超高效液相色谱法在中兽药检测中的应用

孙 思 王安波 杨 梅 汪 俭 刘文锋

(黔东南州农产品质量安全检测中心,贵州凯里 556000)

超高效液相色谱法在中兽药检测中的应用

孙 思 王安波 杨 梅 汪 俭 刘文锋*

(黔东南州农产品质量安全检测中心,贵州凯里 556000)

中兽药有着绿色天然、安全低毒、同时兼有营养及药用双重价值的优点，广泛地应用于畜禽生产中。但中兽药成分复杂、难以分离、基质干扰大，而超高效液相色谱法以其超高灵敏度和选择性的特点在中兽药分析方法中越来越受到重视。本文综述了超高效液相色谱法在中兽药测定方面的应用。

中兽药 超高效液相色谱法 检测

中兽药是我国传统医术指导畜禽疾病防治以及养殖下产生的应用药物，大部分来源于纯天然植物。我国中药材资源丰富，中兽药的功效优势不断被开发，对于中兽药的研究越来越受到关注。目前，中兽药的研究在我国仍属于新兴学科，对中兽药重要理论、成分分析及现代药理学应用等的研究缺失较大，药物成分相互干扰严重、分离时间长、分离难度大等问题尚不能完全解决。近年来，超高效液相色谱法（UPLC）因其快速、准确的特点，被众多中兽药药物分析者青睐，已成为中兽药药物分析中检测药品内在质量的关键。

1 中兽药研究现状

从20世纪90年代开始，西方学者不断发掘出中草药在治疗人和畜禽疾病方面的潜力，在中药开发上取得了巨大发展。美国研究者将红豆杉中提取出的紫杉醇运用于动物肿瘤治疗，效果良好，同时还从芦荟中提取乙酰甘露聚糖作为鸡马立克氏病疫苗佐剂，现已投产；荷兰学者从牛至草中提取的挥发油配置成牛至油预混剂可治疗家禽痢疾并促进生长。

我国启动“无公害食品行动计划”后，中兽药的应用范围就在不停地调整，以适应畜牧业高质量发展的要求。张素梅等[1]将黄芪散剂添加入断奶仔猪饲料中，发现不仅可以预防仔猪疾病还可以提高生产效率；还有学者用黄芩、黄芪、石膏等制成二黄散，可抑制鸡体内法氏囊传染性病毒；由白术、党参等组成的催乳保康散可以显著降低奶牛隐性乳腺炎的发病率。

2 UPLC概述

2004年，液相色谱技术突飞猛进，仪器和色谱技术的创新显著改进了色谱的分离度、速度和灵敏度。在HPLC的基础上将性能再次提高到一个新的层次，设计出了填有1.7μm小颗粒的色谱柱和能够承受15000 psi流动相的压力装置，打造出了一个全新的液相色谱系统—UPLC。如今，UPLC应用极为广泛，其中包括化学化工、医药学、生物、环境及食品等领域。近年来，许多国家都在研究开发新的检测技术，进一步扩大了UPLC在中药分析检测生命科学领域的应用。

3 UPLC在中兽药检测中的应用

UPLC克服了早期高效液相色谱法速度慢，柱效低的缺陷，更能适应中药、中成药的多样性、复杂性、分离难度大等分析特点，因而UPLC在中药化学成分分析方面得到了迅速的推广，成为一种非常有效和普遍适用的中药分析方法，对于UPLC在中兽药检测方面的应用更是迅速发展。

UPLC更能准确、高效地测定中兽药的含量。谢进等[2]比较了UPLC与HPLC在测定二黄散中不同小檗碱时的结果，发现UPLC整个测定只要3 min，进样量只需0.5 μl，得到的峰型完整、分离度好，缩短了样品检测时间，减少了流动相的消耗，在稳定性及重复性上均优于HPLC法。吴立蓉等[3]采用UPLC的方法检测了复方丹参片中皂苷类的成分，结果表明，相较于HPLC法，UPLC极大地缩减了检测时间，仅在12 min内就可以将中4种活性成分完全分离，提高了分析效率，可代替常规HPLC法进行检测。

UPLC还可用于中兽药制剂中非法添加化学物质及抗生素的检测。贾振民等[4]利用UPLC检测中兽药制剂中9种氟喹诺酮类药物，回收率为76.77%～90.31%，RSD为0.45%～4.86%，可实现完全分离，定量测定准确，重现性较好；还同时建立了中兽药制剂中检测四种喹噁啉类药物的方法，结果满意，适合中兽药制剂中喹噁啉类药物的测定；吴荔琴等[5]通过UPLC检测了止痢散、白头翁散、苍术香连散三种中药中隐形存在的氟苯尼考，回收率＞95%、定量准确。李应超等[5]采用UPLC检测了银翘散、健胃散、止痢散、白头翁散、荆防败毒散及苍术香连散六种中药违规添加的替米考星和泰乐菌素，其试验所建立的UPLC检测方法操作简单、快速而准确，适合大批量检测可从源头杜绝由于大环内酯类药物违规添加引起的动物源食品安全问题。

4 小结

自我国2005年颁布第一版药典，液相色谱法就逐渐成为中药检测中最常用的分析手段。中兽药不仅可以治疗疾病、促进动物生长，又不会产生危害人体健康的药物残留，必将在养殖业中得到更大范围的推广与应用。随着各种先进检测仪器与方法、联用检测技术及自动化技术不断改进，UPLC法会以更高效高敏感度和自动化等优点在中药成分分离与测定中发挥其他分析方法无与伦比的优势。

[1] 张素梅，崔保安，杨明凡，等.黄芪散剂与颗粒剂对仔猪生长性能及免疫力影响的比较[J].畜牧与兽医，2006，38（8）：46-47.

[2] 谢进，韩晋，张诗龙，等.黄连不同部位5种生物碱的含量比较[J].解放军医药学报，2011，27（2）：124-127.

[3] 吴立蓉，王秀凤，高卫东，等.超高效液相色谱法快速测定复方丹参片中皂苷成分的含量[J].广东药学院学报，2016，32（1）：32-35.

[4] 贾振民，陈蔷，宋志超，等.中兽药制剂中氟喹诺酮类药物检测方法的研究[J].2010，37（10）：190-193.

[5] 刘丹，齐双辉，马海英.UPLC在中药组分分析及代谢组学中的应用进展[J].中国药房，2016，（7）：973-975.

孙思（1989-），女，技术员，从事农产品质量安全检测工作。

刘文锋（1969-），男，农业推广研究员，从事农产品质量安全检测工作。