生物组织中糖类、脂肪和蛋白质检测鉴定的显色反应机理探究

陈科云

摘要：论文旨在做好生物组织有机化合物的显色反应原理，通过分析生物组织中糖类、脂类和蛋白质检测鉴定显色反应的机理，探讨了可溶性还原糖鉴定的反应原理，明确了蛋白质鉴定反应原理，在双缩脲试剂鉴定过程，实现肽键试剂的有效鉴定。在生物组织中糖类、脂肪和蛋白质检测鉴定的显色反应过程，还存在負反应，尤其是蛋白质鉴定过程，发生了蛋白质变性现象。在实验操作过程，结合还原糖以及蛋白质的有效鉴定，现配现用斐林试剂，做好生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的有效检测，也要合理掌握滴加夜的滴加量和滴加浓度，避免出现过量和过快的滴加过程，同时也要避免出现负反应。

关键词：生物组织；糖类；脂肪；蛋白质；显色反应；检测

G633.91

生物课程的教材改革越来越注重内容的创新，同时也要做好关键知识点的有效教学，对于生物组织中有机化合物的反应原理而言，更要分析三大有机化合物的显色反应过程，尽可能的确定糖类、脂肪和蛋白质检测中的不同显色反应机理，总结注意事项，综合提升生物知识储备能力。对于生物组织中糖类、脂肪和蛋白质检测鉴定的显色反应机理究竟如何始终是生物老师教学高度重视的一个问题+[1]。因此论文对生物组织中糖类、脂肪和蛋白质阿金侧鉴定的显色反应机理进行研究有一定的现实意义。

一、生物组织中糖类、脂肪和蛋白质检测鉴定的显色反应

糖类、脂肪和蛋白质作为生物组织中的三大有机化合物，糖类中的淀粉一旦遇到碘，将会呈现出蓝色，就可溶性还原糖而言，一旦和斐林试剂发生反应，有砖红色沉淀，同时脂肪和苏丹III反应，出现橘黄色的反应，和苏丹IV反应，出现红色。蛋白质一旦和双缩脲试剂发生反应，将会出现紫色反应，这种显色反应作用下，生物质中糖类可以进行有效的判定，同时也可以鉴定蛋白质和脂肪。

关于显色反应原理的探究，始终是生物界高度重视的一个焦点，在有机化合物的处理过程，结合多种有机化合物的反应原理，借助于多种试剂实现有效的显色反应处理，实现化合物的鉴定。关于染色剂的吸附显色过程，主要是做好还原性糖和蛋白质的有效鉴定过程，分析和试剂发生的作用，并结合显色现象，进而做好鉴定[2]。

基于可溶性还原糖鉴定的过程，确定类似反应原理，确定可溶性还原糖的结构，主要是可溶性还原糖存在醛基糖结构，同时也存在碱性果糖溶液和麦芽糖，葡萄糖和果糖作为同分异构体，而葡萄糖中一般有醛基，但是果糖具有酮基并没有醛基，溶液稀释的过程，出现了互变异构。

稀碱溶液用果糖稀释的过程，出现了还原性的反应，同时还原性糖常伴有醛基反应，在和斐林试剂反应的时候，氢氧化铜和可溶性还原糖出现了氧化还原反应，而蓝色氢氧化铜也伴有砖红色氧化亚铜，这一反应的进行，还原糖存在。

脂肪鉴定的过程，苏丹III一旦融入脂肪，溶解度比较大，脂肪生物组织得到有效的处理，同时对于酒精中的苏丹III而言，和脂肪发生反应，脂肪呈现出橘黄色。关于蛋白质的鉴定过程，主要是确定双缩脲的试剂成分，确定氢氧化钠溶液以及质量浓度，进而实现硫酸铜溶液的分析，在碱性溶液作用下，往往和铜离子发生反应，并伴有紫红色络合物沉淀。

关于蛋白质鉴定的一种反应原理而言，主要是结合蛋白质鉴定的试剂，并借助于双缩脲实际确定蛋白质显色反应，双缩脲分子一旦发生缩合反应，将会失去一分子氨，分子中和蛋白质一样存在肽键，同时碱性溶液作用下，出现了大量的化学反应，并出现了紫色铜离子罗何物，基于肽键和物质反应过程，常伴有紫色铜离子络合物，这一反应过程中需要分析生物组织蛋白质的存在。

二、 生物组织中糖类、脂肪和蛋白质检测鉴定可能存在的负反应

基于生物组织中糖类、脂肪和蛋白质检测鉴定中的问题分析，就要做好苹果组织样液的加热过程，一旦加入斐林试剂之后，将会出现受热现象，黑色沉淀逐步产生，斐林试剂也伴有黑色沉淀，主要是氢氧化铜逐步的分解了氧化铜，在砖红色沉淀之后，也出现了变黑的现象，也即是氧化了氧化亚铜，进而出现了氧化铜[3]。鉴定蛋白质的时候，需要做好蛋清液的稀释工作，逐步的滴加硫酸铜，乳白色沉淀逐步产生，在重金属盐出现变性之后，变小了实际的溶解度，同时实验也伴有蛋白质的变性，这种蛋白质变性不仅仅和温度有关，同时也和碱性强度有着直接的关联，一旦过强受热和过强碱性，都会导致蛋白质变性[4]。鉴定蛋白质的时候，需要控制硫酸铜的滴加速度，一旦有过量和过快的滴加速度，蓝色沉淀产生，硫酸铜和氢氧化钠出现了蓝色氢氧化铜沉淀。

三、生物组织中糖类、脂肪和蛋白质检测鉴定的相关注意事项

还原糖和蛋白质鉴定阶段，就要避免出现负反应，保证有着规范化的操作。关于斐林试剂的使用，需要本着现配现用的基本原则，在斐林试剂以及苹果组织样液混合之后，实现充分的加热处理。

蛋清液的稀释之后，可以使用蒸馏水，避免蛋清液的加热，同时鉴定的过程，避免滴加硫酸铜，需要充分均匀氢氧化钠溶液，在硫酸铜滴加之后，避免有过快的滴加速度，进行边滴加边振荡的过程。而硫酸铜溶液一旦为0.05g/mL时，就要滴加2滴左右，硫酸铜溶液的浓度为0.05g/mL事，就要滴加4滴左右。关于氢氧化钠浓度而言，避免浓度的过大，确定氢氧化钠的低浓度添加。

总而言之，生物组织中糖类、脂肪和蛋白质检测鉴定时，就要分析三大有机物的反应过程，做好糖类、脂肪和蛋白质检测鉴定的显色原理分析，合理使用滴加夜，并结合不同化合物的基本反应要求，避免出现负反应。鉴定蛋白质的时候，需要做好蛋清液的稀释工作，逐步的滴加硫酸铜，乳白色沉淀逐步产生。蛋白质的鉴定过程，主要是确定双缩脲的试剂成分，确定氢氧化钠溶液以及质量浓度，进而实现硫酸铜溶液的分析。对于斐林试剂的使用，需要本着现配现用的基本原则，在斐林试剂以及苹果组织样液混合之后，实现充分的加热处理。

参考文献：

[1]郑琦琦，吴坚.基于NO2-显色反应的抗湿性喷雾雾滴密度和大小的检测体系[J].农业工程学报，2015，04（3）：107-112.

[2]潘斌.高中生物学实验中的显色反应释疑[J].生物学教学，2015，40（11）：42-43.

[3]王子武，孙海荣.生物组织中几种有机化合物的定量检测[J].生物学教学，2016，41（5）：65-65，66.

[4]孙鹏飞，高献礼，闫爽等.酱油二次沉淀蛋白质的分离、鉴定及氨基酸分析[J].食品工业科技，2014，35（5）：87-90.