急性早幼粒细胞白血病患者治疗前后血浆硫化氢浓度变化及意义

范 凌,刘东艳，范 静,陈立锋,王 平,李 琦,郭力荣，张 斌，佟长青

(1.河北北方学院附属第一医院血液内科，河北 张家口 075000;2.北京中医药大学东直门医院检验科，北京 100700；3.河北省张家口市第六医院妇产科，河北 张家口 075000;4.河北北方学院基础医学院生理教研室，河北 张家口 075000;5.河北省张家口市优抚医院泌尿外科，河北 张家口 075000;6.河北省张家口市第一医院肾内科和血液内科，河北 张家口 075000)

急性早幼粒细胞白血病患者治疗前后血浆硫化氢浓度变化及意义

范 凌1,刘东艳2，范 静3,陈立锋4,王 平5,李 琦1,郭力荣6，张 斌1，佟长青1

(1.河北北方学院附属第一医院血液内科，河北 张家口 075000;2.北京中医药大学东直门医院检验科，北京 100700；3.河北省张家口市第六医院妇产科，河北 张家口 075000;4.河北北方学院基础医学院生理教研室，河北 张家口 075000;5.河北省张家口市优抚医院泌尿外科，河北 张家口 075000;6.河北省张家口市第一医院肾内科和血液内科，河北 张家口 075000)

目的 探讨急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)患者治疗前后血浆H2S浓度变化及意义。方法 随机选取初治APL住院患者26例为病例组，健康体检者26例为对照组。去蛋白法测定血浆H2S浓度，比较病例组患者急性发病期、临床缓解期血浆H2S浓度与健康对照组之间的差异。结果 病例组患者急性发病期血浆H2S浓度明显升高，与临床缓解期和对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)；病例组经治疗后进入临床缓解期的患者血浆H2S浓度下降，接近健康对照组，差异无统计学意义(P>0.01)。结论 内源性H2S参与了APL发生发展的病理生理过程。

急性早幼粒细胞白血病；硫化氢；血浆

目前研究发现气体信号分子H2S在人体具有重要的生理和病理生理调节作用，并与多种疾病的发生、发展、转归密切相关[1-5]。但有关H2S与急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)关系的研究报道少见。我们检测了初治APL患者治疗前后血浆H2S浓度的变化，探讨H2S在APL发病过程中的作用及意义。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2014-01-01—2014-12-31河北北方学院附属第一医院收治的初治APL住院患者26例为病例组，诊断及疗效判断均符合《血液病诊断及疗效标准》[6]，其中男12例，女14例；年龄19～52岁，中位年龄35岁；经治疗后，临床缓解病例22例，其中男9例，女13例。选取同期体检中心健康体检者26例为对照组，其中男12例，女14例；年龄22～50岁，中位年龄36岁。均排除心、脑、肺等主要脏器疾病。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 晨起抽取空腹静脉血2 mL，置EDTA-K2抗凝管，3 000 r·min-1离心10 min，吸血浆至EP管，置-75℃低温冰箱保存，待测H2S浓度。病例组中22例临床缓解病例治疗缓解后抽血复查。

1.2.2 测定方法 测定前血清标本室温复融，3 000 r·min-1离心10 min，取上清液，去蛋白法检测H2S浓度[6]。首先用不同浓度NaHS标准液绘制标准曲线，直线回归方程为：Y=1513.1X±2.362，r2=0.998。反应在5 mL玻璃试管中完成，按序加入以下试剂：首先在玻璃试管中加入10 g·L-1醋酸锌0.5 mL，然后加入血浆标本0.1 mL，振荡摇匀，再依次加入20 mmol·L-1对苯二胺盐酸盐0.5 mL和30 mmol·L-1三氯化铁0.5 mL，室温孵育20 min使其充分反应，再加入1 mL 10%三氯醋酸使蛋白沉淀，最后加入2.5 mL蒸馏水补足体积至5mL，再次充分混匀，6 000 r·min-1离心5 min，吸出上清液，722分光光度计在670 nm波长处测吸光度，根据绘好的H2S标准曲线计算出上清液中H2S含量，单位:μmol·L-1。

1.3 统计学方法

2 结 果

APL患者急性发病期H2S浓度为(88.32±7.12)μmol·L-1，临床缓解期H2S浓度为(46.75±5.94)μmol·L-1；正常对照组H2S浓度为(45.8±6.11)μmol·L-1。病例组急性发病期与正常对照组相比H2S含量明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)；临床缓解期与急性发病期相比H2S含量明显降低，差异有统计学意义(P<0.01)；临床缓解期与正常对照组相比H2S含量差异无统计学意义(P>0.05)。

3 讨 论

H2S是毒性气体，近年研究发现H2S在人体内也有产生，是人类发现的第三个气体信使分子，是在体内由含硫氨基酸如同型半胱氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸等在磷酸吡多醛-5’-磷酸依赖性酶(包括CBS、CSE)、半胱氨酸转移酶等催化作用下产生的代谢产物[6]。有研究表明内源性H2S参与了许多临床疾病的病理生理过程，例如肾病、左心室肥厚、脑梗死、肿瘤、胰腺炎等[1-5]。

本研究发现APL急性发病期患者血浆H2S浓度明显升高，经治疗缓解后H2S浓度回降至接近正常对照组，表明内源性硫化氢H2S参与了APL的病理生理过程。其机制我们认为可能为：①某种原因导致生成H2S的原料(如同型半胱氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸)增加；②生成H2S的酶(如CBS、CSE等)生成增多和(或)活性升高；③H2S在体内的清除速度减缓。研究发现H2S对多种癌细胞增殖与凋亡有调节作用[7-12]，在APL急性发病期，可能由于某种负反馈机制的存在，导致H2S浓度升高，升高的H2S促进了APL细胞凋亡并抑制了其增殖，减缓了APL的发展速度，是机体自我保护机制之一。临床缓解期患者血浆H2S浓度降至接近正常水平，表明了这种负反馈机制的存在。至于确切原因，有待进一步深入研究。

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[责任编辑：李蓟龙 英文编辑：刘彦哲]

Changes and Significance of Plasma Hydrogen Sulfide Concentration before and after Treatment in Patients with Acute Promyelocytic Leukemia

FAN Ling1，LIU Dong-yan2,FAN Jing3，CHEN Li-feng4，WANG Ping5, LI Qi1,GUO Li-rong6,ZHANG Bin1,TONG Chang-qin1
(1.Department of Hematology,The First Affiliated Hospital of Hebei North University,Zhangjiakou,Hebei 075000,China;2.Department of Laboratory Medicine,Dongzhimen Hospital of Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100700,China;3.Department of Obstetrics and Gynecology,The Sixth Hospital of Zhangjiakou City,Zhangjiakou,Hebei 075000,China;4.Department of Physiology,School of Basic Medicine,Hebei North University,Zhangjiakou,Hebei 075000,China;5.Department of Urology,Special Care Hospital of Zhangjiakou City,Zhangjiakou,Hebei 075000,China;6.Department of Internal Medicine and Hematology,The First Hospital of Zhangjiakou City,Zhangjiakou,Hebei 075000,China)

Objectives To investigate the changes and significance of plasma H2S concentration before and after treatment in patients with acute promyelocytic APL leukemia(acute).Methods 26 hospitalized patients with APL were randomly selected as the case group,and 26 healthy persons as control group.H2S concentrations in plasma of patients and controls were determined by the method of deproteinization,and the significant differences were analyzed between the patients with acute stage,clinical remission and healthy control group.Results The concentration of H2S in plasma in acute stage patients significantly decreased,with statistical significance compared with clinical remission stage and control group(P<0.05);in clinical remission after treatment,H2S concentrations in the plasma of patients increased,close to those in the healthy control group,with no statistical significance(P>0.05).Conclusion Endogenous H2S may be involved in the pathophysiological process of the occurrence, development and outcome of APL.

acute myeloid leukemia;hydrogen sulfide;plasma

张家口市2014年度科学技术研究与发展指导计划项目(No.1421125D)

范凌(1979-)，女，河北张家口人，主治医师，主要研究方向：血液病学。

R 733.71

A

10.3969/j.issn.1673-1492.2017.04.006

来稿日期：2016-11-23