白鲜皮乙醇提取物杀虫活性初探

高 盼，王 芸，张颖睿，时东方

（1.长春师范大学化学学院，吉林 长春 130032；2.长春师范大学中心实验室，吉林 长春 130032）

白鲜皮乙醇提取物杀虫活性初探

高 盼1，王 芸1，张颖睿1，时东方2

（1.长春师范大学化学学院，吉林 长春 130032；2.长春师范大学中心实验室，吉林 长春 130032）

通过对白鲜皮的醇提物来测定其对鳞翅目昆虫黏虫、苜蓿夜蛾、菜青虫和鞘翅目昆虫二十八星瓢虫、双斑萤叶甲、榆紫叶甲、绿豆象的杀虫活性。采用ASE快速萃取技术，以乙醇为主要的提取溶剂，对白鲜皮中杀虫活性成分进行高效提取，初步探索了其醇提物杀虫活性。

白鲜皮；醇提物；杀虫活性

白鲜皮又名藓皮、北鲜皮、臭根皮，其原植物为芸香科白鲜属植物白鲜（Dictamnus dasycar pus Turcz.）和狭叶白鲜（D.angu s tifoliusG.Doc），为吉林省常见道地药材，干燥根皮入药，味苦性寒，归脾、胃、膀胱、小肠经。一般生于山坡林缘、疏林灌丛，在春、秋二季采挖根部，除去泥沙及粗皮，剥取根皮、干燥储存备用。主要分布在亚欧大陆，在中国则分布于东北、华北、华东及河南等地。目前的研究热点集中在生物碱类和黄酮类化合物的提取分离，特别是在白鲜碱的提取分离工艺方面上具有广泛的研究[2，3]。

作者采用ASE快速萃取技术，以乙醇为主要的提取溶剂，对白鲜皮中杀虫活性成分进行高效提取，初步探索了其醇提物杀虫活性。

1 试验材料与试验方法

1.1 试验材料

样品：白鲜皮药材，购于吉林同仁堂大药房。乙醇、甲醇等试剂均为分析纯（北京北化）。

供试昆虫：双斑萤叶甲、苜蓿夜蛾、榆紫叶甲、二十八星瓢虫、黏虫、菜青虫、绿豆象。

仪器设备：手术镊子、刮刀（玻璃材质）、移液管、胶头滴管、打孔器、自制滤纸等。

1.2 试验设备

医生在录入门诊特殊病相关材料或书写电子病历时操作失误、信息录入错误，又未仔细核对，导致患者病历号、病理报告等信息错误，患者来回奔波于医生和医保办之间修改信息，导致不满投诉。

电热恒温培养箱（中国，南京电器）；超净工作台（中国，北京哈东联）；立式高压蒸汽灭菌器（中国，上海博讯）；水浴恒温振荡器（中国，江苏金坛仪器）；鼓风干燥箱（中国，上海福玛设备）；大型旋转蒸发仪（德国，Heidolph）；循环水式多用真空泵（中国，郑州长城）；电热蒸馏水器（中国，上海跃进）；数显恒温水浴锅（中国，上海浦东物理光学仪器）；电子天平（德国，Sartorius AG）；超声清洗器（德国，Elma公司）；加样枪（德国，Sigma公司）；0.45 μm滤膜（美国，Agilent公司）；纯水器（韩国，YoungLin Instrument）；ASE快速溶剂萃取仪（美国，DE公司）。

2 试验方法

2.1 待测样品溶液的制备

采用快速溶剂萃取法以80%的乙醇溶液为提取溶剂，对白鲜皮中主要活性成分进行提取，具体方法如下：准确称取15 g白鲜皮粉末，置于35 mL反应釜中，以80%乙醇溶液为提取溶剂，提取时间5 min，提取温度70℃，提取3次，将提取液过滤，减压浓缩至无醇味，水浴锅蒸干，称重后定容至15 mL容量瓶中，置于4℃冰箱中冷藏备用。

2.2 活性初筛

根据本省常见农业害虫及林业害虫侵染情况，选择鳞翅目昆虫黏虫(Mythimna separata)、苜蓿夜蛾(Heliothis dipsacea)、菜青虫(Pieris rapae Linnaeus)和鞘翅目昆虫二十八星瓢虫(Henosepilachna vigintioctopunctata)、双斑萤叶甲(Monolepta hieroglyphica)、榆紫叶甲(Ambrostoma quadriimpressum Motschulsky)、绿豆象（Callosobruchus chinensis Linnaeus）为杀虫活性供试昆虫，对醇提液的活性进行初步筛选[4，5]。

选择双斑萤叶甲的成虫作为供试昆虫，要求为室内饲养后，个体大小一致且运动活跃作为测试对象；根据黏虫的特性，其饲养条件为养虫箱内人工饲养，饲料喂干净新鲜玉米幼叶，饲养条件为相对湿度≥75%，饲养温度≤25℃，光照条件光暗比为14∶10[6]；其余待试昆虫均为野外采集、室内人工培养，选择条件为个体大小基本一致，且比较活跃。

表1 白鲜皮醇提物对7种受试昆虫的活性测定

2.3 白鲜皮醇提物对双斑萤叶甲等待试昆虫触杀活性的筛选

对触杀活性的测定采用点滴法，其具体操作步骤为铺湿润滤纸于直径5 cm的培养皿中，供试昆虫选择标准为个体大小一致且活泼，醇提液经稀释至不同浓度梯度，超声波清洗器高频振荡后充分溶解，点滴器（1μL）点滴药液于供试昆虫背部，点同剂量纯水作阴性对照。定时观察，并记录供试昆虫的死亡情况，于12 h后检查供试昆虫的死亡情况，利用SPSS软件进行数据分析，并依据以下公式计算提取液对各供试昆虫的死亡率及校正死亡率，同样采用点滴法对供试黏虫进行触杀活性测定。

死亡率（%）=死亡虫数/总试虫数×100

校正死亡率（%）=（处理死亡率-对照死亡率）（/1-对照死亡率）×100

采用毒片定量饲喂法进行供试昆虫的胃毒活性测定，挑选3～4龄黏虫为研究对象，每皿1头置于培养皿中，饥饿处理24 h，将供试液和过滤后的供试液配制成浓度梯度分别为100%、50%、25%，滴定管将供试液（1 μL）涂于1 cm×1 cm的玉米新叶上，即制成载毒叶片，每次处理5头，每头饲喂1片，同时以纯净水作阴性对照，记录其死亡率及拒食情况。

3 试验结果

3.1 醇提物杀虫活性的初筛

经初步筛选的结果看（见表1），白鲜皮醇提物对黏虫具有触杀毒性，且表现出具有强烈的拒食活性，其胃毒活性有待进一步测定；对二十八星瓢虫和苜蓿夜蛾无触杀活性；对双斑萤叶甲具有触杀活性；对榆紫叶甲有胃毒，无触杀活性；对菜青虫和绿豆象有触杀毒性。

3.2 白鲜皮醇提物对双斑萤叶甲的杀虫活性[4,5]

白鲜皮醇提物对双斑萤叶甲幼虫的杀虫活性情况见表2，施液量为1 μL/头。

从表2可以看出，白鲜皮乙醇提取物对双斑萤叶甲幼虫具有极为显著的杀虫活性，见图1。

表2 白鲜皮醇提物对双斑萤叶甲幼虫的杀虫活性

图1 白鲜皮醇提物处理双斑萤叶甲幼虫后的中毒症状

施药时间≥1 d、药液浓度为A时，触杀作用的平均校正死亡率已经超过50%；当施药时间达3 d、药液浓度为B时，最高矫正死亡率已经达到66.9%，表现出较为明显的杀虫活性。

3.3 白鲜皮醇提物对黏虫的杀虫活性[6]

白鲜皮醇提物对黏虫幼虫（2～3龄）的杀虫活性情况见表3。

表3 白鲜皮醇提物对黏虫幼虫的杀虫活性

从表3可以看出，白鲜皮乙醇提取物对黏虫有杀虫活性。施药时间≥2 d、药液浓度为B时，触杀作用的平均校正死亡率均超过50%，白鲜皮醇提物对黏虫幼虫的触杀作用远强于胃毒作用，但是显示有明显的拒食活性。

4 结论

农业生产一般是通过化学合成药物的方法来进行害虫的防治，它拥有易合成、杀毒效率高、价格较为便宜的优点，但是也会产生消极的一方面，会有农药残留，导致环境污染，进而破坏生态平衡。

随着科技的发展，人类对食品安全也越来越重视，因此，寻找污染小、对自然平衡破坏力小的方法是解决这类问题的钥匙，而作为生物防治措施之一的植物性杀虫剂恰巧具有所必需的优点。因为植物性杀虫剂具有在自然环境中易于降解、无残留等优点，导致其具有不污染的特性，所以，它可以保证人和家畜的安全，且对天敌无毒害作用。因此，其对生命安全、环境保护及生态平衡方面具有重要意义，其发展也必将会越来越广泛，越来越得到重视。

[1]李永夫,罗安程.植物源农药的研究和应用进展[J].科技通报, 2003,19（5）:434-438.

[2]康胜利，王素贤，朱廷儒.中药白鲜皮活性成分的研究[J].沈阳药学院学报，1983,18(6):11-14.

[3]王兆全,徐凤鸣,安诗友.白鲜皮的化学成分研究[J].中国中药杂志,1992,17(9):551-556.

[4]李志刚.双斑萤叶甲危害春玉米花丝对结实率影响的调查分析[J].北京农业，2007,11(4):21-23.

[5]史庆馨,方明,聂凯,等.大白菜双斑萤叶甲的发生与防治[J].北方园艺,2010,(24):169-172.

[6]余洋,王高平.黏虫的实验室饲养方法研究[J].河南农业,2011, 11(6):45-47.

1005-2690（2016）11-0114-03

：S482.39

：B

2016-10-30）

吉林省发改委项目（项目编号2013C002）；长春师范大学自然科学基金项目（长师院自科合字[2015]第011号）

高盼(1996-），女，吉林扶余人，主要从事天然产物研究方面工作。

时东方(1978-)，男，副教授，主要从事天然产物研究。