分子生物学方法在食品微生物检测中的应用

分子生物学方法在食品微生物检测中的应用

近年来，我国曝光出一系列食品安全事件，造成消费者严重的恐慌，对食品安全问题关注程度逐渐提升。微生物污染作为一项严重的食品污染问题，可能导致食物变质，引发食物中毒，所以为了避免这一问题的发生，应采取科学、合理的方法，对食物进行检测，以此保证食物的安全。分子生物学方法与食品病原微生物传统检测方法相比具有良好的优势，大大提高了食品微生物检测水平。

分子生物学方法是指通过分子水平，深入研究细胞成分的理化性质，同时还应对细胞成分变化下的生命现象进行研究。在食品微生物检测中，采用分子生物学方法，包括许多的常用技术，主要有以下几种技术：PCR技术。采用PCR技术进行检测时，其理论基础为变性和复性，在使用该技术时在体外使用DNA聚合酶，并结合引物引导和dNTP使用，通过对引物引导和dNTP使用，可以使得模板在数小时内得到百万倍的扩增，同时可以使DNA进行选择和放大，因此增强了食品检测的准确性以及及时性。因此PCR技术在食品检测中应用得越来越广泛。但是需要注意的是，想要提高PCR技术的水平，必须对引物进行合理的设计，同时应对靶序列进行准确选择，这样可以有效保证检测的特性以及灵敏性，保证结果的准确性。在PCR技术基础之上进行发展，获得了荧光定量PCR技术，该技术可以实现定时定量检测，因此与原有的PCR技术相比，检测更加的快速、准确。荧光定量PCR技术可以直接测定PCR期间变化的荧光信号，同时通过对专用软件动态监测的应用，对扩增产物进行自动定量，以此保证获得的检测结果更加及时、准确。在对阪崎肠杆菌、沙门氏菌以及乳酸菌等微生物检测过程中，经常采用荧光定量PCR技术。核酸探针技术。核酸探针技术是一种重要地检测技术，也可以称为核酸交杂法。在检测过程中，主要通过结合某微生物核算以及DNA，实现对微生物的检测。具体是在被检、已变形的DNA样品中，加入DNA探针，实现DNA样品与同源序列相同DNA区段进行杂交，以此完成检测。在乳酸菌、产肠毒素以及沙门氏菌等检测中，经常使用核酸探针技术，由于该技术具有无放射性以及特异的特点，因此具有良好的应用前景。基因芯片技术与核酸探针技术原理相似，在检测过程中，基因芯片技术通过对显微打印，采用核算探针，将其固化在支持物的表面，并使得核算探针与标记样品进行杂交，以此实现快速检测。该技术具有许多的优势，包括高精密度、精确度以及灵敏度等，在有害微生物检测过程中，基因芯片技术是最为有效的方法之一。DNA指纹图谱技术。DNA指纹图谱技术还包括RAPD技术、DGGE技术等，其中RAPD技术，在检测过程中，通过PCR反应，在随机引物的作用下进行DNA的扩增，并获得一定数量和大片段DNA，并对其进行分析，对食品微生物类型进行确定。采用DCGE技术进行检测时，首先应对食品中的RNA或DNA进行提取以及扩增同时利用凝胶电泳的合理使用，获得有效的谱带，并通过分析获得检测结果。

目前我国食品安全问题是人们的关注重点，食品微生物检测对人们的生命健康具有重要影响，所以在食品微生物检测过程中，应合理采用食品微生物检测方法，保证食品微生物检测的精度，不断提高分子微生物检测水平，以此保障食品安全，进而促进我国和谐发展。

□刘倩瑛 湖北出入境检验检疫局技术中心