春秋季节集中监测样品的采集

2017-01-17罗宏琴

中国畜牧兽医文摘 2017年11期

关键词：免疫抗体离心管病原学

罗青罗宏琴

（安顺市动物疫病预防控制中心，贵州安顺 561000）

春秋季节集中监测样品的采集

罗青罗宏琴

（安顺市动物疫病预防控制中心，贵州安顺 561000）

样品的采集作为春秋季集中监测工作的前提和基础，一般在家禽免疫21d、猪免疫28d、其他家畜免疫21d后采集血样，进行抗体检测，根据病原学要求进行相应的具有代表性的样品采集、保证样品的保存和运输符合规定，不出现污染状况，确保实验室检测结果的准确性和可靠性，保证春秋季集中监测样品采集工作的有效完成。

动物疫病集中监测样品采集

为了更好地了解辖区内动物疫病存在情况、分布情况、免疫状况等状况，安顺市动物疫病预防控制中心每年都根据农业部的要求进行春秋两季集中监测（免疫抗体监测和病原学检测），通过监测数据显示，进而对疫病动态、疫病发生的可能性等情况做出风险评估，进行相应的整改方案制定。为了确保实验室检测数据的准确性和可靠性，做好样品采集工作至关重要。做好样品采集工作是保证春秋两季集中监测工作得以有效开展的前提和基础。

1 根据不同检测目的采集相应样品

春秋季集中监测的样品采集一般进行的是活体采样，以下样品采集均是进行活体动物采样。

1.1 免疫抗体监测样品采集

免疫抗体监测需要采集猪、牛、羊、禽的血液制备血清进行相应的抗体监测。

集中监测中各动物采血位置：牛、羊从颈静脉或尾静脉采血，猪从前腔静脉或耳静脉采血；家禽从翅下静脉采血。

血清样品制备：采集的血液在室温下倾斜放置2～4h（防止暴晒），待血液凝固自然析出血清，或用无菌剥离针剥离血凝块，必要时经1500～2000r/min离心5min，分离血清。吸出血清放入2ml灭菌离心管中，密封保存。

1.2 病原学检测样品采集

1.2.1 禽流感病原学检测样品采集

禽流感病原学检测需要采集禽双棉拭子（咽喉拭子和泄殖腔拭子）。尤其以泄殖腔拭子更容易分离到病毒，对于检测结果更有意义。对于体积小的禽，用拭子取样易造成损伤，可以采集新鲜粪便作为样品。

双棉拭子采集方法：将同一家禽的咽喉拭子和泄殖腔拭子一并放入同一个加有1ml PBS（含抗生素）2ml离心管中，盖上管盖，用防水记号笔做好标记。

野禽或珍禽采集新鲜粪便样品（每个样品1～2g），置于内有1mlPBS（含抗生素）的2ml离心管中，盖上管盖，用防水记号笔做好标记。

1.2.2 猪瘟、高致病性猪蓝耳病、猪口蹄疫病原学检测样品采集

猪瘟、高致病性猪蓝耳病、猪口蹄疫样品采集可相结合采集，一般采集颌下淋巴结、扁桃体和血清样品。

扁桃体的采集方法：先用开口器开口，看到突起的扁桃体后，把采样钩放在扁桃体上，快速扣动扳机取出扁桃体放入灭菌离心管中。

1.2.3 羊小反刍兽疫病原学检测样品采集

采集样品是口、鼻、眼棉拭子和血清。

1.2.4 牛、羊口蹄疫病原学检测样品采集

牛、羊采集食道—咽部分泌物（O-P液）和血清样品。

牛、羊O-P液的采集方法：将探杯随动物的吞咽动作送入食道上部10～15cm出，轻轻来回移动2～3次，然后将探杯拉出。将探杯采集到的O-P液倒出4～6ml移入10ml的放有PBS液的灭菌离心管中，加盖密封摇匀。

2 样品标记和采样登记

用防水记号笔清楚标明每份样品。样品采集的同时，应填写采样单。采样单登记应含有的内容：采样点负责人姓名、地址、电话；采样的动物畜种、品种、年龄和性别；样品的包装、名称、数量以及样品编号；样品采集的动物群体健康状况的描述；样品采集的动物群体免疫状况的描述；采样的目的；样品采集的日期、采样人与采样点负责人签字。

3 样品采集时间

进行免疫抗体监测，合理的样品采集时间对实验结果有重要意义。畜禽接种疫苗后，需要一定的时间才能在体内产生抗体并达到稳定水平。一般情况下禽免疫21d后、猪免疫28d后、其他畜免疫21d后，才能采血进行免疫效果监测。

4 样品采集数量合理

首先，每种样品采集的总数量要能达到任务要求；其次每一份样品的量要充足，有的样品要进行几项不同的试验或者有复查的情况出现，所以，每份样品的量一定要充足；再次，每一个养殖场要根据存栏量的一定百分比进行采样，存栏量万只以下的畜禽场1%，存栏量万只以上的畜禽场0.5%的比例进行采样，但每个场每次监测数量不少于20份。