贝类毒素及其检测方法研究进展

方丽媛,李代宗,肖勤

(河北农业大学海洋学院，河北 沧州061100)

贝类毒素及其检测方法研究进展

方丽媛,李代宗,肖勤*

(河北农业大学海洋学院，河北 沧州061100)

贝类所含的毒素是由其摄食的微藻或菌类所产生的，这些毒素在贝类的体内积聚，通过被人类摄取而在人体中释放，使人体产生相应的食源中毒症状，严重威胁着人类健康。本文综述了贝类毒素及种类，并针对其近年来研发的小鼠生物测定法、高效液相色谱法、免疫学测定法、毛细电泳法、生物传感器法等检测方法进行了详细介绍，分析了各方法的原理、优缺点和适用范围等，最后对贝类毒素检测方法的未来发展趋势进行了展望。[中国渔业质量与标准，2017,7(1):41-49]

贝类毒素；检测方法；高效液相色谱法；酶联免疫法；生物传感器

贝类毒素是由海洋中有毒藻类产生的天然有机物，贝类滤食这些有毒微藻后，经过生物累积和放大转化为贝类毒素。海洋藻毒素已经成为影响贝类水产品食用安全的重要污染物之一。贝类毒素一般积存于贝类(蛤类、螺类、鲍类)的肝脏或消化腺中，尤其双壳贝类如牡蛎、扇贝和贻贝中含有贝类毒素的风险更高。这些毒素在贝类体内积聚，通过被人类摄食而在人体中得以释放，使人体产生相应的食源中毒症状。据报道,2012年10月广东省深圳市某酒店发生一起食用响螺(Neptuneacumingicrosse)导致的食物中毒事件，中毒人数18人，患者主要症状有腹痛、腹泻、恶心、呕吐、发热。2016年5月，河北省秦皇岛市某医疗机构先后接诊9例因食用海虹(Mytilusedulis)引起食物中毒的病例，病例初期症状为口唇、手脚麻木，后期伴有恶心呕吐、头晕等症状，重症患者呼吸困难、四肢无力、伴有昏迷[1]。2016年6月新西兰初级产业部(MPI)发布贝类毒素风险警告，建议民众勿食用旺阿帕劳阿半岛(Whangaparaoa peninsula)南部海域附近贝类，因对该海域贝类的取样检测发现，其麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poisoning, PSP)超出安全限量，达1.0×10-6。贝类毒素引起的食物中毒反应快、毒性大且无适宜解毒剂，因此引起了人们特别是食品安全部门的极大关注，对这些有害毒素的检测方法也逐渐受到广大专家的重视。对于贝类毒素的检测方法有很多，主要包括小鼠生物测定法、高效液相色谱法、免疫学测定法、毛细电泳法、生物传感器法等。贝类毒素的检测在目前乃至今后相当长一段时间内，都将是国内外共同关注的热点。

1 贝类毒素分类及简介

国际上，由联合国粮农组织(FAO)、世界卫生组织(WHO)和政府间海洋学委员会(IOC)共同组建的双壳类软体生物毒素工作组于2004年3月在关于贝类生物毒素会议中将贝类毒素按照化学结构分为8组，包括石房蛤毒素(saxitoxin, STX)组、大田软海绵酸(okadaic acid, OA)毒素组、氮杂螺环酸(azaspiracid, AZAs)毒素组、软骨藻酸(domoic acid, DA)毒素组、环亚胺类(cyclic imines, CI)毒素组、短裸甲藻毒素(brevetoxin, BTX)组、扇贝毒素(pectenotoxin, PTXs)组和虾夷扇贝毒素(yessotoxin, YTXs)组。

1.1 石房蛤毒素组

STX组属于氨基甲酸酯类化合物(carbamate toxins)。它是由石房蛤(Saxidomusgiganteus)滤食亚历山大藻(Alexandriumsp.)和裸甲藻(Gymnodiniumsp.)后在体内蓄积的一种毒素[2]。过去人们一直认为麻痹性贝类毒素的致毒机理主要是将细胞内钠离子通道阻断，使神经系统传导发生障碍，从而产生麻痹作用。然而最近发现，STX还可以与钙和钾离子通道蛋白、神经元型一氧化氮合酶、STX代谢酶等转铁蛋白家族结合，从而影响神经传导[3]。其毒性非常强，0.5 mg 即可使人毙命，在国际条约中已被列为化学武器。

1.2 大田软海绵酸毒素组

OA毒素组是聚醚类化合物，主要包括OA、鳍藻毒素(dinophysistoxin, DTX)及其C7位羟基与脂肪酸发生酰基化反应生成的7-O-酰基酯化物(7-O-acyl esters, 统称为 DTX3)[4]，常见于牡蛎、淡菜、日月贝等贝类。其主要致毒机理是抑制丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(PPs)的活性。此外，OA毒素组还具有促肿瘤作用，且具有一定的遗传毒性，易形成DNA加合物[5]。

1.3 氮杂螺环酸毒素组

AZAs是最早在欧洲发现的一类聚醚类毒素，目前已确定其产毒甲藻主要有具刺环胺藻(Azadiniumspinosum)、腹孔环胺藻(Azadiniumpoporum)和肥胖环胺藻(Azadiniumobesum)[6]。研究表明，AZAs毒素的中毒症状与腹泻性贝毒(diarrhetic shellfish poisoning, DSP)引起的症状非常相似，为恶心、呕吐、严重腹泻和胃肠部痉挛等[7]。AZAs毒性高于OA毒素[8]，且十分稳定，常规烹饪和加工处理方法无法将其去除。至今未发现有效治疗方法和药物。其致毒机理目前没有明确说法，但有研究发现AZAs毒素不会显著改变钠离子或钙离子电压门控通道的流量[9]，即此毒素不通过细胞钠或钙离子通道影响神经网络。

1.4 软骨藻酸毒素组

DA毒素组主要来自于海洋硅藻(Diatoms)中的拟菱形藻(Pseudo-nitzschia)，如尖刺拟菱形藻(Pseudo-nitzschiapungens)、多列拟菱形藻(Pseudo-nitzschiamultiseries)和拟柔弱拟菱形藻(Pseudo-nitzschiapseudodelicatissima)等。它具有强烈的神经毒性作用，可以导致短期记忆功能的长久性损害。DA及其异构体iso-domoic acids A-F等可以作为一种研究神经退化性疾病的工具[10]。

1.5 环亚胺类毒素组

CI毒素组具有相同的大环和生物活性基团结构。其致毒机理较为独特，可在中枢与外周神经系统包括神经肌肉接头处阻断乙酰胆碱受体功能[11]。目前，CI毒素组中研究最多的是螺环内酯毒素(spirolides, SPX)。这类毒素虽然也具有神经性毒害作用，但大部分毒性较低，对人类危害不大，故至今还未制定相关的限量标准[5]。

1.6 短裸甲藻毒素组

BTX组是耐热的高度脂溶性毒素，结构为多环聚醚化合物。它是贝类毒素中唯一的可以通过吸入导致神经性中毒的毒素。其毒理是作用于钠通道，引起钠离子内流，导致肌肉和神经细胞去极化[12]。BTX毒素还可致使染色体体外断裂，具有遗传毒性，但现有实验数据太少，不足以建立急性参考剂量[13]，有待进一步研究。

1.7 扇贝毒素组和虾夷扇贝毒素组

PTXs组和YTXs组是从传统分类的腹泻性贝毒类型中被划分出来的，各自单独作为一类毒素存在。PTXs毒素常伴随OA毒素中毒事件一起出现，但关于其致毒机理目前尚不明确[4]。YTXs毒素不同于OA毒素组，不会抑制丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(PPs)的活性。因其毒性相对较弱，迄今为止还未发现有相关中毒事件的报道。

关于这些毒素组的分布，OA毒素组几乎遍布全球近岸海域，CI和YTXs毒素组在世界多个地区贝类或微藻中发现。AZAs、BTX和PTXs毒素组近年来也逐步扩散，分布范围越来越广[5]，但AZAs毒素组尚未在欧洲发现[14]。除STX和DA毒素组外，其他6组均为脂溶性贝毒(lipophilic shellfish toxins, LST)。目前，中国沿海分布的产毒藻或染毒贝类样品中曾检出的LST主要包括OA、PTXs、YTXs、AZAs毒素组以及CI组中的Gymnodimine(GYM)毒素，且OA、PTXs和YTXs毒素组在贝类中的检出率较高[4]。

另外，因人体产生食源中毒症状不同，可将贝类毒素分为麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poisoning, PSP)、失忆性贝类毒素(amnesic shellfish poisoning, ASP)、神经性贝类毒素(neurotoxic shellfish poisoning, NSP)和腹泻性贝类毒素(diarrhetic shellfish poisoning, DSP)四大类(表1)。

2 贝类毒素检测方法

有关贝类毒素的检测方法主要有小鼠生物测定法、高效液相色谱法(高效液相色谱-荧光检测器法、高效液相色谱串联质谱法)、免疫测定法(酶联免疫法、免疫层析法)、毛细电泳法以及生物传感器法等。

2.1 小鼠生物测定法

小鼠生物测定(mouse bioassay, MBA)法是一种传统的贝类毒素检测方法，可用于所有贝类毒素的检测。该方法的原理主要是使用适宜的溶剂将样品中毒素提取出来，稀释后以腹腔注射的方式使小鼠染毒，通过观察小鼠的中毒症状以及平均致死时间来定性、定量毒素毒性大小。该方法已被列入美国分析化学协会(Association Official Analytical Chemists, AOAC)标准方法，是国际海产品贸易中贝类毒素常用的测定方法。

表1 贝类毒素分类与简介

Harwood等[17]应用此法检测了塔斯马尼亚鲍(Abalone)中的麻痹性贝毒，包括罕见的脱氧脱氨甲酰基类毒素(deoxydecarbamoyl STX, doSTX)，结果显示通过腹腔注射doSTX的小鼠半数致死量(LD50)为1 069 nmol/kg(95%置信区间为983 ～ 1 100 nmol/kg)，表明doSTX毒性大约比STX低40倍。Pérez-Gómez等[18]利用原代培养的鼠小脑神经元研究YTXs毒素对中枢神经系统神经元存活和功能的影响，发现其主要对神经网络有明显的毒性作用。对于YTXs来说，神经组织是一个脆弱的生物靶。

小鼠生物测定法作为几种检测方法中运用范围最广的检测方法，不需要专门的检测仪器，可以测定出贝类样品的综合毒性，但在多种毒素同时存在的情况下容易使定量结果偏差较大，或因高温、金属离子、不饱和脂肪酸的存在等情况下引起假阳性结果[6,19]。由于小鼠的个体大小以及小鼠个体情况的不同，容易造成灵敏度低，准确性差。另有实验表明，MBA法测量结果与温度变化也有关[19]。此外，小鼠生物法操作过程相对较复杂，检测时间偏长，并且只能确定贝类中毒素的有无及是否超标，不能准确地确定贝类中所含有的毒素是哪些类型。因此，需要探究其他检测方法。

2.2 高效液相色谱法

近年来，高效液相色谱(HPLC)法在测定贝类毒素上发展很快。根据欧盟(EC)指令No 15/2011规定，自2015年起，HPLC法开始取代小鼠生物测定法，成为检测6类脂溶性贝类毒素的官方标准方法。按传统分类，HPLC法则主要应用于PSP、DSP和ASP的检测上[19]。与其他方法相比，HPLC法检测时间相对较短，灵敏度高，检出限低，并且可以完成大批量的检测任务。它可以定量测定贝类毒素，但此方法需要专门的检测仪器，成本较高，需要较强的操作能力。

2.2.1 高效液相色谱-荧光检测器法

高效液相色谱-荧光检测器(HPLC - FLD)法目前是国内外检测PSP和DSP的常用方法。其主要原理是用适宜溶剂提取待测物质，除杂后加入衍生化试剂，通过衍生作用使待测化合物在一定波长的激发光照射下产生荧光，利用荧光强度计算含量，以便进一步进行定性、定量研究[15]。此方法的灵敏度非常高，用时短，对仪器的稳定性依赖小，并且选择性好。但此法适用范围有一定的局限性，只适用于有荧光基团和衍生化之后有荧光基团的化合物，定量分析时线性范围较窄，并且对检测结构相似、保留时间基本相似的贝类毒素检测准确性较差。

张晓玲等[20]采用3-(2-呋喃甲酰基)-喹啉-2-羰醛(FQ)为荧光衍生试剂，利用超高效液相色谱(UPLC)和柱前衍生荧光检测技术，建立了贝类中3种高毒性PSP毒素成分(STX、GTX1及neoSTX)的检测方法。结果表明，在优化后的最佳实验条件下，3种PSP毒素成分线性方程的相关系数(r)均大于0.998，检测限为7～14 μg/kg，回收率为82%～92%，RSD值小于5.2%，说明此法可用于STX、GTX1及neoSTX的日常分析检测。Cho等[21]采用高效液相色谱法，通过柱后荧光衍生，分析了单个日本塔玛亚历山大藻(Alexandriumtamarense)中麻痹性贝毒C-toxin 2(C2)含量。优化后，当信噪比(S/N)为2时，可最低检测出1 fmol的C2毒素，检测灵敏度可达单细胞藻类的水平，也证实了该方法灵敏性高，具有可靠性。

目前国标(GB/T 23215—2008)中规定，贝类中多种麻痹性贝类毒素含量的HPLC - FLD法测定方法的检出限：STX为14.5 μg/kg；dcSTX为12.5 μg/kg；neoSTX为15.7 μg/kg；GTX1为50.7 μg/kg；GTX2为19.6 μg/kg；GTX3为6.5 μg/kg；GTX4为16.7 μg/kg；dcGTX2为17.3 μg/kg；dcGTX3为4.8 μg/kg；B1为31.9 μg/kg；合麻痹性贝类毒素总量(STXeq)为125 μg/kg[22]。

2.2.2 高效液相色谱串联质谱法

高效液相色谱串联质谱(HPLC - MS/MS)法目前已被广泛应用于贝类毒素检测工作中。刘仁沿等[23]通过HPLC - MS/MS法检测了34种沿海贝类中脂溶性贝类毒素分布及含量，其中扇贝毒素PTX-2Sa检出率最高，为44%；环亚胺类毒素中的GYM毒素次之，为35.3%。于慧娟等[24]用此法检测了10种麻痹性贝类毒素，平均回收率为72.3%～91.1%，STX、dcSTX和neoSTX定量限为100 μg/kg，GTX1 - GTX5、dcGTX2和dcGTX3定量限为50.0 μg/kg。陈剑刚等[25]也用同样方法测定了贝类产品中石房蛤毒素(STX)、新石房蛤毒素(neoSTX)、膝沟澡毒素(GTX1&4)、脱氨甲酰基类毒素(包括dcSTX、dcneoSTX和dcGTX2&3) 8种麻痹性贝类毒素。结果显示8种麻痹性贝类毒素在各自相应浓度范围内线性关系良好，检测限为10～50 μg/kg，平均加标回收率为75.5%～103.0%。吴振兴等[26]用HPLC-MS/MS法对PSP的13种代表性化合物进行了研究。结果显示，这些化合物在各自的浓度范围内线性良好，回收率为71.2%～97.5%，检测低限范围为5.2～13.4 μg/kg。Cho等[27]利用亲水作用的液相色谱与质谱联用(HILIC - LC - MS/MS)法检测了塔玛亚历山大藻中的PSP，发现此种藻含有罕见的12β- deoxydecarbamoyl saxitoxin毒素，说明该方法具有极高的灵敏性。Mattarozzi等[28]经过微萃取及纯化等一系列步骤处理样品后，也用 HILIC检测了贻贝中的PSP毒素，测得检测限和定量限分别为 3～159 μg/kg和 7 ～ 436 μg/kg，适用于贝类产品中麻痹性贝类毒素的定量分析。另外，方晓明等[29]用利用液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(LC/Q - TOF - MS)检测了贝类组织中的DSP，对其中的OA毒素进行了分析。结果显示，LOQ为 0.1 μg/g，加标样品的平均回收率为89%～93%，相对标准偏差为9%～10%。这说明此法具有高分辨率，能进行精确测定而不降低灵敏度。

高效液相色谱串联质谱法是一种可以定性、定量、分离范围很广的快速分离检测方法，具有很高的专属性、准确性、灵敏性。其对AZA毒素中AZA 1的检测灵敏度可达MBA法的80 000倍[30]。但此法也存在一定局限性，如所用仪器昂贵；质谱离子源有记忆效应且在异构体、立体化学方面区分能力差；需严格控制操作条件，对操作人员水平要求较高等。

2.3 免疫测定法

免疫学方法是以抗原-抗体特异性反应为基础的检测方法。目前已有多种免疫诊断试剂盒和试纸条用于分析不同的贝类毒素。

2.3.1 酶联免疫法(ELISA法)

黄玉柳等[31]用ELISA快速检测试剂盒，测定了牡蛎及文蛤中的PSP，全部实验过程在2 h内完成，灵敏度为 0.015 ng/g。与小鼠生物测定法相比，其检测限更低，为 0.02 ng/g。此外，Kim等[32]研究设计了一种液相芯片实验室(SLP-LOC)来测定STX(图1)，由G蛋白耦联的磁性粒子作为固相载体，采用竞争免疫反应方式，通过包被有STX抗体的磁性微粒子竞争性地捕获样品中的STX 或HRP标记的STX标准品进行测定。SLP - LOC可以省略复杂的液体处理步骤，这或许代表了酶联免疫吸附实验的一种崭新应用方法。

图1 SLP - LOC原理示意图[32]Fig.1 Schematic representation of the principleof the SLP - LOC[32]

ELISA法检测时间短并且使用方便，但免疫检测只能根据待测物结构表位进行测定，而非针对其结构，因此其类似物有干扰作用，会出现假阳性或对毒性估计的不准确[15]。因贝类毒素种类繁多，目前的商品化试剂盒检测贝类毒素种类较少，故需要对很多贝类毒素的免疫学方法进行开发。

2.3.2 免疫层析法

Kim等[33]将荧光素标记的微囊藻毒素- LR抗体固定在硝酸纤维素膜条带上，通过荧光强度来定量测定微囊藻毒素-LR的含量，最快在15 min内即可得出结果：微囊藻毒素- LR浓度范围在125～2 000 pg/mL，具有良好的线性关系，检测限为95.38 pg/mL。与固定抗体相比，若将抗原包埋固定后，测得其检测下限仅为47.23 μg/L，检测结果不理想。另Pyo等[34-35]利用胶体金免疫层析法快速检测蓝藻毒素中的微囊藻毒素- LR，其费用较低，为ELISA法的10%，但不能用于定量分析。关于免疫胶体金的定量检测也有学者进行了研究，刘仁沿等[36]用胶体金标记软海绵酸单克隆抗体，建立了快速检测软海绵酸的免疫层析试纸条方法，其检出限为12 ng/mL；高利利等[37]用胶体金免疫层析试纸条检测贝类食品中DA的含量，15 min内完成检测，灵敏度为20 ng/mL。可见胶体金免疫层析技术是一种简便、快速的检测手段。

免疫层析法操作简便快速，不需特殊仪器设备，适合现场实时检测和批量检测。但需要进一步提高其检测灵敏度和可重复性。定量和多元检测是免疫胶体金技术未来的发展方向之一[38]。

2.4 毛细电泳法

毛细电泳(capillary electrophoresis, CE)法主要是根据各种毒素分子所带电荷量不同将其分离进行检测，主要有毛细管电泳-紫外(CE - UV)检测法和毛细管电泳-质谱(CE - MS)法。李大志等[16]在参考现有CE分离分析方法的基础上，通过对分析条件的优化，将软骨藻酸分离的线性范围扩大到0.2 ～ 50.0 mg/L，方法检出限为0.063 mg/L (S/N>3)。陈晓燕等[39]以磷酸氢二钠-柠檬酸为运行缓冲液，用高效毛细管电泳法对GTX2和GTX3相关样品进行了快速而又灵敏的定量分析，经过高压液相法分离后再用CE法得到电泳图，图谱显示，除GTX2和GTX3吸收峰外，还存在至少两个杂峰，故其分辨率较传统的高压液相法要高出许多。

不过此方法灵敏度相对不高，仅为1 mg/L[40]。Li等[41]为提高检测灵敏度，将微囊藻毒素转换后用荧光素5 -异硫氰酸酯(FITC)衍生，然后将FITC标记的微囊藻毒素直接注入激光诱导荧光监测器(laser-induced fluorescence, LIF)对微囊藻毒素进行示踪分离。不过此法目前尚不成熟，但若经过不断的改善，有望成为操作简单、快速的各贝类毒素检测方法。

2.5 生物传感器法

目前大多数用于贝毒检测的生物传感器是以免疫学为基础的[42]。在DSP检测中，Tang等[43]在PEI耦合方法下，使用石英晶体微天平(QCM)对晶体表面的活化培养时间进行了优化，对BSA稀释因子影响共轭体系和晶体频率上抗体数量进行研究。用这种方法可使传感器具有良好的存储寿命(38 d)。然而，检测限(1.9 μg/mL)和传感器的灵敏度并不理想。若用BSA抗体水凝胶可以使该装置的性能显著提高，初步结果显示，检测限和灵敏度可分别提高524倍和80倍。Berre等[44]通过生物传感器法检测DSP，利用高亲和力抗体检测了OA毒素及其衍生物、DTX-1和DTX-2等，检测限为22.4 ng/mL，变异系数(CV)<9.3%，证实此法简便有效，有较高的重现性。Zou等[45]用细胞阻抗传感器(cell-based impedance biosensor, CIB)检测OA毒素，传感器芯片模式图及细胞生长曲线如图2所示。HeLa和HepG2两种细胞检测限值分别为10.2和3.3 g/L，均低于常规值(21.2和9.8 g/L)，说明CIB技术有较大的应用潜力。

图2 传感器芯片的电极结构图(A)和长期(0—60 h)(B)及短期(0—400 s)(C)典型细胞生长曲线[45]Fig.2 The electrode structures of sensor chip (A)and the typical cell growth curve in long term(0—60 h)(B) and short term (0—400 s)(C) [45]

Meneely等[46]利用荧光平面波导生物传感器检测PSP(图3)，检测限与检测容量分别为12和20 pg/mL，CV为11.3%，平均回收率为106%，这种创新性的平面波导器件具有快速灵敏，便携易用的特点，15 min内可完成检测。

图3 阵列布局设计示意图和阴性(A)和阳性(B)图像[46]Fig.3 Schematic of the array layout design and thenegative (A) and positive (B) images[46]

与高效液相色谱法相比，生物传感器法适用于贝类毒素的快速检测，对仪器操作人员的专业程度没有较高要求，并且其专一性也很强，只对特定的底物起反应，不受颜色与浊度的影响。目前生物传感器在贝毒检测方面的应用还只是处于实验室阶段[47]，由于生物活性单元具有不稳定性和易变性等缺点，故生物传感器的稳定性和重现性较差[48]。

2.6 其他方法

Beach等[49]用电喷雾电离串联质谱(LAESI - MS/MS)法直接检测贻贝组织匀浆样品中的DA，该方法的最大优势是无需进行萃取、净化等样品前处理步骤，分析速度极快，只需10 s。Mattarozzi等[50]采用电喷雾解吸电离高分辨质谱(DESI - HRMS)对蛤蜊(Ruditapesphilippinarum)中麻痹性贝类毒素进行了筛查，此法操作简便，安全有效，可用于高通量分析。Müller等[51]利用修饰有4-氨基苯硫酚的纳米银颗粒作为标签，通过表面增强拉曼谱(surface - enhanced raman scattering, SERS)对海水中的DA进行了检测，其检测最低浓度可达3.3×10-11。据统计，自2009年起，经过不断改良与测试，此法CV由最初的39 %降低至22 %，逐渐受到越来越多人的认可[52]。另外，还有气相色谱(GC)法、细胞毒性检测法(又称组织培养分析法)[6,53]等，但应用并不广泛。酶活性抑制检测技术、分子探针技术、荧光原位杂交技术、重组质粒技术等也在贝类毒素检测的过程中发挥着越来越重要的作用[4]。

3 结论及展望

贝类毒素不但危害人类的健康，还会对渔业生产、环境保护和近海旅游产业等产生不良影响。近年来，贝类毒素也愈发引起国内外科学界的重视，迫切需要开发一些简便、可行的毒素检测方法。目前现有的毒素检测方法各有其优势及不足，小鼠生物测定法与高效液相色谱法应用较为普遍，但操作复杂，成本较高。毛细电泳法操作简便，但灵敏度较低，还需不断改善。相比之下，免疫试剂盒检测操作简便、快速，生物传感器的小型化、自动化使即时检测成为可能[54]，有良好的开发利用前景，下一步可将重点转向免疫试剂盒种类开发和生物传感器的应用制造。由近几年贝类毒素检测方法的发展情况不难看出，其总的趋势一定是向着易操作、低成本、高灵敏度、高重现性、高通量及自动化方向发展的。随着新的贝类毒素不断被发现以及科学研究的进一步深入，应积极探索和建立更加可靠、有效的新型检测方法，使检测效果更加理想。

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Advances on shellfish posioning toxins and their detection technologies

FANG Liyuan, LI Daizong, XIAO Qin*

(College of Ocean,Hebei Agricultural University，Cangzhou 061100, China)

Shellfish posioning toxins, mainly produced from microalgaes, were accumulated in shellfish body by feeding. Afterwards, they were released in human body by shellfish intake and caused corresponding food poisoning symptoms. These shellfish posioning toxins potentially threaten human health. Therefore, in the review, shellfish posioning toxins and their species were summarized, their detection technologies were introduced in detail such as mouse bioassay, HPLC, immunoassay, capillary electrophoresis, biosensor and so on, and all kinds of methods were also analyzed. Finally, the future development trend of detection technologies of shellfish posioning toxins were prospected in the paper. [Chinese Fishery Quality and Standards, 2017, 7(1):41-49]

shellfish posioning toxins; detection technology; high performance liquid chromatography(HPLC); enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA); biosensor

XIAO Qin, qinxiao669@163.com

10.3969/j.issn.2095-1833.2017.01.007

2016-09-05；接收日期：2016-10-26

河北省高等学校科学技术研究重点项目(ZD2015119)；河北省科技支撑计划项目(12276712D)

方丽媛(1994-)，女，研究方向为水产品安全检测，437510621@qq.com 通信作者：肖勤，副教授，研究方向为水产动物病害防治及检测，qinxiao669@163.com

S912

A

2095-1833(2017)01-0041-09