人乳头瘤病毒检测与宫颈癌预防新进展

林思屹 里进

人乳头瘤病毒检测与宫颈癌预防新进展

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目的人乳头状瘤病毒（human papilloma virus，HPV）已经被证实是宫颈癌、生殖道和部分口咽部肿瘤的致病因素，其中宫颈癌是女性常见肿瘤，在发展中国家宫颈癌的发病率和死亡率在女性所有肿瘤中均居第2位，仅次于乳腺癌。目前为止，研究已发现HPV病毒有150～200种型别。很多研究都已表明人乳头瘤状病毒感染尤其是高危型HPV是宫颈癌及癌前病变的主要因素，所以病因学在防治宫颈癌的过程中就显得尤其重要。现文就HPV的致病机制、相关疾病的流行病学特征、最新检测手段及其预防措施做一阐述。

人乳头瘤病毒；传染病预防；分子诊断：疫苗

宫颈癌是世界上众多癌症中较少有明确病因的恶性肿瘤，自从1974年德国病毒学家哈拉尔德·楚尔·豪森提出人乳头瘤状病毒（HPV）感染与宫颈癌发生存在密切关系以来[1]，病因学在防治宫颈癌的过程中就显得尤其重要[2]，本文就HPV的致病机制、相关疾病的流行病学特征、最新检测手段及其预防措施做详细阐述。

1 HPV的致病机制

性接触传播是HPV的主要传播方式，也有少数通过消化道或母婴传播。HPV具有高度的宿主特异性，主要感染人体特异部位皮肤、黏膜的复层鳞状上皮。HPV通过微小的创口侵入生殖道基底细胞后，在基底细胞内复制，随基底细胞的分化成熟逐渐向表层移动。HPV的复制过程依赖于角质细胞的分化，角化的上皮细胞很快脱落，不能有效激活免疫系统，因此目前还不能成功体外培养HPV[3]。

从分子机制上来看，高危型HPV 导致癌变的主要分子在于E6、E7基因编码的蛋白，E6蛋白能特异性结合p53蛋白形成复合物，促使p53蛋白快速降解，从而导致细胞周期失控；E7蛋白和pRb有亲和性，使G1期进入S期所需基因得以转录，细胞周期失控进而发生细胞永生化。因此，HPV高危型的感染诱发细胞恶性增殖，即发生癌变[4]。

2 HPV与相关疾病的流行病学特征

HPV在年轻成年女性中的流行率为40%～80%，并且女性一生中感染HPV概率为80%～90%。据调查，我国人群HPV感染率约为15%，HPV感染率随年龄变化呈双峰状态，城市和农村感染率第一个高峰都出现在17～24岁，城市第二个感染率高峰在40～44岁，而农村感染率在45～49岁达第二次高峰[5]。

HPV相关的疾病有很多，最常见的除了宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈癌外，还有泌尿生殖系统疣、寻常疣、扁平疣等良性疾病，以及口咽癌，外阴、阴茎等部位的癌症，具体参见表1。据2012年世界卫生组织（WHO）公布的数据显示，估计每年宫颈癌新发病例约53万人，占所有癌症死亡女性的7.5%，中国是宫颈癌高发地区，每年新发病例约6.2万，死亡病例约3万[6]。

3 HPV检测方法的进展

鉴于HPV检测对于诊断宫颈癌及癌前病变的重要意义，HPV检测方法也在不断改进之中，探索快速、灵敏地对尽可能多的基因型进行高通量分型的方法是近年来国内外的研究热点。分子检测技术的发展使HPV检测进入了新的时代，使用PCR技术进行HPV-DNA的检测使得标本来源不受限制，且能进行HPV分型并确诊。这些检测方法包括：PCR+膜杂交法（HybriMax）、实时荧光PCR法、基因芯片法、流式荧光杂交法（Luminex XMAP）、表面等离子体谐振技术（Surface Plasmon Resonance，SPR）和电离飞行时间质谱法（MALDI-TOF-MS）。其中，流式荧光杂交法、表面等离子体谐振技术和电离飞行时间质谱法为近几年用于HPV的新兴检测技术。Luminex公司的XMAP液相芯片技术核心原理类似流式细胞技术，通过荧光编码微球技术和共价交联技术将扩增产物-微球-探针-荧光素杂交成复合物，经Luminex流式仪对微球逐颗分析，可获得每种微球的编码及其对应荧光信号的种类和强弱。Luminex XMAP液相芯片具有反应时间短、高通量、无需洗涤等优点，受到了国内外临床实验室的广泛欢迎。表面等离子体谐振（SPR）技术是基于在某些金属（特别是金、银）界面上，光能够激发产生界面等离子波这一原理而研制的应用技术[7]。近几年来，SPR技术己渐渐从实验室走向临床应用。SPR技术采用PCR与SPR芯片核酸杂交相结合的方法检测HPV，并用生物传感技术检测杂交结果，提高了检测的特异性和灵敏性，重复性好，但成本较高（需要金薄膜），仅适合大样本量检测[8]。电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术检测临床HPV样本具有较好的灵敏性和特异性，但目前主要在研究阶段，还未进入临床应用[9]。

表1 HPV常见的临床疾病与HPV亚型

4 宫颈癌的预防

宫颈癌病因较明确，其筛查方法较完善，尽管各国对于HPV疫苗注射的指南有所不同，但都基本相似：始终强烈推荐患者在其医生的指导下选择性注射疫苗，效果最理想的是青年女性在第一次性生活之前注射疫苗，理论上来说，男性也应该注射HPV疫苗，从而减少HPV的传播[10]。

此外，要广泛开展预防子宫颈癌相关知识的宣教，增加公众对宫颈癌的认知，如多个性伴侣、吸烟、性生活过早（＜16岁）、性传播疾病、HPV感染等相关因素是宫颈癌发病诱因[11]。通过普及、规范子宫颈癌筛查进行二级预防，但并不是筛查频率越高越好，要小心仔细权衡筛查的预防作用与潜在的风险，争取效用最大化的同时尽量降低风险。由美国妇产科医师学会（ACOG）制定并发表在《Obstetrics & Gynecology》2016年月刊上的最新宫颈癌筛查指南并不建议女性每年进行一次宫颈癌筛查，推荐了如下筛查方案[12]：不论女性第一次性生活的年龄如何，不推荐21岁以下的女性筛查宫颈癌，除非是HIV携带者；21～29岁女性推荐每3年进行一次细胞学筛查；30～65岁女性推荐每5年做一次细胞学与HPV联合筛查，也可继续选择21～29岁的筛查方案；年龄超过65岁的女性若既往筛查结果均为阴性，可以停止筛查。由于各地区宫颈癌流行特征不同，临床医生可以根据具体情况不同而作出具体调整。

综上所述，对我国特定地区人群HPV感染情况及HPV型别分布调查，有利于该地区宫颈癌防治工作的开展，并且可探索HPV感染率与年龄等危险因素的关系、HPV型别与宫颈癌病理类型的特异性，为宫颈癌预防提供指导性意见。

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Advances in Human Papillomavirus (HPV) Detection and Cervical Cancer Prevention

LIN Siyi1LI Jin21 Clinical Laboratory, The Third People's Hospital of M ianyang, M ianyang Sichuan 621000, China, 2 Clinical Laboratory, Zhongnan Hospital of Wuhan University, Wuhan Hubei 430071, China

HPV has been show n to be anogenital cancers, especially cervical cancer, and some pathogenic factors of oropharyngeal tumours. Cervical cancer is the most common cancer in women in developing countries. The incidence and mortality of women in all tumors were ranked second, second only to breast cancer. It has been found that the HPV type has 150 to 200 kinds. From then on, many studies have found that HPV infection, especially high-oncogenic risk HPV infection, is the major cause of cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia. Thus, etiology plays a significant role in the prevention and treatment of cervical cancer. In the follow ing, the mechanism of HPV infection, epidemiology of HPV-related diseases, the latest HPV testing methods and prevention measures w ill be presented.

HPV, Epidemic prevention, Molecular diagnosis, Vaccine

R737．33

A

1674-9308（2016）35-0043-03

10．3969/j．issn．1674-9308．2016．35．022

武汉大学自主科研基金（青年项目），2042014kf0143

1 绵阳市第三人民医院检验科，四川 绵阳 621000；2 武汉大学中南医院检验科，湖北 武汉 430071

里进，E-mail：wb001030@whu．edu．cn