中药指纹图谱技术的现代研究进展

2017-02-01李哲玄静季冬青马云石晓晨张国青

保健文汇 2017年6期

关键词：指纹图谱色谱

● 李哲玄静季冬青马云石晓晨张国青

中药指纹图谱技术的现代研究进展

● 李哲玄静季冬青马云石晓晨张国青

中药指纹图谱技术是运用现代分析技术将中药样本的化学信息以图形的方式加以描述的一项技术。近年来，该技术在辨别中药的真伪及质量方面的应用日益广泛。通过查阅相关的文献，本文对中药指纹图谱的现代研究状况及其主要应用技术进行阐述。

中药指纹图谱；研究现状；主要技术

在我国中药是一笔宝贵的财富，其疗效的发挥与其有效成分的种类和含量密切相关，要实现中药的现代化，必需严格控制其质量，保证中药的安全、稳定、有效。中药指纹图谱技术能够对中药的多种成分进行综合分析，其科学性，特征性，系统性深受国际认可，被看作是中药质量控制的里程碑。目前已对多种中药进行指纹图谱研究，使其质量更加安全可靠。

1 中药指纹图谱的现代研究状况

中药中含有丰富的化学成分，是一个多组分的复杂体系。在中药的研究过程中其质量控制问题一直是个重难点，而中药指纹图谱技术被认为是控制中药品种和质量的最直接，最准确，最有效的手段。

石荣[1]等用大豆异黄酮HPLC指纹图谱进行研究，分别选择了5个极性不同的具有代表性的样品，使用不同的仪器进行测定，从中得到大豆异黄酮指纹图谱中的保留时间飘移并完成了其校正工作。梁倩等应用气相色谱技术为金银花中的挥发油成分建立指纹图谱，所建的指纹图谱有较强的稳定性，该指纹图谱对不同产地的金银花的差异进行比较，为金银花的质量控制提供科学依据。目前，中国中医研究院已开始利用指纹图谱技术，从芍药，黄芩，苍术等中药材着手，分别对其进行鉴别，含量测定等方面的研究，建立了完整的中药材质量评估体系。

2 中药指纹图谱的主要技术

2.1 高效液相色谱法（HPLC）

HPLC法分析速度快，分离效能高，已广泛应用于中药的鉴别与分析。游松等[2]用芦丁作内标物，使用HPLC法分析银杏叶的化学成分，从其药材、中间体及注射液中间体中得到20个共有峰，通过比较各峰的相对保留时间及峰面积百分比发现三者的图谱具有一定的相关性，该试验结果为银杏药材的质量控制提供依据。中药注射剂中的成分多数可溶，使用HPLC法建指纹图谱时应先使用等度洗脱，若不理想再使用梯度洗脱方式。

2.2 薄层色谱法（TLC）

TLC法操作简便，重现性好，应用广泛，经济可靠。该方法通过对薄层展开的斑点用固定的波长进行扫描，所得结果客观准确，具有很好的鉴别意义。林明美等[3]对柴胡不同品种取了近40个样品，对样品分别进行薄层指纹分析,对柴胡根中的甲醇提取物，己烷提取物及挥发油分别进行薄层层析和薄层扫描,结果确认了柴胡属植物的特征成分。

2.3 气相色谱法（GC）

GC法以气体作为流动相进行分析，具有选择性好，分析速度快，灵敏度高，分离效能高等优点。该方法要求样品能汽化，对于挥发性成分具有很好的鉴别意义。钱浩泉等[4]应用GC-MS联用技术对道地产区的高良姜和在不同地区收集的各种市场商品进行比较鉴别,结果发现草豆寇、益智、红豆寇等高良姜的近缘植物的指纹特征存在明显区别,各个品种的指纹特征具有唯一性。

2.4 毛细管电泳法（CE）

CE法成本低，分析速度快，分离效率高，试剂用量少，是一种绿色的中药质量分析方法。该法适用于水溶性及醇溶性成分的分析，有研究利用CE法分析红花中的成分并建立指纹图谱，为红花的鉴别提供了理论依据。孙国祥等[5]采用毛细管电泳法,把原儿茶醛峰位作为参照峰并确定了8个共有峰,最终完成了复方丹参滴丸指纹图谱的建立。

2.5 荧光光谱法

荧光光谱具有良好的指纹性，能够比较形象得反映中药中荧光组分的信息，进而达到对中药的鉴别和质量控制。牟新利等[6]利用三维荧光技术来研究槐米，银杏叶和柳杉种子的指纹图谱，其中的芦丁组分能够将独有的指纹图谱特征显示出来，因而三维荧光能够比较准确的鉴别中药中的活性成分，可以作为研究中药指纹图谱的标准。

2.6 质谱法（MS）

质谱法精确，灵敏，常与其他方法联用，在科研工作中应用广泛。近几年来还出现了串联质谱（MS-MS）,等离子体质谱，气质联用（GCMS）等新的质谱技术。苏薇薇等[7]运用气质联用方法对细辛的45个样品进行分析，通过观察其样品的挥发油组分的总离子流图，从中得到了不同细辛样品的本质区别，该研究实现了对三种细辛的分类。

2.7 分子生物色谱

基于现代生物学技术，分子生物色谱出现。分子生物色谱指纹图谱是利用中药中的活性成分与其相互作用，将分子生物与色谱分离的成果紧密结合，进而建立指纹分析方法，对中药的研究及其质量控制提供帮助。有研究表明：不同的中药品种，其分子生物色谱指纹图谱存在显著差异，不同产地的中药其指纹图谱也存在一定程度的不同[8]。因此该方法可以用于中药的鉴定及活性成分的分析。

2.8 其他技术

中药指纹图谱除了应用上文中主要技术外，还会应用到高相逆流色谱（HSCCC）,HSCCC是一种新型的液-液色谱分配技术，该溶剂系统理论上适用于任何极性的样品，其制备量大，操作灵活，回收率高，能实现梯度操作，在分离中药方面具有很大优势[9]。此外，在中药的指纹图谱研究中，紫外可见光谱，红外光谱，核磁共振以及X射线衍射等波谱学方法也发挥着一定作用。

（作者单位：山东中医药大学药学院）

[1]石荣,王少云,侯准,桑立红.大豆异黄酮指纹图谱中保留时间漂流的校正研究[J].色谱,2006,24(1):65．

[2]游松，王亮，蒋稚红,等.银杏叶注射剂指纹图谱的研究[J].中草药,2002,33,(3):216-218.

[3]林明美.药物分析[J],1987,7(3):13.

[4]钱浩泉等.高良姜及其近缘植物挥发油成分的气相色谱指纹图谱研究.中药新药与临床药理,2001,12(3):179～182.

[5]孙国祥,宋宇晴.复方丹参滴丸的毛细管电泳指纹图谱[J].色谱,2009,27(4):494-498.

[6]王琳庞其昌,马骥,等.一种中药荧光指纹图谱的光谱图像构建方法[J].光子学报,2011,40(6):860-864.

[7]苏微微.中药材[J],1999,22(6):279.

[8]孔亮,邹汉法,汪海林,等.高等学校化学学报),2000,21(1):36.

[9]曹学丽.高速逆流色谱分离技术及应用.北京:化学工业出版社,2005.

李哲（1995～）2014级本科中药学专业。

张国青（1993～）2015级中药学硕士研究生，研究方向为中药质量控制。