重金属污染物免疫学检测技术研究进展探究
2017-03-15向东
向东
湖北三峡职业技术学院 湖北宜昌 443000
重金属污染物免疫学检测技术研究进展探究
向东
湖北三峡职业技术学院 湖北宜昌 443000
免疫学检测技术是一项新兴检测技术,跟传统检测技术比较,更具灵敏性及高速性,同时便于携带方便、成本低以及适用于现场迅速检测。文章即将介绍最近的重金属污染物免疫学检测技术,进而对该技术的实际运用及发展前景进行探究。
重金属;污染物;免疫学检测技术
铜和锌等重金属作为生命活动中必要的微量元素,但是摄入太多会危及身体健康,铅、汞、以及锅等重金属并不是生命活动中需要的元素,若超过相应的浓度,则会对机体的健康构成威胁。通常重金属污染存在诸多特征,如来源多、较强隐蔽性、迁移性不大、毒性强、化学行为与生态效应呈现复杂性…无论是环境,还是食物及物品,一定含有超量的重金,会经过食物链、呼吸以及表面接触,来对人体进行毒害,同时凭借一些迁移形式进入到大气和水体中。大部分重金属的毒性来源自身的物理化学形态,根据单克隆抗体制备,还有免疫学检测技术能够对以某种形式呈现的重金属离子进行检测,便于在环境与食品样品检测重金属中,创造定量或者半定量的有效检测方法。
一、重金属污染物免疫学检测技术
(一)酶联免疫吸附反应方法
酶联免疫吸附反应方法,主要结合了酶催化作用和抗原抗体特异性免疫反应,属于一项结合型检测技术。该技术具有诸多优点,如特异性更强、灵敏度更高、操做简单便捷、非常易携带、高效准确性,并且能对大量的样品进行检测。在操作该项技术中,通常不需采用贵重的仪器设施。融合 ELISA技术,属于实验室常规检测技术,不要求结合专业化、系统化的科学理论,一般普通的实验人员都可以进行操作。由于在样品检测中时间短,可结合标准曲线来定量检测物,正常在 ELISA试剂盒检测区间内的样品,都可以采用该检测技术。但是 ELISA试剂盒的检测区域,容易受到特异性抗体亲和力,还有灵敏度的限制。所以,在规定适用范围内,实际检测出来的样品,有可能存在假阳性问题,从而引发判定偏差,要求定量检测过程中要好标准曲线。
(二)免疫胶体金方法
免疫胶体金方法通常将胶体金当作示踪标志物,运用在抗原抗体中一项创新免疫标记技术。该方法具有灵活性及快速性,且检查结果用肉眼就能进行判读定,免疫胶体金方法比较适宜在现场检测分析使用。免疫胶体金检测技术经过水样里的锅离子,应用纳米钦富集水里的锅离子来检测,检测结果达到5µg·L-1,该方法针对环境水样进行检测。在水样进行检测时,达到100 ng·mL-1,且检测结果和ICP-AES具有一致性,类型相同的技术在进行水样检测时可达1 mg ·mL-1。所以,该方法适用于对水中锅离子现场进行检测。经过构建锅离子的免疫胶体金检查技术,可应用二氧化钦集水中的锅离子进行检测,可升高6.7 ng·mL-1。该项研制的试纸条,置于5℃环境下能储存8周,其稳定性较佳,并且检测成果和ICP-MS具有良好的相关性。
二、重金属污染物免疫学检测技术的注意要素
1.抗体制备及筛选
因为重金属离子分子量过小,其结构简单,不能用作制备抗体,要求通过双功能鳌合剂,与其他试剂进行反应后,结合载体蛋白才能对动物进行免疫。在制备的抗体中,有些会与其他离子产生交叉反应。例如,丁菌制作的Cr3+离子单抗和Mo6+产生交叉反应;还有唐勇制作的锅离子抗体和Hg2+发生交叉反应;在选择抗体过程中,具有严格的要求,要求将筛选范围扩大化,特别是亟待通过竞争 ELISA技术,来测定不同的离子针对抗体反应的抑制程度,必须要选择特异性良好与灵敏的抗体。因此,许多研究报道逐步注重核酸适配体技术,探讨其在重金属免疫检测方面的运用。例如,黄蜻创建的胶体金检测技术,建立在特异性核酸序列与配对序列基础上,有利于达到检测的目的,更具灵敏性。
2.样本前处理
在免疫技术检测能力方面,现有报道的不同类检测技术,灵敏度均高达mg ·mL-1水平,大体上符合多类样本中的重金属污染物限量指标。针对检测样本而言,不同的探究中选用的样本大部分是水(涉及到自来水或者江河水等)。这样,密切关系到样本基质的单一、干扰较小以及无须特别解决。针对食品安全包含的样本报道不多,例如青菜、果类、谷物、肉类等,这些和样本处理复杂性、耗时性以及干扰大息息相关。通常的设备分析技术,在进行测量重金属中,一般会选用灰化或消解方式,检测中费时费力。在免疫检测样本处理中,通常要通过此流程,尤其是对于大部分食品类样本而言。所以说,构建省时省力样本时,同时要求检测结果影响不大,已然是重金属免疫检测探究的要点。汪慧基于该问题,作出了具体研究,通过稀酸浸提蛋白类食品中,含有的重金属作为免疫检测分析。该研究说明,新技术处理样本检测的结果和以往处理技术检测的结果存在具有较好的线性相关性,尤其是对铜、铅及锅进行检测,能替换以往样本处理技术。另外,固相萃取技术、液相萃取技术也运用到重金属检测中。
三、发展趋势及展望
从未来发展方向看,首先必须强化重金属污染检测,特别是毒性强且伤害大的重金属。其次,加大重金属含量的检测力度,尤其是影响大、摄入量较高的重金属。再次,加大科技研究力度,对于危害程度不一的重金属污染进行合理分类,并且作出快速的测量与评价。最后,务必将定量检测和定性筛选有机结合,针对迅速筛选的技术与设备,没有必要力求太低的检出限标准,进而节省测试资金,保证筛查的高效率。
总结
随着我国经济的飞快发展,在食品和环境中,出现大量的重金属污染问题。人们逐渐加强思想认识,如何高速性及准确性检测出样品含有的重金属离子,这已经变成世界各国家值得研究课题。
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R446.6
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1672-5018(2017)01-207-01