结肠高分化腺癌中肝细胞生长因子和间质表皮转化因子表达与增殖指数的关系

毛 东 于江文 陆 航

(锦州医科大学附属第一医院普外科，辽宁 锦州 121001)

结肠高分化腺癌中肝细胞生长因子和间质表皮转化因子表达与增殖指数的关系

毛 东 于江文 陆 航

(锦州医科大学附属第一医院普外科，辽宁 锦州 121001)

目的 探讨结肠高分化腺癌中肝细胞生长因子(HGF)和间质表皮转化因子(C-met)的表达及其与肿瘤细胞增殖指数的关系。方法 78例结肠高分化腺癌组织作为观察组，结肠非肿瘤性黏膜组织21例作为对照组，应用免疫组化方法检测两组HGF、C-met和Ki67的表达。结果 观察组HGF、C-met和Ki67表达的阳性率明显高于对照组，且三者表达均与肿瘤的最大径、浸润深度密切相关，HGF和C-met的表达均与肿瘤的淋巴结转移密切相关。相关分析显示HGF、C-met和Ki67之间均呈正相关。结论 结肠高分化腺癌中HGF/C-met高表达与肿瘤生长及浸润有关，二者可以促进肿瘤细胞的增殖作用。

结肠；高分化腺癌；肝细胞生长因子(HGF)；间质表皮转化因子(C-met)；Ki67

遗传易感因素、基因和蛋白的表达失调是结肠癌病变的重要促进因素〔1，2〕，结肠腺癌中高分化腺癌多见，其与低分化腺癌相比，细胞异型性小，腺管结构存在，预后相对好。结肠高分化腺癌是高增殖性肿瘤，肿瘤增生活跃。间质表皮转化因子(C-met)是一种具有酪氨酸激酶活性的跨膜蛋白，是肝细胞生长因子(HGF)的特异性受体，二者可能具有协同作用，能在多个通路的角度调节肿瘤的发生和进展〔3，4〕。本文对结肠高分化腺癌患者术后肿瘤组织中HGF、C-met和Ki67蛋白的表达进行检测，探讨其临床意义及相关性。

1 材料和方法

1.1 一般资料 2013年1月至2015年6月我院结肠高分化腺癌的患者78例作为观察组，留取术后石蜡包埋的组织，其中男41例，女37例，年龄40～84岁，平均57.3岁。均经病理医师确诊，并符合WHO中的诊断标准。选择上述患者术后标本中距肿物边缘>3 cm的非肿瘤性结肠黏膜组织21例作为对照组，其中男11例，女10例，年龄42～80岁，平均57.6岁。两组性别、年龄无明显差异。

1.2 HGF、C-met和Ki67的检测方法 两组术后标本中HGF、C-met和Ki67的检测均基于石蜡包埋的组织。三种蛋白的检测均应用免疫组化SP法，二氨基联苯胺(DAB)显色，严格按说明书手工进行操作，减少误差。

1.3 HGF、C-met和Ki67的判断标准 HGF、C-met的表达部位是细胞质和(或)细胞膜，Ki67的表达部位是细胞核，以出现淡黄色-棕褐色颗粒为阳性。选择上皮细胞集中且染色较为明显的区域进行观察，共选择5个400倍视野的热点区进行观察，计算阳性率，取平均值。HGF、C-met以<10%为阴性，≥10%阳性。Ki67以<25%为阴性，≥25%阳性。

1.4 统计学方法 应用SAS6.12软件进行χ2检验和线性相关分析。

2 结 果

2.1 两组HGF、C-met和Ki67阳性率的比较 两组HGF、C-met和Ki67的阳性率有统计学差异。见表1。

表1 二组中HGF、C-met和Ki67阳性率的比较〔n(%)〕

2.2 观察组HGF、C-met和Ki67在不同临床特征中的比较 观察组中HGF、C-met和Ki67的表达均与肿瘤的最大径、浸润深度密切相关，HGF和C-met的表达均与肿瘤的淋巴结转移密切相关。见表2。

表2 观察组HGF、C-met和Ki67在不同临床 特征中比较〔n(%)〕

2.3 观察组中HGF、C-met和Ki67的相关性 HGF和C-met(r=0.54，P=0.012 3)、HGF和Ki67(r=0.49，P=0.034 1)、C-met和Ki67(r=0.51，P=0.026 1)表达具有正相关性。

3 讨 论

结肠腺癌中最常见的是高分化腺癌，虽然分化好作为肿瘤预后好的标志，但是临床中并不全是这样，肿瘤的其他生物学行为如侵袭、转移等因素可能对判断临床状态更有价值〔5，6〕。在病变进展中，蛋白表达可以出现明显异常。Ki67的表达可以标记肿瘤的增殖状态，即Ki67高表达的肿瘤增殖活性高，细胞生长快。HGF位于人类第7号染色体长臂(7q21.1)，大小约70 kb，包括18个外显子和17个内含子，其前体部分是由728个氨基酸残基组成的单链，HGF的活性形式主要是与蛋白酶的水解有关〔7，8〕。C-met属于受体酪氨酸激酶超家族的成员，为原癌基因MET编码的一类具有自主磷酸化活性的跨膜受体，其编码基因位于7号染色体q31区，大小约110 kb，包括21个外显子。目前C-met是HGF的特异性受体，因此二者可能有一定的协同作用〔9，10〕。在正常生理条件下，HGF和C-met形成有效的结合后，可以使上皮细胞间的连接松散，尤其是肿瘤细胞的黏附性下降，而易于离开原发灶，此时细胞的运动性增强，细胞易于迁移，转移潜能升高〔11，12〕。张瑞涛等〔13〕观察HGF、C-met在卵巢上皮性癌中的表达，发现二者在肿瘤中高表达，认为HGF、C-met高表达可能协同参与卵巢上皮性癌的恶性进展。刘崇梅等〔14〕通过在鼻咽癌中观察HGF、C-met的表达与细胞增殖的关系，发现HGF、C-met与增殖细胞核抗原的表达呈正相关，认为HGF、C-met可以促进肿瘤细胞的增殖。

本实验结果提示HGF、C-met和Ki67在肿瘤形成过程中有重要促进作用。HGF和C-met可以促进肿瘤细胞增殖，使肿瘤细胞体积增大，肿瘤生长活跃，肿瘤细胞增生明显，肿瘤侵袭性增强〔15，16〕。本文结果提示HGF、C-met高表达是肿瘤进展的重要促进因素。HGF、C-met与转移的关系提示二者高表达时肿瘤处于高转移状态，此时在临床及病理诊断中对淋巴结及远隔器官进行检查是必要的。也有研究认为二者促进肿瘤转移的作用是通过调节其他转移相关蛋白实现的〔12〕。研究显示HGF/C-met信号转导通路可以下调E-cadherin蛋白的表达，对肿瘤的黏附作用进行调控〔17〕。HGF/C-met可以激活蛋白激酶结构域中酪氨酸激酶(PTK)，使丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化，使尿激酶纤溶酶原表达上调，促进细胞分泌基质金属蛋白酶，使细胞外基质降解，对肿瘤的侵袭和转移起促进作用〔18〕。也有研究认为二者可以促进间质的血管内皮细胞增生，使间质的血供丰富，为肿瘤组织生长提供必要的营养〔19〕。

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13 张瑞涛，史惠蓉，黄好亮，等.MACC1、HGF和C-met蛋白在卵巢上皮性癌中的表达及其意义〔J〕.南方医科大学学报，2011；31(9)：1551-3.

14 刘崇梅，于惠芝，林明晖，等.HGF/C-met系统在鼻咽癌中的表达及其与增殖细胞核抗原的关系〔J〕.现代肿瘤医学，2009；17(11)：2087-9.

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〔2015-06-07修回〕

(编辑 杜 娟)

陆 航(1975-)，男，博士，副主任医师，主要从事普外科疾病研究。

毛 东(1982-)，男，硕士，主治医师，主要从事普外科疾病研究。

R737

A

1005-9202(2017)04-0918-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.04.060