添加秸秆沼渣对银耳生长和生物转化率的影响*

魏启舜，杜 静，王 琳，周 影，赵荷娟（．江苏丘陵地区南京农业科学研究所，江苏南京0046；．江苏省农科院农业资源与环境研究所，江苏南京004）

〈栽培技术〉

添加秸秆沼渣对银耳生长和生物转化率的影响*

魏启舜1，杜 静2，王 琳1，周 影1，赵荷娟1
（1．江苏丘陵地区南京农业科学研究所，江苏南京210046；2．江苏省农科院农业资源与环境研究所，江苏南京210014）

为探索秸秆沼渣在食用菌栽培上的利用潜力，以棉籽壳为主的常规配方作为对照，研究不同比例的秸秆沼渣替代棉籽壳对银耳菌丝、子实体生长及绝对生物转化率的影响，并监测了培养料性质的变化。结果表明，在供试培养料配方中，随着秸秆沼渣比例增加，培养料的C/N递减，而EC值递增，银耳菌丝生长速度渐增，成耳率和绝对生物转化率渐减；秸秆沼渣替代量为20%与40%的处理2、处理3的绝对生物转化率与CK差异不显著。但在银耳的生长过程中C/N和EC值都是逐渐下降的，而pH均在6～7之间。由此可见，秸秆沼渣可以部分代替棉籽壳进行银耳栽培，培养料中添加秸秆沼渣可促进菌丝生长，但配制培养料时必须调节好C/N，才能获得更高的产量。秸秆沼渣在食用菌生产中具有较高的应用价值。

秸秆沼渣；银耳；培养料

随着我国对农作物秸秆综合利用的重视，秸秆沼气工程得到迅猛发展，而作为主要发酵残留物的沼渣资源也越来越丰富。沼渣含有丰富的有机质、腐殖酸、氮、磷、钾元素及未腐熟原料等物质[1-2]，是一种利用价值很高的废弃物资源。目前国内外综合利用技术研究主要集中在生产有机肥和配制有机基质[3-7]，在我国实际应用中，沼渣基本以直接还田作肥料为主，方法简单粗放，一些无法及时利用的沼渣被丢弃田头[8-9]，而有研究表明，沼渣潜在致病菌和植物毒性，好氧堆肥处理后再利用才是安全技术途径[10-12]，简单利用和丢弃不仅会污染环境，而且也造成了资源浪费。

秸秆沼渣是厌氧发酵的产物，发酵过程中，秸秆中的木质素会在植物细胞壁中与纤维素和半纤维素等物质结合在一起，形成“木质素-碳水化合物联合体”，这种联合体的生物降解率较低[13]，因此造成秸秆沼渣中存在大量未被分解的木质纤维素，而食用菌对木质素、纤维素和半纤维素等物质具有很强的分解和利用能力[14]，这些物质是菌丝和子实体生长的主要碳源，因此利用食用菌生产来消纳沼渣具有很大的潜力。

近年来沼渣栽培食用菌的研究逐渐增多，沼渣在平菇、蘑菇、金针菇、杏鲍菇、白黄侧耳等食用菌上的应用研究均有开展[15-20]，但在银耳（Tremella fuciformis Berk．）栽培上还没有相关报道，而银耳的伴生菌香灰菌可以分解半纤维素、纤维素和木质素等物质[21]，银耳栽培可有效利用各种废弃物资源中的木质纤维素，为此我们开展了本试验，研究不同比例的秸秆沼渣替代棉籽壳对银耳菌丝、子实体及绝对生物转化率的影响，并在培养料灭菌后、菌丝满瓶后和银耳采收后监测了各处理培养料的C/N、pH值和EC值，对这些影响银耳生长的主要化学性质进行了比较，以期寻找出添加秸秆沼渣对银耳生长的影响因素，从而为秸秆沼渣在食用菌生产中的应用提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1．1．1 供试菌株

供试银耳品种为雪杉耳，栽培种购自福建古田雪杉耳珍稀食用菌研究所。

1．1．2 培养料基本原料

秸秆沼渣由江苏省农科院农业资源与环境研究所提供，棉籽壳、麸皮、玉米粉等配料从市场采购所得。秸秆沼渣的理化性质为：含水率（12．90± 0．51）%，pH为6．42±0．05，EC值为（2．71±0．09）ms·cm-1，半纤维素含量（19．59±0．12）%，纤维素含量（24．53±0．87）%，本质素含量（23．59±0．95）%，有机碳含量（42．53±0．54）%，全氮含量（1．46± 0．06）%，C/N为29．2±1．4；棉籽壳的理化性质为：含水率（15．21±0．21）%，pH为6．00±0．08，EC值为（2．10±0．07） ms·cm-1，半纤维素含量 （35．38± 0．38）%，纤维素含量（37．35±0．78）%，本质素含量（17．46±0．35）%，有机碳含量（59．07±0．39）%，全氮含量（0．74±0．01）%，C/N为79．8±1．39。

1.2 试验设计

银耳培养料以棉籽壳为主的常规配方作为对照（CK）[22]，然后以不同比例的秸秆沼渣替代棉籽壳设计4个处理，各原料均以干基计算，见表1。

表1 试验培养料配方Tab．1 The formula of different cultivation substrates

1.3 试验方法

1．3．1 试验时间与地点

试验于2015年8月28日接种，10月7日统一采耳测产。试验在江苏丘陵地区南京农业科学研究所菇房内进行。

1．3．2 原料处理与栽培管理

将秸秆沼渣和棉籽壳晒干，剔除混杂物，秸秆沼渣粉碎，以4目筛过筛备用。银耳采用塑料瓶进行栽培，每瓶装料量350 g，每个处理栽培量为35瓶，根据试验用量及原料的含量水率，按试验设置配比计算出棉籽壳、沼渣、麸皮、玉米粉所需用量并称量，加重量比1:1．1左右的水混合均匀，调节培养料含水率为60%。按常规方法进行培养料灭菌、接种和栽培管理，接种量为7 g·瓶-1左右。

1．3．3 不同处理对菌丝生长的影响

接种后每个处理随机选择5瓶，分别于8 d、11 d测量菌丝穿插入料的长度，记录菌丝满袋时间，原基形成时间，并相互比较菌丝的长势情况。

1．3．4 不同处理对子实体生长的影响

子实体生长过程中每个处理选取1瓶有代表性的银耳进行拍照记录，每7天1次，共3次，子实体成熟后统计各处理银耳的污染瓶数，计算出污染率、出耳率和成耳率，每个处理随机采收3朵子实体，烘干成恒重，测定银耳的绝对生物转化率，绝对生物转化率为银耳子实体干重除以接种前栽培料干重乘以100%。1．3．5 不同生长阶段培养料化学性质的监测

银耳栽培过程中，在培养料灭菌、菌丝满瓶后和银耳采收后3个阶段进行破坏性采样，每个处理随机选取3瓶，剪破塑料瓶，倒出培养料，将培养料混合均匀后烘干粉碎，测定有机碳、全氮、pH值及EC值等，并计算出C/N。有机碳采用重铬酸钾容量法-稀释热法、全氮采用硫酸-过氧化氢消煮，凯氏定氮法测定[23]。

1.4 数据处理

数据方差分析采用SPSS 19．0软件进行，Duncan多重比较。

2 结果与分析

2.1 添加秸秆沼渣对银耳菌丝生长的影响

各处理银耳菌丝生长情况见表2。表2中料面长度是栽培瓶外测量的瓶壁菌丝穿插入料的长度，菌丝长势“＋”越多表示菌丝越浓密。

表2 不同配方培养料银耳菌丝生长情况Tab．2 Mycelial growth of Temella fucifomis on different substrates

从表2可知，银耳菌丝在各处理中均可生长，但生长存在差异。在所设处理间，接种后8 d和11 d菌丝料面长度有显著差异，处理5生长最快，处理1（CK）最慢，表现为随着秸秆沼渣含量的增加，银耳菌丝的生长速度递增，而菌丝长势则呈递减趋势；处理4菌丝最先满瓶，原基形成最早，而处理1（CK）则呈相反结果。

2.2 添加秸秆沼渣对银耳子实体生长的影响

各处理银耳子实体生长情况见表3和图1。表3中成耳率是能够正常生长发育银耳比例。

表3 不同配方培养料银耳子实体生长情况Tab．3 Fruit body growth of Temella fucifomis on different substrates

图1 不同配方培养料银耳子实体的生长情况Fig．1 The pictures of Temella fucifomis fruit body growth on different substrates

由表3可知，处理3、处理4有一定的污染率，但观察后发现均为栽培瓶出现破损造成，不应是添加秸秆沼渣的原因；处理5没有出耳，所以出耳率与成耳率均为0，其他处理中，出耳率均达到93%以上，而成耳率随着秸秆沼渣含量的增加而下降。由图1可见，处理2、处理3银耳子实体前期长势具有优势，但后期生长中，处理1（对照）表现更好，处理5一直处在原基分化状态，没有形成子实体。

2.3 不同生长阶段培养料化学性质的变化

图2为银耳生长不同阶段各处理培养料的C/N、pH值和EC值的变化情况见图2～图4。

由图2可见，由于秸秆沼渣C/N较棉籽壳低，不同处理间，随着秸秆沼渣含量的增加，培养料的C/N逐渐变小。在银耳生长的不同时期，各处理C/N均呈下降趋势，其中处理1～3菌丝满瓶后和子实体采收后C/N显著下降，处理5由于没有形成子实体，菌丝满瓶后和子实体采收后C/N差异不显著。

由图3可知，各处理培养料经过菌丝生长后和子实体生长后，pH出现显著变化，但测试结果没有规律性，银耳菌丝适宜的pH为5．2～7．2[21]，各处理培养料pH在6～7之间变化，均是适宜菌丝生长范围之内。

图2 不同生长阶段各处理培养料的C/N变化Fig．2 The C/N change of substrates during different growth period of Temella fucifomis

图3 不同生长阶段各处理培养料的pH值变化Fig．3 The pH change of substrates during different growth period of Temella fucifomis

图4 不同生长阶段各处理培养料的EC值变化Fig．4 The EC change of substrates during different growth period of Temella fucifomis

由图4可知，由于秸秆沼渣EC值较棉籽壳高，不同处理间，随着秸秆沼渣含量的增加，培养料EC值逐渐变大。在银耳生长的不同时期，各处理EC值均呈下降趋势，其中处理1～处理4菌丝满瓶后和子实体采收后培养料EC值均有显著下降，处理5由于没有形成子实体，菌丝满瓶后和子实体采收后EC值差异不显著。

2.4 添加秸秆沼渣对银耳生物转化率影响

不同处理培养料栽培银耳的绝对生物转化率情况见表4。

表4 不同配方培养料银耳绝对生物转化比较Table4 The comparison of Temella fucifomis biological efficiency on different substrates

由表4可见，在不同处理间，随着秸秆沼渣含量的增加，绝对生物转化率逐渐减小，处理1（CK）绝对生物转化率最高，与处理4之间存在极显著差异，但与处理2、处理3之间无显著差异，处理5因没有出耳，绝对生物转化率为0。

3 讨论

培养料的碳氮比是食用菌生长极其重要的指标，有研究表明，在氮含量固定情况下，C/N比值越大，银耳菌丝体生长越好[24]，而在一般情况下，碳源不足，食用菌菌丝容易早衰，不利积累代谢产物[25]，这些结果也在试验中得到印证。由于秸秆沼渣的含碳量较棉籽壳高，含氮量低，造成秸秆沼渣的C/N远低于棉籽壳。因此，在不改变其他配料比例的情况下，可添加秸秆沼渣会降低培养料的C/N。试验中随着秸秆沼渣含量的增加，培养料的C/N递减，银耳菌丝长势、成耳率及绝对生物转化率均递减。

食用菌菌丝代谢需要较高的营养成分，在适宜范围内，培养料的EC值越高，菌丝生长越快[26]。秸秆沼渣是经过发酵形成的产物，其EC值比棉籽壳高，并且秸秆中的大分子物质已经分解，更利于被食用菌菌丝利用[18,20]。试验中随着秸秆沼渣含量的增加，培养料的EC值增加，银耳菌丝的生长速度呈递增趋势。

在供试培养料配方中，即便在没有C/N调节情况下，20%和40%替代量处理的银耳绝对生物转化率已与对照差异不显著。但由于初始C/N较低，子实体生长后期，碳源不足，子实体停止生长，产量均没有超过CK。处理4因秸秆沼渣含量过高，碳源无法满足子实体的正常生长，导致成耳率大幅下降，极大影响了最终产量，处理5则因秸秆沼渣完全替代棉籽壳，培养料碳源严重不足，银耳仅能长出菌丝，尽管生长速度最快，但菌丝长势过弱，无法形成子实体。

因此可以推断，银耳培养料在添加秸秆沼渣后，若能加大蔗糖比例来提高培养料的碳氮比，应能获得更高的产量。综上结果，我们认为培养料中添加秸秆沼渣可促进食用菌菌丝生长，但比例不宜过高，为保证获得较高的产量，应根据不同种类食用菌的生长习性调节培养料的C/N。

目前我国食用菌生产的原料主要为棉籽壳，近年来食用菌产业得到飞速发展，许多地区棉籽壳已处于供不应求的状态，严重影响了食用菌的稳定生产[27]。利用秸秆沼渣栽培食用菌，形成食用菌培养料新配方，可降低食用菌生产对棉籽壳的依赖程度，保障食用菌产业的健康发展，大量消纳沼渣，综合效益十分理想，具有较高的应用价值。

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Effect on Tremella fuciformis Growth and Biological Efficiency Using Straw Biogas Residue as a Substitute for Cottonseed Hull in Substrate Formulae

WEI Qi-shun1,DU Jing2,WANG Lin1,ZHOU Ying1,ZHAO He-juan1
（1．Nanjing Institute of Agricultural Sciences in Jiangsu Hilly Area,Nanjing 210046,China; 2．Jiangsu Academy of Agricultural Sciences Institute of Agricultural Resources and Environment,Nanjing 210014,China）

To explore the potential of straw biogas residue utilization in edible fungi,the effect of hypha growth,fruit body development and biological efficiency of Tremella fuciformis were investigated using straw biogas residue as a substitute for portions of cottonseed hull in substrate formulae．The conventional formula with cotton seed hull was used as control．The physical and chemical properties change of substrate was also monitored．The results showed that with increasing proportion of straw biogas residues in substrate,the ratio of C/N decreased,while the EC value increased,T.fucifomis hypha growth rate increased too, but the fruit body mature rate and the biological efficiency decreased gradually,and the pH valuea was stable between 6-7．However the biological efficiency of treatment 2 and 3（the proportion of straw biogas residues were 20%and 40%respectively）was not significantly different from CK．In general the C/N and EC value were decreasing during the growth of T.fucifomis. Therefore,Straw biogas residue can partially replace cottonseed hull in T.fuciformis cultivation．Adding straw biogas residue in substrate could promote the growth of mycelia．The ratio of C/N must be adjusted correctly in the preparing substrates to get higher yield．Straw biogas residue has an important application value in the edible fungus production．

straw biogas residue;Tremella fuciformis;substrate

S646.9

A

1003-8310（2017）01-0014-05

10．13629/j．cnki．53-1054．2017．01．004

南京市科技计划项目（201505023）。

魏启舜（1973-），男，本科，助理研究员，主要从事废弃物综合利用、食用菌栽培研究。E-mail:hhzx．w＠163．com

2016-12-01