PTC患者血清CK-19 MMP-9及OPN的变化及其临床意义

陈 健 张雅琴 沈 燕*

甲状腺乳头状癌（PTC）是头颈部比较常见的恶性肿瘤，近年来其发病率在我国有上升趋势［1］。新近研究发现，细胞角蛋白-19（CK-19）在PTC中表达明显增加，不但参与了PTC的发生发展过程，而且与肿瘤的转移有关［2］。研究表明MMP- 9与PTC的发生发展有明显相关性，在肿瘤侵袭和转移中发挥重要作用［3］。骨桥蛋白（OPN）参与细胞信号转导，促进细胞粘附和迁移，与肿瘤细胞的生长、侵袭、转移密切相关，近年被认为是一个新的肿瘤标志物［4］。本研究检测甲状腺乳头状癌血清中CK-19和MMP-9和OPN水平的表达及其临床意义，并探讨其在PTC的早期诊断、鉴别诊断的作用及为侵袭转移提供客观的依据。

1 临床资料

岁，平均年龄（44.3±15.1）岁。将55例正常健康体检者设为正常对照组，其中男22例，女33例；年龄19～72岁，平均年龄（46.6±12.0）岁。所有患者术前均未行放疗或化疗等治疗，以上病例均经HE切片并由两位病理教授确诊。各组年龄、性别差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性（P＞0.05）。

1.2 方法 所有观察对象清晨空腹抽取静脉血5ml，按常规分离血清。采用ELISA测定血清CK-19、MMP-9和OPN含量，操作按说明书进行，试剂盒分别由武汉中美科技有限公司和武汉博士德生物工程有限公司提供，严格按说明书进行测定。

1.3 统计学方法 采用的SPSS 16.0统计软件。计量资料以（s）表示，组间比较采用t检验；相关分析用Pearson相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

1.1 一般资料 选择2015年1月至2016年6月入住浙江省人民医院耳鼻咽喉头颈外科就诊的甲状腺患者，按2004年WHO病理组织学诊断标准纳入：PTC患者55例，其中男20例，女35例；年龄20～70岁，平均年龄（45.5±14.8）岁；不伴有淋巴结转移者23例，伴有淋巴结转移者32例；同时期收治的甲状腺良性肿瘤患者55例，其中男21例，女34例；年龄21～70

2 结果

2.1 甲状腺疾病组和正常对照组血清CK-19、MMP-9和OPN水平比较 见表1。

表1 各组血清CK-19、MMP-9和OPN的含量比较（

表1 各组血清CK-19、MMP-9和OPN的含量比较（

注：与正常对照组比较，*P＜0.05；与甲状腺良性肿瘤组比较，#P＜0.05

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2.2 PTC伴淋巴结转移与否血清CK-19、MMP-9和OPN水平比较 见表2。

表2 各组血清CK-19、MMP-9和OPN的含量比较（

表2 各组血清CK-19、MMP-9和OPN的含量比较（

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2.3 PTC血清CK-19、MMP-9和OPN水平相关性分析 经正态性检验，CK-19、OPN水平与MMP-9均属正态分布，相关性分析结果表明：血清CK-19、OPN水平与MMP-9水平呈高度正相关（r=0.621，r=0.658，均P＜0.05）；血清CK-19与OPN表达也呈高度正相关（r=0.759，P＜0.05）。

3 讨论

早期PTC经手术切除后，几乎可以根治，而晚期PTC则会发生淋巴结、肺、骨等远处转移，区域淋巴结转移是PTC的主要转移途径，发生率达50%～80%，是影响患者生存及预后的重要因素之一［5］，因而早期诊断、早期治疗至关重要。PTC发病机制尚不清楚，目前认为甲状腺癌的发生发展是由多种因素作用而成的一个复杂过程，临床最初表现为无痛性甲状腺结节，临床上常通过测定血清中甲状腺球蛋白（Tg）来进行鉴别诊断，但Tg的检测受到甲状腺球蛋白抗体（TgAb）和促甲状腺素（TSH）的影响，临床上15%～20%的PTC患者外周血存在TgAb，故寻找更好的甲状腺癌肿瘤标记物是近年来学者们所探讨的重点。细胞角蛋白属于中微丝蛋白家族，是上皮细胞骨架的组成部分，表达于正常上皮以及上皮源性原发肿瘤及其转移肿瘤细胞，细胞角蛋白在甲状腺病变中均有表达［6］。CK-19是一种严格的上皮特异性分布蛋白质，存在于正常上皮和各种上皮来源的肿瘤中，可作为肿瘤患者血中是否存在循环肿瘤细胞即微转移的标志，是鉴别PTC与甲状腺良性乳头状增生的良好指标［7］。基质金属蛋白酶家族（MMPs）是一类参与细胞外基质降解的蛋白酶家族，MMP-9是MMPs家族中的重要一员，能降解细胞外基质（ECM），参与结缔组织的降解和重建、炎症反应、肿瘤扩散转移和缺血缺氧损伤等，对肿瘤的浸润与转移起着最重要、最直接的作用［8］。近年来的研究认为，细胞因子OPN是一种具有多种生物学活性的分泌型磷酸化糖蛋白，参与调节细胞粘附、迁移、细胞免疫、创伤愈合、肿瘤转移等病理过程，与恶性肿瘤的发展、浸润和淋巴结转移密切相关［9］。

本资料结果表明：PTC组血清CK-19、MMP-9和OPN水平明显高于甲状腺良性肿瘤组和正常对照组（P＜0.05），而甲状腺良性肿瘤组和正常对照组差异无统计学意义（P＞0.05）；且PTC伴淋巴结转移者血清CK-19、MMP-9和OPN表达水平比无伴淋巴结转移者更高，差异具有统计学意义（P＜0.05），提示血清CK-19、MMP-9和OPN的高表达可能与甲状腺癌的发生发展密切相关，有助于PTC与甲状腺良性肿瘤的鉴别，有助于PTC的侵袭转移的识别。相关性分析结果表明：血清CK-19、OPN水平与MMP-9水平呈高度正相关，血清CK-19与OPN表达也呈高度正相关，三者通过某种机制共同参与PTC的发生发展及侵袭转移过程，其可能机制为：骨桥蛋白和其受体CD44结合可激活MMP-9，降解细胞外基质，导致CK-19水平升高，从而促进肿瘤的侵袭与转移，导致癌细胞入血形成微转移灶。

综上所述，血清CK-19、OPN水平与MMP-9均与PTC的发生、侵袭转移有关，可作为区分PTC和甲状腺良性病变的标志物，可作为判断PTC转移和预后的参考指标。

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