浅谈显色培养基检测沙门氏菌的认识与体会

李玉 徐艳霞 孙红 孙婷媛

浅谈显色培养基检测沙门氏菌的认识与体会

李玉 徐艳霞 孙红 孙婷媛

目的总结显色培养基检测沙门氏菌方面一些初步认识与体会。方法通过查阅相关资料和相关检验实践体会，进行分析。结果沙门氏菌显色培养基种类、应用比对研究现状、注意事项等。结论沙门氏菌是影响食品公共卫生安全的重要因素之一，目前沙门氏菌检测方法主要包括传统标准检测方法、显色培养基法、免疫学法等。

显色培养基；沙门氏菌；认识与体会

显色培养基是近年来发展起来的一种新型培养基。在传统培养基制作基础上，添加了新型组合式特异性发色酶底物，当细菌生长代谢过程中产生的特异性酶特异性发色底物后，目标菌形成不同颜色的菌落，从而对目标菌得到快速的分离和鉴别，同时也可以进行计数。

沙门氏菌是重要食源性，目前沙门氏菌检测主要采用传统的生化方法，包括增菌、分离培养、生化鉴定、血清鉴定等多个步骤。耗费时间久，一般一周的时间，操作繁琐，准确度差，近年来沙门氏菌显色培养基以它的强选择性，操作简单、耗用时间短被大众所接受[1]。与其他显色培养基相比，接受度更好一些。经过长期使用显色培养基进行沙门氏菌检测的过程总结，以及查阅其他技术人员应用研究成果，得出以下几点体会[2-3]。

1 种类

1.1 进口沙门氏菌显色培养基

市面上的有法国科马嘉、法国AES、英国OXOID、美国BD等品牌，他们共同特点是菌落小、沙门氏菌与其他菌落颜色对比强烈。进口沙门氏菌显色培养基使用最广泛的是法国CHROMagar显色培养基，沙门氏菌显紫色。

1.2 国产沙门氏菌显色培养基

由于沙门氏菌显色培养基使用方便，减少检验技术工作量，国内很多培养基厂家都进行了自主研发，目前国产沙门氏显色培养基销量最大有北京陆桥、广东环凯、青岛海博。北京陆桥的颜色判断与法国科马嘉显色培养基相同：沙门氏菌为紫红色，非沙门氏菌是蓝绿色、无色或不生长。广东环凯沙门氏菌显色培养基2009年获得全国发明银奖。颜色判定为沙门氏菌为粉红色。大肠菌群和大肠杆菌显蓝色。枸橼酸杆菌显紫色。其他菌落显黄色或者无色。

2 应用研究

法国CHROMagar公司从1974年就开始研发显色培养基，沙门氏菌显色培养基是从2000年开始使用，使用研究有两大方面：一是沙门氏菌显色培养基与传统选择性培养基进行比对实验，从而得出沙门氏显色培养基可以取代传统选择性培养基的结论；二是国产沙门氏菌显色培养基与进口沙门氏菌显色培养基进行比对试验。

2.1 培养基及试剂

亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）、GN增菌液、沙门氏、志贺氏琼脂（SS、HE）、肠道增菌液。肠道综合双糖管及肠杆菌科鉴定编码等培养基试剂购自北京陆桥生物技术有限责任公司。沙门氏菌显色培养基（CAS）产自法国科马嘉公司，郑州博骞生物技术研究所分装。沙门氏菌、志贺氏菌、大肠埃希氏菌诊断血清购自兰州生物制品研究所。以上试剂均在有效期内。

2.2 主要仪器设备

生物安全柜、电热恒温培养箱、全自动高压灭菌锅、电子天平、显微镜。

2.3 方法

除培养基配制和显微镜观察外，其余操作过程均在100—1000级生物洁净室内。（1）菌株检测方法按照GB/T4789—2008中相应操作规程进行；（2）菌株的筛选和鉴定经过初筛在CAS、SS、HE分离平板上挑取相应的疑似菌落接种双糖鉴别生化管，初筛符合者，血清玻片凝集试验和镜检，系统生化鉴别实验。

3 讨论

沙门氏菌是引起食物中毒和肠道腹泻的病原菌之中一种，是重要的肠道病原菌[3-4]。它添加了特异的显色底物组合能更加准确检测出样品中含有的沙门氏菌，大大提高了检出率[5]。

目前传统的沙门氏菌检验主要采用传统的生化方法，包括亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液增菌，分离培养，生化鉴定，血清型鉴定等多个步骤，一般过程需要一周时间，操作复杂，已不能满足微生物快速检测的需要[6-8]，因此使用快速检测准确的沙门氏菌显色培养基来鉴定非常重要。

利用显色培养基鉴定微生物是近年来开发的新型快速检测技术，直接根据菌落颜色就可以对菌种做出初步鉴定，减少干扰因素。由于肠道门诊中采样及食物采样不规范，培养基的特异性有限等因素影响，使传统的分离方法的灵敏度有所降低。鉴于显色培养基快速、灵敏、高效等诸多优点，其作为一种新的微生物快速检测技术已经得到了广泛的认可。

沙门氏菌在CAS显色平板上菌落颜色为较易辨认的紫色，而非沙门氏菌表现为蓝色或灰白色，说明CAS平板的沙门氏菌检出率高于SS、HE平板，而且节省时间，简化了程序。由此可见，显色培养基是有价值的分离鉴定平板，可以作为传统平板的补充。

综上所述，CAS平板有易于鉴别，选择性好，它的优势远大于普通培养基的选择性，特别是突发公共卫生事件处理中，和有混合菌的沙门氏菌处理中，CAS平板是首选的，并能取得较好的结果。将显色培养基与传统检测方法结合对食源泉性致病菌进行快速检验已成为微生物快速检测技术发展的重要方向。

[1] 徐潇，林兰，崔生辉，等．食品中致病菌常用检测技术分析[J]．中国药事，2012，26（2）：185-190．

[2] 徐建国． 现代细菌学[M]． 北京：科学出版社，2011：115-148．

[3] 高路，何聪芬，李萌，等．金黄色葡萄球菌快速检测技术的研究进展[J]．食品科学技术学报，2014，32（2）：51-55，71．

[4] 陈伯祥． 沙门氏菌检验技术的研究进展[J]． 国外畜牧学-猪与禽，2010，30（1）：101-102．

[5] 孙园园，赵鹏，刘骏沙，等． 沙门氏菌检测方法研究进展[J]． 中国畜牧兽医，2011，38（1）：218-221．

[6] 安静． 应用显色培养基检测沙门氏菌的初步研究[J]． 中国中医药咨讯，2011，3（4）：38．

[7] 马永，陈建辉，杨宁． 沙门氏菌显色培养基在从业人员健康体检中应用比对研究[J]． 医学信息，2013，26（12）：91．

[8] 廖茂彬，陈向标，赖明河，等．食品中菌落总数的国标法测定注意事项及微生物快速测试卡法检测[J]．中国食物与营养，2013，19（7）：16-18．

Discussion on the Recognition and Experience of the Detection of Salmonella in the Color Development Medium

LI Yu XU Yanxia SUN Hong SUN Tingyuan Department of Bacterial Laboratory, Harbin Center for Disease Control and Prevention, Harbin Heilongjiang 150036, China

ObjectiveTo summarize in chromogenic medium for detection of Salmonella has some preliminary knowledge and experience.MethodsThrough access to relevant information and related test practice, analysis.ResultsSalmonella chromogenic culture medium, application research on status quo, matters needing attention.ConclusionSalmonella Salmonella is one of the important factors affecting the food security of public health, the current detection methods of Salmonella detection methods,including traditional standard color medium method, immunological method etc. The recognition and experience of the detection of salmonella in the color medium is summarized.

color medium; salmonella; knowledge and experience

R446．1

A

1674-9316（2017）01-0104-03

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．01．069

哈尔滨市疾病预防控制中心细菌检验科，黑龙江 哈尔滨150036