Mindray BC-6800全自动血液细胞分析仪低值血小板临床性能评价

2017-03-03施紫微胡锡林

中国医学装备 2017年2期

施紫微黄婷胡锡林

施紫微①黄婷①胡锡林②*

目的：评估Mindray BC-6800全自动血液细胞分析仪低值血小板(PLT)临床性能，对比评价自动及手动进样两种模式低值PLT的检测结果。方法：参照国际血液学标准化委员会(ICSH)、美国临床实验室标准化协会(CLSI)等标准，评估BC-6800低值PLT重复性及携带污染率；选取108份PLT减少患者抗凝全血，采用自动和手动两种模式进行检测，评估两种模式对低值PLT检测结果的一致性。结果：自动及手动模式低值PLT均有较好重复性，20×109/L以上样本两种模式变异系数(CV)均能保证在5%以内。20×109/L以内样本两种模式重复测试标准差(SD)和极差(R)均非常小，标准差(SD)分别为0.5和0.8，极差(R)分别为1和2，结果波动均非常小。自动及手动模式PLT携带污染率均＜1%，高值PLT对低值PLT均无携带干扰。108份低值PLT样本两个模式相关系数达到0.9910。对临床医学决定水平浓度点进行分析，两种模式偏差较小。结论：Mindray BC-6800全自动血液细胞分析仪对低值PLT具有良好临床性能，自动与手动模式对低值PLT检测一致性较好，可根据实际情况选择合适的模式进行测试。

血液细胞分析仪；自动进样；手动进样；血小板减少；性能评估

[First-author’s address]Department of Clinical Laboratory, the Second Inpatient, Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command, Fuzhou 350003, China.

血小板(platelet，PLT)是研究止血与凝血障碍的重要指标之一，准确的PLT计数在临床应用和治疗中均具有十分重要的参考意义[1-2]。Mindray BC-6800全自动血液细胞分析仪是全自动五分类血液细胞分析仪，采用激光散射、鞘流阻抗和流式细胞技术(含荧光染色)等方法对血液样本进行细胞分类计数；同时血红蛋白采用比色法进行测定[3-4]。本研究参照国际血液学标准委员会(nternational Council for Standardization in Haematology，ICSH)和美国国家临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Sstandards Institute，CLSI)的相关标准和指南，对该仪器的低值PLT检测能力进行研究，其主要研究项目包括低值PLT重复性、携带污染率、自动进样与手动进样两种模式对低值PLT检测的一致性。通过对这些项目的评估确认BC-6800是否满足低值PLT日常检测的需要，自动与手动进样两种模式在低值PLT检测能力是否有差异。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

(1)仪器。BC-6800全自动血液细胞分析仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)。

(2)试剂。BC-6800全自动血液细胞分析仪相应配套检测试剂：M-68FD染色液(批号2015042801)、M-68LB溶血剂(批号2015081805)、M-68LD溶血剂(批号2015081605)、M-68LH溶血剂(批号2015061804)以及M-68DS稀释液(批号20150811102)原装试剂均由深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司提供。乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)和真空采血管(2 ml)由福州长庚医疗器械有限公司提供，均在有效期内使用。

(3)质控品。BC-6D血细胞分析仪室内质控物：批号分别为MB015L(低值)、MB015N(中值)及MB015H(高值)，由深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司提供，均在有效期内使用。

1.2 标本来源

标本均取自南京军区福州总医院2016年1-3月门诊和住院的108例血液病患者。均按照世界卫生组织(WHO)《静脉采血的最佳操作》[5]采集的静脉血液。

1.3 检测方法

BC-6800全自动血液分析仪在实验前使用厂商配套校准品进行校准，并且参加福建省临床检验中心室间质评成绩优秀以及南京军区临床检验中心室间质量评比成绩优秀。每日对高值、中值、低值进行室内质量控制，在质量控制后进行检测。所有操作均严格按照《全国临床检验操作规程》[6]的要求。

1.4 统计学方法

采用Microsoft Excel 2007对重复性及携带污染率数据进行统计，两种模式对比采用Analyseit v4.20统计软件进行Deming Regression和Bland-Altman Plot分析。

2 结果

2.1 重复性试验

选取3份低值PLT全血标本，分别在自动进样模式及手动进样模式进行重复性测试，其中一份PLT≤20×109/L，一份PLT20～40×109/L，另一份PLT在40～60×109/L。每例样本分别在自动进样模式及手动进样模式各连续检测6次，计算两种模式各组的均值(mean)、标准差(standard deviation，SD)及变异系数(coefficient variation，CV)%，对于低值样本，从统计学上看PLT≤20×109/L的CV%会比PLT20～40×109/L和40～60×109/L样本的CV%大，推荐采用SD作为判断标准，建议SD≤3×109/L。重复性试验结果见表1、表2和表3。

表1 自动进样和手动进样的重复性[PLT＜(20×109)/L]

表2 自动进样和手动进样的重复性[PLT(20～40)×109/L]

表3 自动进样和手动进样的重复性[PLT(40～60)×109/L]

2.2 携带污染率测定

采用自动进样模式和手动进样模式，各选取一份高值标本，连续检测3次(H1、H2、H3)，立即选取一份低值标本连续检测3次(L1、L2、L3)。携带污染率计算为公式1：

携带污染率要求＜1.0%，携带污染率测定结果见表4。

表4 携带污染率测定结果

2.3 两种进样方式低值PLT对比测试

选取108例无PLT聚集报警的低值PLT标本，对同一份标本采用自动进样模式与手动进样模式分别进行分析。将各检测标本结果采用EP9-A3进行统计，并用Deming Regression和Bland-Altman Plot进行分析，医学决定水平的各浓度点要求绝对偏差在±5×109/L以内，相对偏差在±10%以内。

(1)将自动进样与手动进样模式进行Deming Regression分析，其结果如图1所示。

图1 自动进样与手动进样模式Deming Regression分析图

图2 自动进样与手动进样模式Bland-Altman Plot分析图

(2)将自动进样与手动进样模式检测结果偏差进行Bland-Altman Plot分析，＞95%的浓度点在偏差的95%置信区间内，其结果如图2所示。(3)医学决定水平各浓度点的偏差分析。在临床上，当PLT在20～50×109/L时，可有轻度出血或手术后出血症状，当＜20×109/L时，可有较严重出血。此外，美国CLSI H26-A2文件上将PLT为10×109/L定义为一个非常重要的医学决定水平浓度点，因此参照EP9-A3文件的统计方法，对10×109/ L、20×109/L及50×109/L的3个浓度点进行了分析(见表5)。

表5 自动进样与手动进样医学决定水平浓度点的偏差分析

(4)将自动进样与手动进样模式进行回归分析(见表6)。

3 讨论

BC-6800采用阻抗法、激光散射法、结合荧光染色的流式细胞技术进行细胞分类计数，采用比色法进行血红蛋白测定。输出33项测量参数加14项研究参数；红细胞分布直方图、PLT分布直方图两个直方图；分类散点图、嗜碱散点图、网织红散点图、光学PLT散点图、扩展网织红散点图及有核红散点图多个二维散点图及三维散点图[7-9]。具有手动、自动及预稀释等3种血样进样方式，CBC、CBC＋DIFF、CBC＋DIFF＋RET、CBC＋RET、CBC＋NRBC、CBC＋DIFF＋NRBC、CBC＋DIFF＋RET＋NRBC、RET等8种测量模式，每小时最快可测量125个样本[10-11]。

表6 自动进样与手动进样的回归分析

本研究重点对该仪器的低值PLT检测能力进行研究，主要研究项目包括低值PLT重复性、携带污染率、自动进样与手动进样两种模式对低值PLT检测的一致性[12]。通过对这些项目的评估确认BC-6800是否满足低值PLT日常检测的需要，自动与手动进样两种模式在低值PLT检测能力的差异，其评估结果如下。

(1)自动进样与手动进样对低值PLT均具有良好的重复性，PLT＜20×109/L、PLT在20～40×109/L及PLT在40～60×109/L的3段内，自动进样与手动进样SD均＜3，而20×109/L以上的样本两种模式CV%均能够保证在5%以内。而20×109/L以内的样本主要因为样本值本身比较小所以CV%略大，但通过实际数据分析，两种模式重复测试SD及极差(R)均非常小，自动进样模式及手动进样模式SD分别为0.5及0.8，两个模式R分别为1及2，结果波动均非常小。

(2)自动进样与手动进样携带污染率分析，自动进样与手动进样携带污染率分别为0.71%及0.36%，均＜1%，高值PLT样本对低值PLT样本无干扰。

(3)选取108例低值PLT样本，采取两种模式进行测试对比分析，相关系数达到了0.9910。对临床医学决定水平浓度点进行分析，两种模式偏差较小，结果一致性较好。

准确的PLT计数对于出血性、血液性疾病的诊断以及临床输注PLT的评价等都具有十分重要的参考意义[13-15]。PLT的输注日益增多以及价格昂贵和存在风险，因此不准确的PLT计数会误导临床诊治，增加患者的经济负担。本研究评估结果表明，Mindray BC-6800全自动血液细胞分析仪两种检测模式对低值PLT检测结果具有高度一致性，但两种检测模式要求的血量具有较大差异，自动进样模式为200 μl，手动进样模式为150 μl。如果采用自动进样模式进行标本测量，操作完全自动化，人工干预较少；而手动进样要求血量较少，150 μl左右即可完成测试，但操作略为繁琐。两种进样模式检测全血细胞的原理虽然相同，但所需血液样本量不同，表明两种进样模式的进样通道和内部管路不完全相同[16-17]。

手动模式检测标本时由于人为因素的不稳定性，因而可能会引起两种检测结果的偏差。在日常工作中多数标本均通过自动进样模式进行检测，并且室内质量控制和室间质量评价均在自动进样模式下进行，因而不能反映手动进样模式的准确性。手动模式虽然用血量少，适用于儿童和老年人等不易采血的患者，但由于人为因素，例如混匀状态的不稳定，因而CV较于自动进样模式偏高。因此，在计数PLT时，尤其当检测低值PLT时，应考虑此类误差可能给检测结果带来的不准确性，必要时建议使用手工法进行复检以保证结果的准确性。此外，由于某些生理或病理原因，有些标本PLT会较容易聚集，标本采集后放置时间越久，PLT越容易发生聚集，在PLT计数时应排除大体积PLT、PLT聚集等PLT假性减少的标本[18-20]。

4 结语

通过对Mindray BC-6800全自动血液细胞分析仪低值PLT的临床性能评估，并对自动进样及手动进样两种进样模式低值PLT检测结果进行对比评价，表明BC-6800对低值PLT检测具有良好的临床性能，自动进样与手动进样模式对低值PLT检测一致性较好，可根据科室的实际情况，自行选择合适的模式进行PLT检测。

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Clinical performance evaluation of low-count platelet samples for Mindray BC-6800 automatic hematology analyzer/

SHI Zi-wei, HUANG Ting, HU Xi-lin//China Medical Equipment,2017,14(2):23-26.

Objective:To evaluate the clinical performance of low-count platelet(PLT) samples for Mindray BC-6800 automatic hematology analyzer and compare the detection results between two sampling mode(automatic injection, manual injection).Methods:To evaluate the repeatability and contamination rate of low-count platelet samples depend on ICHC, CLSI and other standards; to choose 108 blood samples with thrombocytopenia and detect them in two kinds of detection mode (automatic and manual operation), and then evaluate the consistency of low-count PLT samples between the two modes.Results:The results of two detection modes for low-count platelet samples showed there were well repeatability between them. The CV% of those samples which PLT were upon 20×109/L can be assurance within 5% in two modes. The value and fluctuation of SD and range of those samples which PLT were under 20×109/L were smaller; the SD of two modes were 0.5 and 0.8, respectively; and the Range were 1 and 2, respectively. Both of the two modes were less than 1% in carryover rates, high PLT accounts has no influence on low accounts. The correlation coefficient was up to 0.9910 between the two modes by analyzing the 108 blood samples. The results demonstrate there were low deviation and well consistency between the two modes by analyzing medical decision level concentration point for them.Conclusion:Mindray BC-6800 has good clinical performance to detect low-count PLT samples and there are well consistency between automatic and manual operation. Clinical Laboratory chooses which suitable mode to detect samples may depend on self-situation.

Hematology analyzer; Automatic injection; Manual injection; Low-count platelet samples; Performance evaluation

1672-8270(2017)02-0023-04

R197.39

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2017.02.007