基层兽医检测实验室血凝与血凝抑制试验的一些经验

2017-04-04刘晓云山东省邹平县畜牧兽医局256200

山东畜牧兽医 2017年6期

刘晓云（山东省邹平县畜牧兽医局 256200）

刘晓云（山东省邹平县畜牧兽医局 256200）

近年来，基层兽医实验室作为动物疫病预防与控制工作的重要技术支撑，在动物疫病预防控制，特别是重大动物疫情预防控制工作中发挥着重要作用。血凝和血凝抑制试验是目前基层兽医检测实验室开展疫病诊断、流行病学调查、免疫程序制定及免疫效果监测等的主要试验方法之一。在工作中常用于检测禽流感，新城疫的免疫和非免疫抗体水平。

笔者根据自己在基层兽医实验室开展血凝与血凝抑制试验时遇到的问题，总结了以下几点经验。

1 鸡红细胞的采集制取工作

受条件所限，基层实验室中往往缺乏spf鸡，在采集鸡全血时可选择健康公鸡。翅静脉采血及心脏采血皆可。洗红细胞时，应使用生理盐水或pH为7.4的PBS液多洗涤几次。每次洗涤离心完成后，应用吸管吸取压积红细胞上层的白细胞和上清洗涤液。更换洗涤液后应摇匀沉淀在底部的红细胞，防止多次离心后结块。在离心及吸取液体时应注意轻拿轻放，防止红细胞破裂。制取完毕的1%红细胞悬浊液应放在4℃冰箱中保存，用时摇匀。保存时间不宜超过48h，防止溶血，干扰实验结果。

2 实验过程中的振荡摇匀

血凝与血凝抑制试验中需要三次对血凝板微量振荡。第1次，血凝试验中加入红细胞后振荡，振荡必须完全。第2次，待检血清与4HAU病毒抗原混合，振荡必须完全。第3次，是抗原抗体反应完成后加入红细胞，此时振荡不可时间过长，容易导致抗原抗体结合物分离。在使用一次性塑料血凝板的时候，由于一次性塑料血凝板比较脆弱难以固定，振荡过程中液滴容易飞溅出来。可使用手托住一次性塑料血凝板，手背接触微量振荡器进行振荡摇匀。