裸鼠移植瘤造模注意事项
2017-01-17黄昊
中国比较医学杂志 2017年3期
·专家问答·
裸鼠移植瘤造模注意事项
问:裸鼠移植瘤造模的注意事项
答:1. 实验要严格遵照无菌操作原则,所有手术器械和物品要在使用前严格消毒灭菌,且实验要在超净工作台内完成;
2. 皮下移植瘤、手术切除的肿瘤组织、培养的肿瘤细胞等移植物要快速进行处理及移植,尽可能在2h之内完成,为防止污染,可使用少许抗生素;
3. 肿瘤细胞株皮下接种时要取对数生长期细胞,活细胞数大于95%,用无血清的培养基、PBS或生理盐水调整细胞浓度,制备成所需的细胞悬液,每只小鼠接种体积通常为0.1-0.2 mL;
4. 肿瘤细胞株皮下移植的部位较多,可选择接种皮肤松弛、血供良好、肿瘤生长后圆整度好、且易于实验操作和观察、便于测量肿瘤体积的部位,如腋窝、大腿外侧、颈背部等皮下部位;
5. 肿瘤组织接种时要注意,所取的肿瘤组织需新鲜、生长良好,尽可能剔除包膜和坏死的肿瘤组织;
6. 实验中如需使用麻醉剂,要根据实验时间长短选择适当的麻醉剂,同时需要注意麻醉剂的用量,以达到对动物机体干扰最小而疼痛抑制效果最大为最佳;
7. 裸鼠需要原位移植肿瘤时,脏器手术应使用较细的可吸收缝合线以减少对脏器的损伤,术后应连续三天给予抗生素以防感染;
8. 手术后的动物要与清醒的动物分开饲养,以免挤压、踩踏、咬伤,待小鼠度过术后恢复期后按实验需要分组饲养;
9. 移植肿瘤后要加强对动物的护理,应注意保持动物实验室合适的温度、湿度,以及笼具、垫料、饲料和饮水等物品的洁净;
10. 裸鼠皮下移植瘤模型利于观察肿瘤的生长情况,注意肿瘤生长不宜太大(直径应小于<1.5 cm)。
(感谢中国医学科学院医学实验动物研究所黄昊的解答)