配合饲料与冰鲜桡足类对大黄鱼稚鱼生长、氨基酸及脂肪酸组成的影响

王跃斌，胡则辉，胡成硕，柴学军

（浙江省海洋水产研究所，浙江海洋大学海洋与渔业研究所，浙江省海水增养殖重点实验室，农业部重点渔场渔业资源科学观测实验站，浙江舟山 316021）

配合饲料与冰鲜桡足类对大黄鱼稚鱼生长、氨基酸及脂肪酸组成的影响

王跃斌，胡则辉，胡成硕，柴学军

（浙江省海洋水产研究所，浙江海洋大学海洋与渔业研究所，浙江省海水增养殖重点实验室，农业部重点渔场渔业资源科学观测实验站，浙江舟山 316021）

设置人工配合饲料、桡足类及二者交替投喂（2 h：2 h）三个饲料组饲养大黄鱼稚鱼[初始体长为（8.18±1.41）mm，体质量为（6.83±1.02）mg]，研究三个饲料组对大黄鱼稚鱼生长性能、氨基酸与脂肪酸组成的影响，养殖周期为8周。结果显示，混合组大黄鱼稚鱼存活率及生长性能优于配合饲料组，并明显优于桡足类组（P＜0.05）；三饲料组大黄鱼稚鱼氨基酸组成差异不明显；配合饲料组和混合组稚鱼脂肪酸组成明显优于桡足类组（P＜0.05），但二者之间差异不明显。由研究结果可知，大黄鱼稚鱼培育期间完全使用配合饲料或桡足类不能取得最为理想的培育效果，而桡足类与配合饲料混合使用可以提高大黄鱼稚鱼的成活率，促进大黄鱼稚鱼生长。

大黄鱼；配合饲料；桡足类；生长；营养

大黄鱼Pseudosciaena crocea属近海集群暖温性洄游鱼类，主要分布于我国黄海南部、东海、南海等海域，是我国传统的“四大海产鱼类”之一，具有重要的经济价值[1]。然而由于过度捕捞，大黄鱼资源急剧衰退，前景堪忧[1]。为保护大黄鱼资源，从上世纪80年代起，人们开始研究大黄鱼人工繁育技术，至今已取得诸多成果，对大黄鱼资源的丰富起到了重要作用[2-3]。目前，国内外海水鱼类的人工育苗主要使用轮虫（Rotifer）、卤虫（Anemia）、桡足类（Copepod）等生物饵料[4]。生物饵料在改善鱼类苗种培育效果方面起到了重要作用，但其存在营养成分不丰富、均衡，易携带致病菌，供应不稳定等缺点[4]。在传统的大黄鱼苗种繁育过程中需要使用桡足类，其也存在生物饵料的上述缺点，如浙江省舟山海域受地理环境的制约，桡足类等生物饵料很难在自然海域中获取，而需要大量的在外地购买，这直接导致了大黄鱼育苗的不稳定性及不确定性。开发取代生物饵料的人工配合饲料是鱼类苗种繁育的发展趋势，但以配合饲料替代桡足类饲喂大黄鱼稚鱼的报道仍然很少，本文对配合饲料与桡足类饲喂大黄鱼稚鱼存活、生长及氨基酸、脂肪酸组成的影响进行了研究，以期丰富配合饲料替代桡足类在大黄鱼苗种繁育中的应用方法，同时也为人工配合饲料的开发提供一定参考。

1 材料与方法

1.1 实验用鱼

实验鱼为2015年3月人工繁育苗种，选取体质健壮、规格一致的稚鱼用于实验，体长为（8.18±1.41）mm，体质量为（6.83±1.02）mg。

1.2 实验设计与饲养管理

实验于2015年4月11日至2015年6月6日在浙江省海水增养殖重点实验室西轩基地进行，实验周期为8周。实验用养殖容器为有效容积200 L（直径70 cm，高70 cm）的圆形塑料缸。设置3个饲料组，其中配合饲料组、冰鲜桡足类组为24 h内每隔2 h投喂1次；另1组混合组为配合饲料与冰鲜桡足类24 h内交替投喂，每2 h交替投喂1次，每次均为饱食投喂。每组3个平行，每个平行组放置大黄鱼稚鱼300 ind。实验期间水温24.8～25.2℃，盐度26～27，pH 7.8～8.1，自然光照，连续24 h充气，保持水中溶解氧含量5.0 mg/L以上。每天吸污2次，100%换水1次。实验所用配合饲料购自日本林兼产业株式会社，所用桡足类为购买的冰鲜饵料。其一般营养成分及氨基酸、脂肪酸组成分别见表1、表2和表3。

表1 实验饲料一般营养成分（干重）Tab.1 Nutrition composition of the experimental diets(dry matter) %

表2 实验饲料氨基酸组成（干重）Tab.2 Amino acids composition of the experimental diets(dry matter) %

表3 实验饲料脂肪酸组成（干重）Tab.3 Fatty acids composition of the experimental diets(dry matter)%

1.3 样品采集与测定

实验结束后停饲24 h，每缸随机取30 ind鱼测量体质量、体长。采用以下公式计算生长参数：

成活率（survival ratio，SR，%）=终末鱼数量/初始鱼数量×100%；

日均增长量（average daily length growth，DLG，mm/d）=（终末鱼体长-初始鱼体长）/饲养天数

相对增长率（relative growth rate of body length，RGRL，%）=（终末鱼体长-初始鱼体长）/初始鱼体长× 100%

瞬时增长率（Instantaneous growth rate，IGR，%）=（ln终末鱼体长-ln初始鱼体长）/饲养天数×100%

特定增长率（specific growth rate，SGR，%）=（ln终末平均体质量-ln初始平均体质量）/饲养天数×100%

绝对增长率（absolute growth rate，AGR，mg/d）=（终末平均体质量-初始平均体质量）/饲养天数

每缸随机取18 ind鱼采用组织捣碎机进行匀浆作为全鱼样本，每6 ind分别用于测定常规营养成分、氨基酸及脂肪酸组成，全鱼样品于-20℃保存待用。

水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分采用国标方法（GB/T 6435-1986、GB/T6432-1994、GB/T 6433-1994、GB/ T6438-1992）测定。

氨基酸的测定采用酸水解法，取样品0.5 g，用6 mol/L的盐酸于110℃下水解22 h过滤定容至50 mL，取0.5 mL真空干燥制作成样品，使用氨基酸自动分析仪（BECKMANR ，121MB，USA）测定样品氨基酸组成。

脂肪酸测定采用安捷伦GC—7820气相色谱仪测定，称取适量的样品，放入组织捣碎机中搅碎，真空干燥，干燥样品用苯—石油醚（体积比1:1）提取脂肪后，用0.4 mol/L氢氧化钾—甲醇液酯化30 min，然后热水浴浓缩，加水分层，上层液使用气相色谱法检测分析，并按面积归一化法计算脂肪酸各组分含量。气相色谱条件：30 m×0.320 mm×0.25 μm Agilent 19091J-413 GC Columns，柱箱温度210℃，检测器温度（FID）300℃，进样器温度250℃，载气为高纯N2，尾吹30 mL/min，氢气40 mL/min，空气450 mL/min。

1.4 数据处理

实验结果以平均值±标准差（Mean±SD）表示。所有数据采用SPSS 19.0统计软件进行Independent samples T-Test和One-way ANOVA分析，当P<0.05时为显著差异。

2 结果

2.1 配合饲料与桡足类对大黄鱼稚鱼生长性能的影响

配合饲料与桡足类对大黄鱼稚鱼生长性能的影响见表4。结果显示，混合组大黄鱼稚鱼成活率、绝对增长率最高，且与桡足类及配合饲料组均呈显著性差异（P＜0.05）。混合组日均增长量、相对增长率、瞬时增长率、特定增长率大于配合饲料组，但无显著性差异（P＞0.05）；桡足类组稚鱼各项生长参数与混合组、配合饲料组相比均最低，且呈显著性差异（P＜0.05）。

表4 配合饲料与桡足类对大黄鱼稚鱼生长性能的影响Tab.4 Effect of formula feed and copepod on growth performance of juvenile P.crocea

2.2 配合饲料与桡足类对大黄鱼稚鱼一般营养成分的影响

配合饲料与桡足类对大黄鱼稚鱼一般营养成分的影响见表5。结果显示，桡足类组、混合组及配合饲料组大黄鱼稚鱼（干重）粗蛋白、粗脂肪、灰分含量接近，相互间无显著性差异（P＞0.05）。

表5 配合饲料与桡足类对大黄鱼稚鱼一般营养成分的影响（干重）Tab.5 Effect of formula feed and copepod on proximate composition of juvenile P.crocea(dry matter)

2.3 配合饲料与桡足类对大黄鱼稚鱼氨基酸组成的影响

配合饲料鱼桡足类对大黄鱼稚鱼全鱼氨基酸组成的影响见表6。结果显示，桡足类组大黄鱼稚鱼脯氨酸、甘氨酸、胱氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、精氨酸含量较高，但与其它两组无显著性差异（P＞0.05）。混合组稚鱼天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸含量较高，但与其它两组无显著性差异（P＞0.05）。配合饲料组稚鱼各氨基酸含量较低，但与其它两组无显著性差异（P＞0.05）。混合组必需氨基酸与总氨基酸含量均最高，配合饲料组最低，但三饲料组之间无显著性差异（P＞0.05）。

表6 配合饲料与桡足类对大黄鱼稚鱼氨基酸组成的影响Tab.6 Effect of formula feed and copepod on amino acids composition of juvenile P.crocea %

配合饲料与桡足类对大黄鱼稚鱼全鱼脂肪酸组成的影响见表7。结果显示，配合饲料组大黄鱼稚鱼各饱和脂肪酸含量及总饱和脂肪酸含量均较其它两组高，配合饲料组与混合组间无显著性差异（P＞0.05），但二者均显著高于桡足类组（P＜0.05）。配合饲料组大黄鱼稚鱼单不饱和脂肪酸中C14:l n-5、C16:l n-7、C18: l n-9c、C20:1含量及总单不饱和脂肪酸含量均较其它两组高，配合饲料组与混合组间无显著性差异（P＞0.05），但二者均显著高于桡足类组（P＜0.05）。配合饲料组大黄鱼稚鱼EPA、DHA含量均高于其它两组，EPA含量与混合组无显著性差异（P＞0.05），但二者均显著高于桡足类组（P＜0.05），DHA含量则显著高于混合组与桡足类组（P＜0.05）。配合饲料组大黄鱼稚鱼n-3多不饱和脂肪酸总含量与多不饱和脂肪酸总含量均高于其它两组，n-3多不饱和脂肪酸总含量与混合组无显著性差异（P＞0.05），但二者均显著高于桡足类组，多不饱和脂肪酸总含量则显著高于混合组与桡足类组（P＜0.05）。

3 讨论

配合饲料与生物饵料对鱼类的生长与存活会产生一定影响。赵金柱等[1]研究了微粒饲料替代生物饵料对大黄鱼稚鱼存活、生长的影响，发现微粒饲料替代生物饵料显著影响大黄鱼稚鱼存活、生长与体成分。张雅芝等[5]采用不同饵料饲喂的花鲈Lateolabrax japonicus稚鱼生长发育及存活进行了研究，发现配合饲料组花鲈稚鱼的生长及生活率等各项指标均较生物饵料组低。史会来等[6]发现饲喂配合饲料的舟山牙鲆Paralichthys olivaceus仔稚鱼成活率与饲喂生物饵料的稚鱼成活率间无显著性差异。本研究中，混合组大黄鱼稚鱼成活率最高，配合饲料组次之，桡足类组最低，且三者成活率呈显著性差异（P＜0.05）；混合组生长参数总体上高于配合饲料组，并显著高于桡足类组（P＜0.05）。可见，采用配合饲料与桡足类混合投喂比单一投喂配合饲料或桡足类更有利于提高大黄鱼稚鱼存活及生长速度，具体的混合比例与投喂策略有待进一步研究。

表7 配合饲料与桡足类对大黄鱼稚鱼脂肪酸组成的影响Tab.7 Effect of formula feed and copepod on fatty acids composition of juvenile P.crocea %

蛋白质是鱼类生长所必需的营养物质，而鱼类对蛋白质的需要其实主要是对必需氨基酸的需要。必需氨基酸（essential amino acid）是指在体内不能合成，或合成的量不能满足机体需要，必须从外界摄入的氨基酸。鱼类必需氨基酸主要有精氨酸（Arg）、组氨酸（His）、异亮氨酸（Ile）、亮氨酸（Leu）、赖氨酸（Lys）、蛋氨酸（Met）、苯丙氨酸（Phe）、苏氨酸（Thr）、缬氨酸（Val）、色氨酸（Trp）[7]，鱼类对必需氨基酸需要量之间存在一定的比例关系，使鱼体蛋白质沉积达到最大的必需氨基酸比例称为鱼的最佳氨基酸模式[8-9]。不同饲料往往具有不同的营养组成，对鱼体氨基酸组成等会造成一定影响[10-12]。本研究中三饲料组大黄鱼稚鱼粗蛋白含量接近，差异不显著（P＞0.05）。并且，实验所用配合饲料蛋白总量、氨基酸含量及必需氨基酸含量最高，混合组次之，桡足类组最低，混合组大黄鱼稚鱼必需氨基酸组成略高，但各实验组稚鱼的必需氨基酸及非必需氨基酸组成没有显著性差异（P＞0.05），即单独使用配合饲料或桡足类及二者混合投喂均没有对大黄鱼稚鱼各氨基酸含量造成明显影响。氨基酸与蛋白质合成及其它生理活动密切相关，不同饲料组大黄鱼稚鱼各氨基酸含量无明显差异，说明各饲料组稚鱼氨基酸代谢生理状态可能较为接近。在氨基酸代谢生理状态较为接近的情况下，混合组成活率及生长性能最好，则可能是因为在本实验条件下决定大黄鱼稚鱼成活率及生长性能的因素并非饲料的蛋白质营养组成，而是其它因素，如饲料的其它营养成分、氨基酸模式、饲料的物理特性等。

徐树德等[13]使用不同饲料饲喂黄斑篮子鱼Siganus canaliculatus幼鱼发现不同饲料的黄斑篮子鱼幼鱼肌肉脂肪酸含量有所不同。朱庆国等[14]通过饲料中添加不同水平的n-3HUFA饲喂斜带石斑鱼Epinephlus coioides幼鱼，发现斜带石斑鱼幼鱼肌肉中n-3HUFA随饲料n-3HUFA水平的增加而增加。易新文等[15]发现菜籽油替代鱼油对大黄鱼肌肉脂肪酸造成了显著影响。可见鱼体脂肪酸含量会受到饲料的影响。本研究中，桡足类组、混合组、配合饲料组脂肪酸含量依次增加，各组大黄鱼稚鱼脂肪酸含量也表现出增加趋势，大黄鱼稚鱼随着饲料中脂肪酸含量的增加体内脂肪酸组成也受到了影响。诸多研究表明，n-3高度不饱和脂肪酸是海水仔稚鱼生长发育所必需的脂肪酸，仔稚鱼不能合成，只能从饲料中获取，其中DHA、EPA最为重要[16]。n-6系列中的ARA在仔稚鱼的生长发育中也有一定作用[17-18]。本研究中，桡足类组大黄鱼稚鱼EPA、DHA含量显著低于混合组及配合饲料组（P＜0.05），配合饲料组大黄鱼稚鱼DHA含量显著高于混合组（P＜0.05），ARA含量三组间无显著性差异（P＞0.05），多不饱和脂肪酸总量也以配合饲料组大黄鱼稚鱼为最高，说明配合饲料与混合组比单独投喂桡足类更能促进大黄鱼稚鱼脂肪酸的积累，可能更满足大黄鱼稚鱼对脂肪酸的需求。配合饲料组大黄鱼稚鱼体内脂肪酸含量虽然较其它两饲料组高，但该组成活率及生长参数却低于混合组。可见，配合饲料虽然营养成分丰富，较桡足类有一定优势，但在大黄鱼稚鱼培育期间完全使用配合饲料不能取得最为理想的培育效果，而桡足类与配合饲料混合使用可以提高大黄鱼稚鱼的成活率，促进大黄鱼稚鱼生长，配合饲料与桡足类的混合比例与投喂策略值得深入研究。

[1]赵金柱,艾庆辉,麦康森,等.微粒饲料替代生物饵料对大黄鱼稚鱼生长、存活和消化酶活力的影响[J].水产学报,2008,32 (1):91-97.

[2]姜志强,张 弼,考 伟.大黄鱼人工育苗研究[J].水产科学,2001,20(3):15-16.

[3]于海瑞,麦康森,段青源,等.人工育苗条件下大黄鱼仔、稚、幼鱼的摄食鱼生长[J].中国水产科学,2003,10(6):495-501.

[4]孙瑞建,张文兵,徐 玮,等.饲料蛋白质水平与投喂频率对大黄鱼生长、体组成及蛋白质代谢的影响[J].水生生物学报, 2013,37(2):281-289.

[5]张雅芝,刘 卫.不同饵料对花鲈稚鱼生长发育及存活的影响[J].集美大学学报:自然科学版,2003,8(2):123-129.

[6]史会来,楼 宝,毛国民,等.不同饵料对舟山牙鲆仔稚鱼生长发育及存活的影响 [J].上海水产大学学报,2008,17(6): 680-683.

[7]杨俊玲,徐奇友.鱼类氨基酸需要研究进展[J].饲料工业,2009,30(24):51-54.

[8]BOISEN S,HVELPLUND T,WEISBJERG M R.Ideal amino acid acid profiles as a basis for feed protein evaluation[J].Livestock Production Science,2000,64(2):239-251.

[9]CONCEI??O L E C,GRASDALEN H,R?NNESTAD I.Amino acid requirements of fish larvae and post-larvae:new tools and recent findings[J].Aquaculture,2003,227(3):221-232.

[10]姚林杰,叶元土,蔡春芳,等.饲料蛋白质脂肪比与不同生长阶段团头鲂全鱼蛋白质、脂肪含量及肌肉氨基酸、脂肪酸组成的关系[J].动物营养学报,2014,26(8):2 184-2 196.

[11]彭士明,施兆鸿,孙 鹏,等.饲料组成对银鲳幼鱼生长率及肌肉氨基酸、脂肪酸组成的影响[J].海洋渔业,2012,34(1): 51-56.

[12]段培昌,张利民,王际英,等.新型蛋白源替代饲料中鱼粉对星斑川鲽（Platichthys stellatus）幼鱼氨基酸组成的影响[J].海洋与湖沼,2011,42(2):229-236.

[13]徐树德,刘雪兵,王树启,等.不同类型饲料对黄斑篮子鱼幼鱼生长及肌肉蛋白质和脂肪酸组成的影响[J].海洋渔业, 2014,36(6):529-535.

[14]朱庆国,林建斌,黄种持,等.饲料中不同水平n-3HUFA对斜带石斑鱼幼鱼生长剂肌肉脂肪酸组成的影响[J].广东海洋大学学报,2012,32(4):20-27.

[15]易新文,张文兵,麦康森,等.饲料中菜籽油替代鱼油对大黄鱼生长、肌肉脂肪酸组成和体色的影响[J].水产学报,2013, 37(5):751-760.

[16]高淳仁,雷霁霖.海水鱼类高度不饱和脂肪酸营养研究概况[J].海洋水产研究,2000,21(3):72-76.

[17]BELL J G,SARGENT J R.Arachidonic acid in aquaculture feeds:current status and future opportunities[J].Aquaculture, 2003,218(s 1-4):491-499.

[18]TOCHER D R.Fatty acid requirements in ontogeny of marine and freshwater fish[J].Aquaculture Research,2010,41(5):717-732.

Effects of Formula Feed and Copepod on Growth Performance, Amino Acid and Fatty Acid Composition of Larvae Pseudosciaena crocea

WANG Yue-bin,HU Ze-hui,HU Cheng-shuo,et al
(Zhejiang Marine Fisheries Research Institute,Marine and Fishery Research Institute of Zhejiang Ocean University,Zhejiang Key Lab of Mariculture&Enhancement,Scientific Observation and Experiment Station of Fishery Resources in Key Fishing Grounds,Ministry of Agriculture,Zhoushan 316021,China)

An 8-week experiment was conducted to investigate the effects of formula feed and copepod on growth,amino acid and fatty acid composition of larvae Pseudosciaena crocea [initial average body length of (8.18±1.41)mm and initial average weight of(6.83±1.02)mg]cultured in round plastic cylinder with an effective volume of 200 L.The larvae were fed with three different diets in the experiment.The larvae in group A were fed with formula feed,those of group B with the alternative of formula feed and copepod(2 h:2 h)and those of group C with copepod.Each diet group had three repetitions,300 ind in each repetition.The fish wasfed to satiation everyday.The temperature ranged from 24.8 to 25.2℃,salinity from 26 to 27,pH from 7.8 to 8.1 and the dissolved oxygen was kept above 5 mg/L during the experiment period.The results showed that survival rates and growth performance of group B were significantly higher than that of group C(P＜0.05),but no significant difference with group A.There was no significant difference among the three diet groups in amino acid composition.The fatty acids composition of group A and B was significantly higher than that of group C (P＜0.05),but no significance was found between group A and group B.It can be concluded from the experimental results that combination of formula feed and copepod improved better growth performance and higher survival rate of P.crocea than those of artificial feed or copepod alone.

Pseudosciaena crocea;formula feed;copepod;growth;nutrition

S965.322

A

1008－830X(2016)03－0215－07

2016-02-20

舟山市公益类科技项目（2014C31062）；2015年浙江省海洋与渔业局项目

王跃斌（1983-），男，浙江宁海人，工程师，研究方向：海水增养殖.E-mail:wybin@126.com

柴学军，教授级高级工程师.E-mail:chaixj6530@sohu.com