壮药华凤仙质量标准研究

何春欢 李红 李嘉* 姜平川

1.广西壮族自治区中医药研究院，广西 南宁 530022；2.广西中药质量标准研究重点实验室，广西 南宁 530022

壮药华凤仙质量标准研究

何春欢1,2李红1,2李嘉1,2*姜平川1,2

1.广西壮族自治区中医药研究院，广西 南宁 530022；2.广西中药质量标准研究重点实验室，广西 南宁 530022

目的:建立广西壮药华凤仙的质量标准研究。方法:对华凤仙的显微鉴别、薄层色谱鉴别、水分、总灰分、浸出物等项目进行系统研究。结果:华凤仙的薄层色谱鉴别特征明显，专属性强，制定了显微鉴别、水分、总灰分和浸出物的控制指标。结论:华凤仙建立显微鉴别与薄层色谱鉴别项，水分不得过15.0%，总灰分不得过23.0%，浸出物不得少于8.5%。这些数据为华凤仙的质量标准制定提供参考，对于保证其质量和临床疗效具有重要意义。

华凤仙；质量标准；显微鉴别；薄层鉴别

华凤仙，别名水边指甲花、象鼻花，为凤仙花科植物华凤仙ImpatienschinensisLinn.的全草，其味微苦、辛，具有清热解毒、活血化瘀、消肿拔脓的功效，用于治疗发热、咳嗽、咳痰、肺结核、跌打损伤和瘀血疼痛，外用治蛇头指疮、痈疮肿毒等病症，为广西民间常用中草药[1-3]。据报道华凤仙含有挥发油和黄酮成分，其中挥发油主要成分为正二十六烷和正十六烷酸乙酯[4-5]。 药理研究表明，华凤仙总黄酮提取物对大鼠心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用[6]。本实验主要对华凤仙药材性状、显微鉴别，薄层鉴别、水分、灰分等进行研究，为系统评价广西华凤仙质量提供科学依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 LY-HPCCD 万能视频成像装置(成都励扬精密机电有限公司)，DFY-500高速万能粉碎机(温林市林大机械有限公司)，SXz-2.5-10马弗炉(沈阳市节能电炉厂)，XS-205分析天平(梅特勤托利多仪器有限公司)。

1.2 试药 华凤仙样品采自广西各地(见表1)，经本所黄云峰副研究员鉴定为凤仙花科华凤仙ImpatienschinensisLinn.的全草。对照药材(自制，编号HFX-1，经广西中医药大学韦松基教授和广西中医药研究院赖茂祥研究员鉴定为凤仙花科华凤仙ImpatienschinensisLinn.)。所用试剂均为分析纯。

表1 样品来源

2 方法与结果

2.1 鉴别

2.1.1 显微鉴别 根据采集到的药材样品，分别制成显微组织片和粉末片后观察拟定，显微组织片的制备以药材经固定液固定后按石蜡切片法制片染色，粉末片以药材经粉碎过四号筛后按粉末制片法制片，每个样品均观察不同产地不同批号药材10张片以上。组织结构和粉末图在显微镜下经LY-HPCCD万能视频成像装置拍摄成像(图1～3)。不同批号的华凤仙药材性状及显微鉴别结果见表2。

表2 不同批号华凤仙药材性状及显微鉴别结果

2.1.1.1 茎的横切面 表皮细胞1列，长椭圆形，排列整齐。皮层由数列类圆形薄壁细胞组成，排列疏松，有的细胞含有大量针晶或针晶束。皮层最内1～2层细胞稍小，排列紧密整齐。中柱维管束6个环状排列，外韧型，多4大2小；韧皮部所占面积较窄，由筛管、韧皮薄壁细胞组成；木质部由导管、木薄壁细胞等组成；髓射线较宽。髓部明显。见图1。

2.1.1.2 叶的横切面 上、下表皮细胞各1列，但前者细胞长圆形或类圆形，较大，偶见气孔与非腺毛，非腺毛细胞3～8个；后者细胞类方形，较小，其上可见气孔。栅栏组织一列，类长柱形，不通过中脉，含叶绿体。海绵组织细胞排列疏松，内有针晶束。中脉维管束1个，木质部位于上方，由薄壁细胞、导管等组成；韧皮部位于木质部的下方，所占面积较少，细胞小而排列紧密。叶下表皮主脉显著突起。见图2。

2.1.1.3 粉末 粉末黄绿色。纤维单个散在或成束，长梭形，先端钝或平截，细胞壁多光滑，直径18～25μm 。可见一些呈长方形、排列整齐的细胞，有的其中含有针晶束。草酸钙针晶、柱晶多见，大小不一，散在或存在薄壁细胞内。非腺毛多散在，稍弯曲或平直，竹节或牛角状，由 2～8个细胞组成，直径21～32μm，长62 ～133μm。叶上表皮细胞不规则多边形，垂周壁稍平直。下表皮细胞多边形，垂周壁多深波状弯曲，气孔较多，多为不定式 。导管多为梯纹、螺纹导管。见图3。

2.1.2 薄层层析鉴别 取本品粉末1g，加95%乙醇10mL，超声提取20min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取华凤仙对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0502薄层色谱法)试验，吸取上述二种溶液各5～10μL，分别点于同一羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以环己烷-丙酮(4：3)为展开剂，展开，取出，晾干，在365nm荧光灯下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。见图4。

2.2 检查 在制定本品检查指标限度时，笔者根据本品的特点，主要考察每种方法对所测本品的适用性，重点考察了水分、总灰分和浸出物三项指标。

2.2.1 水分 照水分测定法(《中国药典》2015年版四部通则0832水分测定法 第四法(甲苯法))测定。共考察测定了7批样品的水分含量，测定两次取平均值。7批华凤仙药材水分含量试验结果，最高水分含量为14.2%，最低水分含量为9.3%，因此，水分含量拟定不超过15.0%。测定结果见表3。

表3 华凤仙样品水分含量测定结果一览表

2.2.2 总灰分 照灰分测定法(《中国药典》2015年版四部通则2302灰分测定法)测定，共考察测定了7批华凤仙药材样品的总灰分含量。7批华凤仙样品总灰分含量试验结果为：最高总灰分为21.8%，最低总灰分含量为14.5%，因此，将本品总灰分拟定为不得超过23.0%。测定结果见表4。

表4 华凤仙样品总灰分测定结果一览表

2.2.3 浸出物 照醇溶性浸出物测定法(《中国药典》2015年版四部通则2201浸出物测定法)项下的热浸法，共测定了7批华凤仙药材样品的浸出物含量。最高含量为17.3%，最低含量为9.1%，故拟定华凤仙药材醇溶性浸出物含量不得少于8.5%。实验结果见表5。

表5 华凤仙样品醇溶性浸出物(热浸法)测定结果一览表

3 讨论

研究表明华凤仙在性状和显微方面有明显的特征，性状方面如叶对生，边缘有稀疏的钝锯齿；花腋生，萼片向内弯曲成钩状；旗瓣圆形，翼瓣半边倒卵形，基部一侧有耳。显微鉴别方面茎横切面中柱维管束6个环状排列，多4大2小，髓部明显；粉末中纤维细胞壁光滑，非腺毛竹节或牛角状，叶下表皮细胞垂周壁多深波状弯曲。

笔者分别用乙酸乙酯、丙酮、95%乙醇、甲醇、水等溶剂对华凤仙药材进行超声提取，过滤，浓缩后得到样品液。点板后比较发现，95%乙醇提取物斑点信息较多，斑点清晰，故采用了乙醇作为溶剂；以不同比例的石油醚-乙酸乙酯、石油醚-丙酮、氯仿-甲醇、甲苯-丙酮、环己烷-丙酮等多种展开剂进行展开，结果以环己烷-丙酮(4：3)为展开剂分离效果较好；显色方面，在365nm荧光下检视效果较好。本文采用的TLC鉴别法色谱清晰，分离度好，可作为华凤仙药材质量控制的方法。

华凤仙中的主要化学成分有挥发油和黄酮类等化合物，多为醇溶性成分，综合考虑后选用醇浸出物作为指标。

[1]江苏新医学院.中药大辞典(上册) [M].上海:上海科学技术出版社, 1985: 917-918.

[2]中国科学院中国植物志编辑委员会(主编).中国植物志第47卷(2) [M].北京: 科学出版社, 2002: 28-29.

[3]梁启成, 钟鸣.中国壮药学[M].南宁: 广西民族出版社, 2005: 390.

[4]宋伟峰, 罗淑媛, 钟鸣.超临界CO2流体萃取华凤仙挥发油成分分析研究[J].中国医药导报, 2012, 9(17): 142-143.

[5]彭定基, 李兵, 陈晓丽.华凤仙总黄酮的含量测定[J].广西中医学院学报, 2010, 13(1): 54-55.

[6]宋飞, 曾瑜.华凤仙总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制探讨[J].中国医院药学杂志, 2014, 34(7): 515-520.

(编辑：陶希睿)

2016-10-28

广西科技厅重大专项计划课题(桂科重1355001-4-6)；广西科技厅重大专项计划课题(桂科重1598005-10)；广西卫生厅中医药科技专项(GZZY13-28)。

何春欢(1985-)，男，壮族，硕士，助理研究员，从事质量标准研究及天然产物活性研究。E-mail: hechunhuan0@163.com

李嘉(1969-)，女，汉族，硕士，副主任药师，从事质量标准研究。E-mail: 1343157882@qq.com

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1007-8517(2017)02-0032-03