液相色谱质谱联用仪同时测定白酒中的甜味剂

2017-02-01罗平县市场监督管理综合检验检测中心

食品安全导刊 2017年18期

□ 李剑梁俊罗平县市场监督管理综合检验检测中心

□ 李剑梁俊罗平县市场监督管理综合检验检测中心

液相色谱-质谱联用法可以对白酒中的甜味剂合理高效检测。当处于负离子状态过程中，液相色谱-质谱可以对离子筛选。当甜味剂的质量浓度处于0.06～1.8 mg/L时，可以发现良好的线性关系，系数为0.98，平均定限量处于0.06 mg/L，通过检测发现，加标回收率为一般处于70%以上，相对标准偏差低于10%。通过研究发现检测方式简单高效，各项技术的指标符合国际的要求，可以对白酒中的甜味剂良好检测。

白酒、甜味剂、测定

1 研究现状

随着时代的快速发展，人工合成甜味剂的使用和研究速度在不断加快，但是目前食品安全问题已被人们广为关注。GB2760—2011《食品添加剂使用卫生标准》对白酒中的添加剂以及种类和浓度都有明确规定，白酒中的添加剂严格限制。白酒中甜味剂添加必须是食品安全检测的标准和重点工作，尤其是国内白酒种类较多，检测标准也较多，主要检测的物质包括甜蜜素、阿斯巴甜、糖精钠、三氯蔗糖、山梨酸、阿力甜，目前检测的方式和手段已经比较成熟了。但是甜味剂的检测往往比较单一，使用方式是气相或者是液相中的一种，检测结果往往会产生偏差，假阳性情况比较多见。最近几年所发布的标准数量也较少，不超过六条，也不利于检测结果的确立。

2 实验部分

2.1 材料与试剂

从普通市场采购；木糖醇标准品（纯度99.9%）、安赛蜜标准品（纯度99.9%）、甜蜜素标准品（纯度99.9%）（美国专业药品公司进口采购）；阿斯巴甜标准品等样品的纯度均达到98%。生产公司均为Dr. Ehrenstorfer GmnH公司；糖精钠的标注浓度1.00 mg/mL，存在1%的实际误差。由中国科学研究所测定；新橙皮苷二氢查尔酮标准品（纯度98.0%）；纽甜标准品（纯度99.0%，原料均产自美国）；乙腈、甲醇（均为色谱纯，产自FISS公司）；乙酸铵（色谱纯，产自FULAK公司）；18.2 MΩ超纯水（国内水利资源局）。

2.2 仪器与设备

实验过程中使用2017液相色谱-质谱联用仪；专业检测色谱柱（2.0 mm× 150 mm）；LC质谱工作站（日本Shimadzu公司）。

2.3 方法

2.3.1 标准溶液的配制

将已知的甜味剂标准品，利用水溶解之后，调配，保证混合物的实际浓度可以达到100 mg/L，在4 ℃的温度之下，在阴凉的环境下保存。在配制完成后取标准溶液体积为1.0 mL，将乙醇与水加入其中稀释，保证两者体积比为容至10 mL，此时的质量浓度大致维持在20.0 μg/mL左右，采用同样的配比方式，将其质量浓度分别稀释至0.04、0.06、0.08、0.10、0.12、0.14、0.16、0.18、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.20、1.40、1.60、1.80、2.00 μg/L，在此过程中，采用测定的主要设备为液相色谱-质谱联用仪[1]。

2.3.2 样品的制备

在选取白酒的样品之后，采用直径为0.22 μm的过滤网之后，后期主要采用测定的主要设备为液相色谱-质谱联用仪。

2.3.3 液相色谱-质谱条件

使用色谱实验的过程中，条件为以下几点：将质量浓度为0.1%的乙酸溶液作为流动相A，将乙腈作为流动相B，流动梯度可以得出以下几点，速度一般会达到0.4 mL/min；并且保持温度为40 ℃。

3 结果与讨论

3.1 色谱条件的优化

优化内容包括比较常见的流动相水-甲醇、水-乙腈试剂，通过检测后发现，在使用水-甲醇体系作流动相时，溶液的灵敏度要远高于水-乙腈体系，所以可见分离的效果。

3.2 质谱条件的优化

在实验的过程中，使用负离子运作模式，联动MRM的模式，使用不同能量可以将被检测物质的分子和离子打碎，从而确定所需要的碰撞能量以及电压强度[2]。

3.3 色谱与质谱行为

当色谱—质谱已经确定之后，将色谱图绘制出来,从图中峰值的高低以及保存时间可以对物质种类准确判定。

3.4 线性关系及检出限

选取各标准品液体，采用混合方式准确配制出合适的混合标准液，优化后，对标准液检测三次，以各物质特征碎片离子（定量离子）峰面积的平均值(Y)对被测组分的质量浓度（X，μg/L）线性回归，求出具体的回归方程，同时将线性的关系明确表示出来；以信噪比（S/N）作为标准对每次的检测结果合理化分析。

3.5 样品稀释溶液的优化

在白酒的样品中，乙醇是主要存在物质，当采用液相色谱分离过程中，对甜味剂的保留时间以及方式可能会产生一定程度的影响。所以在实际的使用过程中，采取体积分数30%～80%乙醇溶液，对其中的甜味剂合理化检测，发现对甜味剂的保留时间以及方式产生的影响可以忽略不计。而且如果白酒样品中含有大量的甜味剂，会超出曲线的范围，直接用水对其稀释也可以直接测量。

3.6 方法线性范围和定量限

酒精体积分数为45%时，以空白白酒为基质，配制标准溶液，同时将甜味剂配制成所对应浓度的溶液，再将甜味剂的峰面积设立为纵坐标数值，甜味剂实际的质量浓度设立为横坐标的值，以此为基础实际对比分析，发现当甜味剂的浓度处于0.06～1.8 mg/L时，呈正相关，且相关性比较优异。根据3倍信噪比得出检出限的数值为1.8 μg/L，10倍信噪比可以得出定量限为0.06 mg/L。