老年高血压患者血清钙结合蛋白复合物的影响因素及其与颈动脉内膜中层厚度的关系

赵国玉 李梦媛 崔 川 耿学斌

(唐山工人医院心血管内科，河北 唐山 063000)

老年高血压患者血清钙结合蛋白复合物的影响因素及其与颈动脉内膜中层厚度的关系

赵国玉 李梦媛 崔 川 耿学斌

(唐山工人医院心血管内科，河北 唐山 063000)

目的 探讨老年高血压患者血清钙结合蛋白复合物S100A8/A9的表达水平及其影响因素，分析其与颈动脉粥样硬化之间的关系。方法 选取90例老年高血压患者为高血压组，同时期50名健康体检者为对照组，采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清S100A8/A9水平，同时所有受试者清晨空腹检测白细胞(WBC)计数、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、血糖(FBG)、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、糖化血红蛋白(HbA1c)，应用彩色多普勒超声检查仪测定颈动脉内膜中层厚度(IMT)，分析不同分组中S100A8/A9水平与其他临床指标的相关性，采用Logistic 回归分析S100A8/A9水平和IMT的影响因素。结果 高血压组hs-CRP、UA、IMT、S100A8/A9显著高于对照组(P<0.05或0.01)；相关分析表明，S100A8/A9表达水平分别与WBC(r=0.236，P=0.047)、hs-CRP(r=0.325，P=0.001)、UA(r=0.182，P=0.035)、IMT(r=0.984，P=0.000)呈正相关。随着血压水平的增高，IMT逐步增加，S100A8/A9水平明显升高(P<0.05或0.01)。IMT增厚组血清S100A8/A9水平较正常组明显增高(P<0.05)，IMT斑块组血清S100A8/A9水平明显高于IMT正常组和IMT增厚组(P<0.05)；Logistic 回归分析显示hs-CRP、UA、IMT是血清S100A8/A9水平的影响因素。IMT的影响因素有年龄、hs-CRP、TC、UA、S100A8/A9。结论 血清钙结合蛋白复合物S100A8/A9水平与高血压患者颈动脉粥样硬化密切相关。

S100A8/A9；颈动脉内膜中层厚度；动脉粥样硬化；高血压

高血压是动脉粥样硬化(AS)形成的重要危险因素，AS主要累及大中型动脉，颈动脉内膜中层厚度(IMT)增加是AS早期改变的标志。其中炎症因子及炎症反应参与了AS的进展。近来研究表明，血清钙结合蛋白复合物S100A8/A9作为炎症因子参与了AS的病理过程〔1〕。本研究通过分析老年高血压患者血清钙结合蛋白复合物S100A8/A9的表达水平及其影响因素，以及S100A8/A9与颈动脉IMT之间的关系，为S100A8/A9在老年高血压患者AS形成中的作用提供一定的理论依据。

1 材料与方法

1.1 临床资料 选取2013年4月至2015年1月在我院心血管内科住院治疗的高血压患者90例，均符合高血压的诊断标准〔2〕。男48例，女42例，年龄61～84岁，平均(65.4±6.3)岁；高血压病1级18例，2级30例，3级42例。排除急性冠脉综合征、继发性高血压、痛风、糖尿病和各种急慢性炎症、免疫系统疾病、肿瘤及多脏器功能不全等疾病的患者。选取同时期健康体检者50例为正常对照组，男30名，女20名，年龄60～75岁，平均(63.2±4.8)岁，无肝肾疾病、高血压、心脑血管疾病、恶性肿瘤、近期无感染病史的患者。研究方案获得医院伦理委员会批准并取得患者知情同意书。两组对象之间性别、年龄构成均无明显差异(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 颈动脉超声检查 采用美国GE公司LOGIQ9彩色多普勒超声诊断仪，周围血管探头频率为7.5 MHz。所有观察对象均由固定专职超声科医师操作。观察双侧颈动脉内膜中层的形态、结构及回声变化。在颈动脉分叉处近端后壁1.5 cm处测量颈动脉IMT值，测3次取其平均值。颈动脉硬化判断标准〔3〕：年龄>60岁、动脉内膜光滑且IMT<0.85 mm为正常颈动脉，高于该年龄段正常值被判定为颈动脉内膜中层增厚，动脉内膜局限性隆起且IMT≥1.3 mm为AS斑块形成。

1.2.2 标本采集与检测 早晨空腹采集受试者静脉血6 ml，3 000 r/min，离心10 min，分离血清，-70℃冰箱保存待测。常规检测白细胞(WBC)计数、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、血糖(FPG)、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、糖化血红蛋白(HbA1c)，上述检测项目均由我院检验科专业人员完成。钙结合蛋白S100A8/A9复合物ELISA检测试剂盒(美国R&D公司)，严格按照试剂盒操作说明书进行。

1.3 统计学分析 采用SPSS18.0软件，计数资料采用χ2检验，计量资料组间比较采用非配对t检验，各指标之间的相关分析采用Spearman相关分析。在各指标基础上选择S100A8/A9和IMT进行多因素Logistic 回归分析。

2 结 果

2.1 临床资料比较 高血压组年龄、性别、体重指数(BMI)、吸烟、WBC、FPG、血脂、UA、HbA1c等指标与对照组比较无统计学意义(P>0.05)，高血压组hs-CRP、UA、IMT、S100A8/A9显著高于对照组(P<0.05或0.01)，见表1。

2.2 S100A8/A9水平与其他指标的相关性分析 S100A8/A9水平分别与WBC(r=0.236，P=0.047)、hs-CRP(r=0.325，P=0.001)、UA(r=0.182，P=0.035)、IMT(r=0.984，P=0.000)呈正相关，与其他指标无明显相关(P>0.05)。

2.3 不同分级高血压患者S100A8/A9水平及IMT的变化 随着血压水平增高，IMT逐步增加，S100A8/A9水平明显升高(P<0.05或0.01)，见表2。

表1 两组受试者临床资料比较±s)

表2 不同分级高血压患者S100A8/A9水平及IMT比较

2.4 不同IMT与血清S100A8/A9水平的比较 在高血压患者不同IMT分组中，IMT增厚组血清S100A8/A9水平〔(7.83±2.12)μg/ml〕较IMT正常组〔(5.32±1.63)μg/ml〕明显增高(P<0.05)，IMT斑块组血清S100A8/A9水平〔(9.44±2.56)μg/ml〕明显高于IMT正常组和IMT增厚组(P<0.05)。

2.5 IMT与相关影响因素的Logistic回归分析 以IMT为因变量，对年龄、WBC、hs-CRP、FPG、UA、TC、TG、HDL-C、LDL-C、HbA1c、S100A8/A9进行多因素Logistic回归分析。结果显示，影响IMT的因素有年龄、hs-CRP、TC、UA、S100A8/A9(P<0.05)，见表3。

2.6 S100A8/A9与相关影响因素的Logistic回归分析 以S100A8/A9为因变量，以WBC、hs-CRP、UA、IMT为自变量，进行Logistic多元回归分析。结果显示，影响S100A8/A9的因素有hs-CRP、UA、IMT(P<0.05)，见表4。

表3 高血压患者IMT的Logistic回归分析结果

表4 高血压患者S100A8/A9的Logistic回归分析结果

3 讨 论

AS是一个慢性炎症过程。研究发现，晚期糖基化终末产物受体(RAGE)作为细胞表面分子免疫球蛋白超家族跨膜受体的成员之一，通过与多种配体结合，激活Ras、NF-κB等基因，影响细胞信号转导途径，参与炎症、AS、冠心病等疾病的进展〔4，5〕。由此推测，阻断RAGE与配体的结合，对于上述疾病的防治具有重要意义。

S100钙结合蛋白是RAGE的配体之一，S100A8和S100A9作为S100钙结合蛋白家族的重要成员，参与细胞迁移、花生四烯酸代谢等生物学过程。S100A8/A9是在缺少Ca2+的情况下，S100A8与S100A9结合形成的异源二聚体。研究发现，S100A8/A9参与RAGE信号转导，激活NK细胞，有可能是体内炎症与先天免疫之间相互作用的一个新思路〔6〕。S100A8/A9在多种炎症性、自身免疫性疾病及肿瘤，如骨关节炎、肾小球肾炎、肝细胞癌等疾病异常增高，是潜在的临床炎症标志物〔7，8〕。临床研究发现，2型糖尿病患者S100A8/A9表达升高，与慢性炎症有关，在AS形成过程中起到重要的作用〔9〕。S100A8/A9、MMP-2在急性冠脉综合征患者中呈高表达，可能与AS斑块形成有关。联合检测血清S100A8/A9、MMP-2可能成为一种有效的预测急性心血管事件发生的临床指标〔10〕。S100A8/A9通过与RAGE结合，激活炎症转录因子NF-κB，上调ICAM-1、IL-6、IL-10、IFN-γ等基因转录，促进炎性细胞吸附聚集，破坏内皮细胞功能，从而促进AS〔11，12〕。

本研究结果显示，在高血压患者中S100A8/A9较正常人群明显增高，S100A8/A9表达水平与WBC、hs-CRP、UA呈正相关。分析其原因，可能与S100A8/A9作为促炎症因子，主要是由巨噬细胞和中性粒细胞分泌，炎症反应越强，hs-CRP越高，而UA升高会导致内皮细胞炎症反应，线粒体Ca2+稳态失衡在内皮细胞炎症反应中起到一定的作用。进一步行Logistic回归分析结果说明S100A8/A9水平与炎症反应及AS有着密切的关系。

高血压是AS的独立危险因素。早期的研究发现，在冠状动脉粥样硬化部位有大量的S100A8/A9表达，从而证实S100A8/A9积极参与了AS的进程〔13〕。此外，本研究进一步发现，随着血压水平的增高，IMT逐步增加，S100A8/A9水平明显升高。AS是高血压、炎症、血脂异常、高尿酸血症等多种危险因素造成的，并且随着年龄的增加而加重。TC和LDL-C是AS的危险因素，但本研究结果未显示颈动脉IMT与LDL-C之间的相关性，可能与样本量较少有关，需要进行大样本的研究。

1 Engelberger RP，Limacher A，Kucher N，etal.Biological variation of established and novel biomarkers for atherosclerosis：results from a prospective，parallel-group cohort study〔J〕.Clin Chim Acta，2015；447(1)：16-22.

2 陆再英，钟南山.内科学〔M〕.第7版.北京：人民卫生出版社，2008：251-7.

3 中国社工协会康复医学工作委员会血管专业委员会，国际血管健康学会中国分会，北京大学首钢医院血管医学中心，等.中国血管病变早期检测技术应用指南(2011第二次报告)〔J〕.心血管病学进展，2011；32(3)：318-23.

4 曾一梅，刘宏眉.RAGE、sRAGE与冠心病的关系〔J〕.医学综述，2013；19(3)：403-6.

5 权 萍，肖成华，牟英峰.配体-RAGE_sRAGE与动脉粥样硬化的关系〔J〕.中国实用神经疾病杂志，2013；16(9)：89-91.

6 Narumi K，Miyakawa R，Ueda R，etal.Proinflammatory proteins S100A8/S100A9 activate NK cells via interaction with RAGE〔J〕.J Immunol，2015；194(11)：5539-48.

7 Pepper RJ，Wang HH，Rajakaruna GK，etal.S100A8/A9 (calprotectin) is critical for development of glomerulonephritis and promotes inflammatory leukocyte-renal cell interactions〔J〕.Am J Pathol，2015；185(5)：1264-74.

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10 戴贵军，孙建辉，白江涛.血清S100A8/A9、MMP-2水平变化与急性冠状动脉综合征的关系〔J〕.实用医学杂志，2010；26(24)：4528-31.

11 Hirata A，Kishida K，Nakatsuji H，etal.High serum S100A8/A9 levels and high cardiovascular complication rate in type 2 diabetics with ultrasonographic low carotid plaque density〔J〕.Diabetes Res Clin Pract，2012；97(1)：82-90.

12 Fontaine M，Planel S，Peronnet E，etal.S100A8/A9 mRNA induction in an ex vivo model of endotoxin tolerance：roles of IL-10 and IFNγ〔J〕.PLoS One，2014；9(6)：e100909.

13 Altwegg LA，Neidhart M，Hersberger M，etal.Myeloid-related protein 8/14 complex is released by monocytes and granulocytes at the site fo coronary occlusion：a novel，early，and sensitive marker of acute coronary syndromes〔J〕.Eur Heart J，2007;28(8)：941-8.

〔2015-12-17修回〕

(编辑 徐 杰)

李梦媛(1987-)，女，主治医师，主要从事心血管内科及冠心病研究。

赵国玉(1973-)，女，主治医师，主要从事心血管内科及冠心病研究。

R54

A

1005-9202(2017)04-0858-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.04.033