新型精液保护剂对种鸡精液质量的影响

刘诗柱++韩庆彬++王宝玉++江善祥

摘要：种公鸡携带病原体传递给后代的问题由来已久，作为垂直传播的一个途径其危害不容小视，可致雏鸡死亡率高、后代生长不良、疫病代代相传、生产力低下，甚至给环境保护、可持续发展带来挑战。试验对新研发的一种精液保护剂进行了评价。①通过两种稀释比例、经过4个不同时间点，检测了新型精液保护剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的杀灭率，结果表明，新型精液保护剂对三种细菌的杀灭率分别达到99.99%、99.99%和100.00%；②对加入新型精液保护剂后的种鸡精液在不同时间点进行精子活力测定，结果各时间点的精子活力均明显高于空白试验组。综合表明，该新型精液保护剂不但可杀灭精液中的病原体，而且可以提高精子活力。

关键词：新型精液保护剂；种鸡精液；质量；影响

中图分类号：S814.3；S831 文献标识码：A 文章编号：1007-273X（2016）09-0009-02

种鸡垂直传播性疾病包括细菌性疾病（鸡伤寒、鸡白痢、禽波氏杆菌病、禽奇异变形杆菌病等）、病毒性疾病（禽白血病、禽网状内皮组织增生症、鸡传染性贫血、病毒性关节炎、禽传染性脑脊髓炎、I型腺病毒感染、产蛋下降综合征等）、其他微生物感染性疾病（支原体病、衣原体病等）。当种鸡感染某一种垂直传播性疾病时，病原会随着曾祖代—祖代一父母代一商品代而传播，并且每只祖代鸡会繁殖约70～80套父母代，父母代再将疫病传播到商品代。种公鸡携带病原体传递给后代的问题尤其严重，一只种公鸡将病原传播给其他鸡的机会比母鸡高得多[1]。作为垂直传播的一个途径其危害不容小视，其带来的后果包括雏鸡死亡率高、后代生长不良、疫病代代相传、生产力低下，甚至给环境保护、可持续发展带来挑战。随着传代，疫病波及范围不断被扩大，影响越来越严重。同时，种公鸡如果携带垂直传播疫病病原，就会经交配或人工授精传染给母鸡。轻者会侵害鸡的生殖系统、输卵管感染、卵泡变性、坏死，造成产蛋率下降、孵化率降低、弱雏增多以及雏鸡生长缓慢等一系列的问题；重者造成烈性传染病的传播和暴发，危害巨大。

针对上述情况，南京农业大学药理实验室研制了用于种猪场和种鸡场的精液保护剂[2]。通过向品质合格的精液中添加一定量的精液保护剂，以期达到净化精液中的病原微生物，切断疾病垂直传播，同时延长精子受精能力及时间的目的[3]，从而使人工授精技术在生产实践中发挥更大的作用。

1 材料与方法

1.1 材料设备

精液保护剂（由南京农业大学药理实验室提供）100 mL；大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌标准菌（由商丘职业技术学院动物工程系微生物实验室提供）；恒温培养箱， 高倍光学显微镜，细菌计数器，新鲜种鸡精液（河南省商丘市宣武种鸡场提供） 50 mL；低倍显微镜等。

1.2 方法步骤

1.2.1 精液保护剂对临床常见病原菌的抑杀作用 分别取精液保护剂1.0 mL和0.5 mL各3份，各加入纯化水200 mL，配成1∶200和1∶400的溶液，贮于6个锥形瓶中；然后从恒温培养箱中取出培养有大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的试管，用滴管吸取各1 mL，加入上述锥形瓶中；分别于0、1、3、6、12 min时，通过高倍显微镜测定细菌数并计算杀灭率。

1.2.2 精液保护剂对种鸡精子活力的影响 将生理盐水与本品按1 000∶10混合后，再按照4∶1的比例与种鸡精液稀释，取A、B两试管各加入稀释后保护剂8 mL、新鲜精液2 mL。于10.5 h后用低倍显微镜测定精子活力，以后每1 h测定1次，共测定8次。B试管为重复试验，设空白对照组。

2 结果与分析

2.1 精液保护剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的杀灭效果

通过1∶200和1∶400两种稀释浓度的精液保护剂对三种细菌的抑杀试验可以看出，从1 min到12 min作用时间均呈现很好的杀菌效果（表1）。1∶400稀释时，对大肠杆菌的抑杀效果最差，作用1 min时，杀灭率为98.07%；对铜绿假单胞菌效果最好，作用6 min时，杀灭率达到100%。1∶200稀释时，对金黄色葡萄球菌抑杀效果最差，1 min时杀灭率为99.94%；对铜绿假单胞菌效果最好，作用1 min时杀灭率就达到100%。1∶200稀释作用12 min时，对三种细菌的杀灭率均达到99.99%以上。

2.2 精液保护剂不同时间点对精子活力的影响

从加入精液保护剂10.5 h后每次间隔1 h、连续8次的测定结果来看，精液保护剂对精子有一定的保护作用（表2）。作用10.5 h时，加入精液保护剂的平均活率为0.925，比空白对照组的0.900高2.78%；之后5次测定，分别比对照组高20.6%、29.8%、31.4%、50.0%和67.5%。最后两次因活率太低，利用的意义不大。

3 讨论

（1）精液保护剂在本试验中对三种病原菌的抑杀作用均较为理想，但是还不能说明对所有的病原体都有理想的杀灭作用。毕竟精液中可能污染的病原有很多种，如正粘病毒、副粘病毒、疱疹病毒、呼肠孤病毒、白血病病毒、网状内皮增生病毒等，还有沙门氏菌、支原体、衣原体等，有待进一步探讨。

（2）精液保护剂对精子活力影响的试验。本试验从精子形态、活动性两方面鉴定了该精液保护剂对精子非但没有抑杀作用，还有一定的保护作用。但是最后的评定还要看其对孵化率、健雏率的影响，甚至要看对后代生长发育和繁殖有无影响。

（3）具有杀灭病原体作用的精液保护剂目前尚属首例，研发虽然难度很大，但鉴于其在畜牧生产上的巨大作用，其意义重大。疫病垂直传播的普遍性及其巨大危害目前仍是世界难题，精液保护剂从种公鸡入手，是斩断垂直传播的一条重要途径，一旦研发成功会给养殖业带来巨大财富。

参考文献：

[1] 李 湛.公鸡精液品质的鉴定及注意事项[J].今日畜牧兽医，2011（11）：38

[2] 张兆旺.鸡精液稀释液设计及筛选方法学研究[D].兰州：甘肃农业大学，2005.

[3] 王欣荣，李彦强.保存条件对鸡精子形态及畸形率的影响[J].黑龙江动物繁殖，2009，17（6）：5-6.