T cells in peripheral blood in OG,with r=0.431(P＜0.001)for IL-2 and r=0.462 for IL-6(P＜0.001)respectively.ConclusionsThe numbers of CD4+and CD8+T cells in peripheral blood and the levels of IL-2 and IL-6 in effusion ofmiddle ear are significantly elevated among caseswith acute secretary otitismedia.These factsmay provide significant clues for further study on the pathogenesis of such a lesion.

Acute secretary otitismedia;T cell subpopulations;Cytokines;Correlation;Pathogenesis

10.16542/j.cnki.issn.1007-4856.2017.01.001

1 川北医学院附属第二医院（四川绵阳四0四医院）耳鼻咽喉科（四川绵阳，621000）

钟渠，主任医师.Email:zhongqudu080@163.com