麝香风湿跌打膏质量标准研究

王 静，吴贵华，王 杰

(天津市药品检验所，天津 300070)

麝香风湿跌打膏质量标准研究

王 静，吴贵华，王 杰

(天津市药品检验所，天津 300070)

目的：建立麝香风湿跌打膏的质量标准。方法：采用薄层色谱法鉴别麝香风湿跌打膏中的川芎；采用气相色谱法测定制剂中龙脑和薄荷脑的含量。结果：薄层色谱法鉴别色谱特征斑点清晰；气相色谱法测得龙脑在0.099 06～0.990 62 mg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 9，n=6)，平均回收率为101.9%， RSD为1.9%；薄荷脑在0.141 04～1.410 40 mg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 9，n=6)，平均回收率为103.2%，RSD为1.3%。结论：该方法快速简便，准确可靠，专属性强，重复性好，可用于麝香风湿跌打膏的质量控制。

麝香风湿跌打膏，质量标准，龙脑，薄荷脑

麝香风湿跌打膏收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第十九册，是由乳香、没药、麝香、冰片、薄荷脑、川芎等16味药组成，具有祛风散寒、除湿、活血化瘀、止痛的功效，用于风湿疼痛、受风受寒、肌肉痛、腰背痛、跌打损伤、扭伤等症。其主要有效成分为挥发油类物质，主要镇痛消炎成分为冰片、薄荷脑等。鉴于目前尚无对麝香风湿跌打膏的有效成分进行相关报道的文献，本试验建立了麝香风湿跌打膏中川芎的薄层鉴别方法，并建立了冰片及薄荷脑的含量测定方法，以期对麝香风湿跌打膏的质量作出科学的评价，从而为其质量控制提供有效的检测手段。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 7890A气相色谱仪，色谱柱:弹性石英毛细管柱 INNOWAX(30 m×0.53 mm，1 μm)；检测器:氢火焰离子化检测器；XWK-Ⅲ无油空气泵(天津市津分分析仪器制造有限公司)；SHC-Ⅱ全自动高纯氢气发生器(天津市津分分析仪器制造有限公司)；AG-135电子分析天平(瑞士梅特勒公司)；薄层点样仪(CAMAG公司)。

1.2 试药 龙脑对照品(供含量测定用，批号110881-201107，纯度：99.3%)、薄荷脑对照品(供含量测定用，批号0728-200005)、川芎对照药材(供薄层鉴别用，批号120918-201411)，均购自中国药品生物制品检定所；甲醇为色谱纯(天津市康科德科技有限公司)；其余试剂均为分析纯。麝香风湿跌打膏(批号C90001、DX07001、DX07002，规格6.5×9.5 cm，天津同仁堂集团股份有限公司)。

2 方法与结果

2.1 川芎的薄层鉴别 取本品1片，除去盖衬，剪成小块，加乙酸乙酯15 ml，超声处理10 min，倾出溶液，低温蒸干，残渣加甲醇10 ml、乙酸乙酯2 ml充分搅拌，离心(转速为3 000 r/min)10 min，取上清液低温蒸干，残渣加甲醇3 ml，充分搅拌，滤过，滤液作为供试品溶液。另取川芎对照药材0.5 g，加乙酸乙酯10 ml，超声处理10 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为对照药材溶液。按处方配比，取除川芎以外的其他药味按工艺制得贴膏剂，再按上述供试品溶液制备方法制得川芎阴性样品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述溶液各4～6 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(9∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性样品无干扰。结果见图1。

不同薄层板比较(默克板) 不同薄层板比较(烟台板)

高湿环境展开 低温环境展开

1.样C90001 6 μl 2.样DX07001 6 μl 3.样DX07002 6 μl 4.川芎对照药材4 μl 5.阴性对照样品6 μl

图1 川芎TLC色谱图

2.2 含量测定

2.2.1 色谱条件 色谱柱：INNOWAX(30 m×0.53 mm，1 μm)；进样口：200 ℃，分流比：20∶1；检测器：氢火焰离子化检测器(FID)，220 ℃；柱温： 160 ℃。

2.2.2 溶液的制备

2.2.2.1 内标溶液及对照品溶液的制备 取正十四烷适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1 ml含0.8 mg的溶液，作为内标溶液。另取薄荷脑对照品、龙脑对照品各适量，精密称定，加内标溶液制成每1 ml含薄荷脑对照品0.7 mg、龙脑对照品0.5 mg的混合溶液，作为对照品溶液。

2.2.2.2 供试品溶液的制备 取同一批号(DX07001)样品适量，除去盖衬，剪碎，取约1.5 g，精密称定，精密加入内标溶液20 ml，摇匀，称定重量，超声处理(功率150 W，频率20 kHz)40 min，取出，立即在冷水中放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，滤液作为供试品溶液。

2.2.2.3 阴性样品溶液的制备 按处方分别取除薄荷脑或冰片的各味药材，按“制法”制得样品，再按“2.2.2.2”项下供试品溶液制备方法，分别制得薄荷脑阴性样品溶液和冰片阴性样品溶液。分别吸取上述溶液1 μl，注入气相色谱仪，按“2.2.1”项下色谱条件测定。色谱图见图2。

1.正十四烷 2.薄荷脑 3.龙脑图2 薄荷脑对照品(A) 龙脑对照品(B)混合对照品(C)供试品(D) 缺薄荷脑阴性样品(E)缺冰片阴性样品(F)气相色谱图

2.2.3 标准曲线的制备 取薄荷脑及龙脑对照品适量，精密称定，加上述内标溶液制成每1 ml含薄荷脑对照品1.410 40 mg和龙脑对照品0.990 62 mg的混合溶液，作为对照品储备液。分别精密吸取对照品贮备液6、3、2、1.5和1 ml至10 ml量瓶中，用上述内标溶液稀释至刻度，摇匀。分别吸取对照品贮备液和上述系列对照品溶液各1 μl，注入气相色谱仪，以龙脑或薄荷脑与内标物峰面积的比值对龙脑或薄荷脑浓度做线性回归，得龙脑回归方程为Y=1.018 5X-0.006 8(r=0.999 9)；薄荷脑回归方程为Y=1.061 7X-0.017 3(r=0.999 9)。结果表明龙脑在0.099 06～0.990 62 mg/ml、薄荷脑在0.141 04～1.410 40 mg/ml范围内线性关系良好。

2.2.4 精密度试验 取同一批号(DX07001)样品适量，除去盖衬，剪碎，取约1.5 g，精密称定，按照“2.2.2.2”项下供试品溶液制备操作，按“2.2.1”项下色谱条件分析，连续进样6次，测定样品中薄荷脑和龙脑的含量。结果样品中薄荷脑平均含量为13.850 1 mg/g，RSD为0.4%；龙脑平均含量为11.284 5 mg/g，RSD为1.0%，符合要求。表明供试品溶液在10 h内稳定。

2.2.5 重现性试验 取同一批号(DX07001)样品适量，除去盖衬，剪碎，取约1.5 g，精密称定，共6份，按照“2.2.2.2”项下供试品溶液制备操作，按“2.2.1”项下色谱条件分析，测定每份样品中薄荷脑和龙脑的含量。结果样品中薄荷脑平均含量为13.708 8 mg/g，RSD为0.84%；龙脑平均含量为10.898 1 mg/g，RSD为2.0%，符合要求。

2.2.6 稳定性试验 取同一批号(DX07001)样品适量，除去盖衬，剪碎，取约1.5 g，精密称定，按照“2.2.2.2”项下供试品溶液制备操作，按“2.2.1”项下色谱条件分析，分别在0、2、4、6、8和10 h，测定样品中薄荷脑和龙脑的含量。结果样品中薄荷脑平均含量为13.427 0 mg/g，RSD为1.1%；龙脑平均含量为10.232 1 mg/g，RSD为1.9%，符合要求，表明供试品在10 h内稳定。

2.2.7 回收率试验 取同一批号(DX07001)样品适量，除去盖衬，剪碎，取约0.75 g，精密称定，共6份，分别精密加入供加样回收用对照品乙酸乙酯溶液(薄荷脑浓度为0.513 6 mg/ml，龙脑浓度为0.411 1 mg/ml，正十四烷浓度0.785 65 mg/ml)20 ml，按照“2.2.2.2”项下供试品溶液制备操作，制得供回收率用供试品溶液，按“2.2.1”项下色谱条件分析，计算回收率，结果测得薄荷脑平均回收率为103.2%，RSD为1.3%；龙脑平均回收率为101.9%，RSD为1.9%。符合试验要求。见表1和表2。

2.2.8 样品测定 取3个批号的样品，按照“2.2.2.2”项下供试品溶液制备操作，按“2.2.1”项下色谱条件分析,测定样品中薄荷脑、龙脑含量。结果见表3和表4。

表1 薄荷脑回收率试验结果(n=6)

表2 龙脑回收率试验结果(n=6)

表3 3批样品薄荷脑含量测定结果(n=2)

表4 3批样品龙脑含量测定结果(n=2)

3 讨论

3.1 TLC鉴别试验中，本试验以乙酸乙酯直接提取样品制备川芎TLC鉴别用的供试品溶液，结果TLC斑点清晰，重现性好，且操作简单，专属性强。

3.2 在TLC试验中，本试验分别以甲醇[1]、水饱和的正丁醇[2]、三氯甲烷[3]、乙酸乙酯提取供试品中的羌活、独活、莪术，但是均有斑点干扰，专属性不强，故未列入TLC中。

3.3 本试验在对冰片和薄荷脑进行含量测定期间，曾分别采用萘[4]、正十四烷、十八烷、水杨酸甲酯[5]作为内标物，分别对薄荷脑及龙脑进行含量测定，但是只有正十四烷分离效果好，故采取正十四烷作为内标物。

3.4 在龙脑与薄荷脑含量测定方面分别考查了以甲醇、无水乙醇和乙酸乙酯为提取溶剂进行提取，结果显示使用甲醇和无水乙醇为提取溶剂，含量测定结果较低，且相对偏差(RAD)值较大；采用乙酸乙酯提取，测定的含量最高，故本试验提取溶剂定为乙酸乙酯。受样品基质的影响,试验中采用乙醚或三氯甲烷作为提取溶剂，提出的溶液含胶质多，溶液浑浊，影响含量的测定，故未选择乙醚或三氯甲烷作为提取溶剂。

3.5 在龙脑与薄荷脑含量测定方面分别考查了采用超声处理与回流提取不同的提取方式，其测定结果基本相同，不同提取方式对样品测定结果无明显影响。为试验操作方便简捷，故将超声提取定为本测定方法的提取方法。

3.6 提取时间分别考查了20、40和60 min，其含量测定结果无明显差异，故将40 min定为本测定方法的提取时间。

3.7 在龙脑与薄荷脑含量测定方面同时也考查了不同取样量之间的差别，分别取样1、1.5和2 g,其测定结果无明显差别，取样量为2 g的样品测定结果稍偏低，且相对偏差(RAD)值较大，可能与取样量大，影响了提取效能有关。而取样量为1 g和1.5 g的样品测定结果无明显差别，故本试验将取样量定为1.5 g。

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Study on quality control of shexiang fengshidieda plaster

Wang Jing，Wu Guihua，Wang Jie

(Tianjin Institute for Drug Control，Tianjin 300070)

Objective: To establish the quality standard for Shexiang Fengshidieda Plaster. Methods: The rhizome of chuanxiong in Shexiang Fengshidieda Plaster was identified by a TLC method. The contents of borneol and menthol were determined by GC. Results: The developed TLC spots were quite clear. Borneol showed a good linear relationship within a range of 0.099 06～0.990 62 mg/ml. The regression equation wasY=1.018 5X-0.006 8(r=0.999 9，n=6). The average recovery was 101.9% and RSD was 1.9%.Menthol showed a good linear relationship within a range of 0.141 04～1.410 40 mg/ml. The regression equation wasY=1.061 7X-0.017 3，(r=0.999 9，n=6). The average recovery was 103.2% and RSD 1.3%. Conclusions: This method is accurate, sensitive, specific and easily handled. It can be applied to quality control of Shexiang Fengshidieda Plaster.

Shexiang Fengshidieda Plaster， quality standard， borneol， menthol

2016-07-22

R927.1

A

1006-5687(2016)06-0018-04