月季组织培养的研究

2017-02-26卢娟

花卉 2017年10期

关键词：壮苗外植体生根

卢娟

（辽宁水利职业学院 110122）

月季组织培养的研究

卢娟

（辽宁水利职业学院 110122）

月季组织培养通常选择健壮枝条饱满而未萌发的侧芽作为外植体，灭菌用75%酒精和10%次氯酸钠，初代培养基为MS+BA0.3～1.0mg/L，继代培养基为MS+BA1～2mg/L+NAA0.01～0.1mg/L，壮苗培养基为 MS+BA0.3～0.5mg/L+NAA0.01～0.1mg/L，生根培养基为MS+NAA0.5mg/L。

月季；腋芽；组培

月季属蔷薇科蔷薇属多年生落叶或常绿直立灌木，它适应性强，栽培容易，每年多次开花，而且香味怡人，在观赏植物中地位很高，被誉为“花中皇后”。月季是世界四大切花之一，具有很高的观赏价值和经济价值。月季传统的繁殖手段是扦插、嫁接、压条，若用组织培养技术，能大幅地提高获得月季植株的速度和质量。一方面，组织培养可有效地保持母株的优良性状；另一方面，它对植物品种改良和选育新品种也有重要意义。

1 初代培养

1.1 外植体的选择与灭菌

选取生长健壮的当年生月季枝条，用饱满而未萌发的侧芽作为外植体。以枝条中段芽最好，因为接种后，中段芽5d左右就能萌发，而基部和梢部的芽往往迟至15d才萌发。

采回的枝条切去叶和刺，先整段用洗衣粉水仔细刷洗，再用自来水冲洗，切成2～3cm一段，每段至少一个侧芽，装入小烧杯带到超净工作台上。先用75%酒精灭菌10s，然后用10%次氯酸钠溶液灭菌10min，再用无菌水清洗3～5次。

1.2 切割接种

将灭过菌的月季茎段上下端面均切掉一薄层后，接种到初代培养基中。注意芽尖朝上，茎段竖直插入培养基中。每瓶接种3～4段即可。

1.3 培养

初代培养的目的是获得健壮的新生芽，初代培养基MS+BA0.3～1.0mg/L出芽效果都不错。培养条件：温度21℃最好，最高不超过 25℃，有昼夜温差，光照 10～12h/d，光强 800～1200LX。初代培养7d左右，丛生芽即可萌发，2～3周左右芽长可达1cm。

2 继代培养

将上述无菌芽从原茎段上切下，转接到MS+BA1～2mg/L+NAA0.01～0.1mg/L的继代培养基上，促使嫩茎长出更多的侧芽。每5～6周做一次继代增殖，对增殖倍率高的品种，要求进行一次壮苗培养，壮苗培养基为：MS+BA0.3～0.5mg/L+NAA0.01～0.1mg/L。继代培养受糖浓度、pH值、激素配比的影响。糖量加大、pH值降低会使月季继代苗分化率提高20%，同时可缩短继代周期，但糖浓度不可超过50g/L，pH值不可低于5.5。适宜的激素种类和浓度配比是月季腋芽萌发和丛生芽增殖的关键。培养条件：光照10～12h/d，光强 800～1800LX，温度 20～23℃。

3 生根培养

月季嫩芽长度为2～3cm时，就应切割下来转入生根培养基。生根培养基用MS+NAA0.5mg/L即可，此外加入300mg/L活性炭，30g/L蔗糖。

4 驯化移栽

组培苗的移栽是从无菌环境到有菌环境的过程，因此在移栽前还要对小苗进行驯化，让其适应温室外的环境。驯化是让组培苗适应外界有菌环境的过程，具体的操作步骤是将封口膜打开一个口子，使之与外界联通，同时在培养瓶中加入少量的水防止培养基变干，驯化一般要持续一周左右。在幼苗基部伤口愈合，已长出根原基且幼根尚未长出时，即可移栽。这种方法不会损伤根系，移栽速度快，成活率高。幼苗出瓶后，先洗去沾附的培养基，再种植到粗沙+园田土（1：3）介质中。移栽完毕浇透水，并用0.1%的百菌清、多菌灵或甲基托布津等喷雾保苗，能显著提高成活率。