畲药小香勾中总黄酮含量的测定

畲药小香勾中总黄酮含量的测定

唐旭伟 景宁畲族自治县食品药品检验检测中心 沈松伟 景宁畲族自治县农业局

丽水市地处浙南山区，具有丰富的植物资源，民间用植物进行营养保健的现象十分普遍。小香勾是一味常用的畲药，具有除湿、健脾的作用，可用于治疗疝气、腹泻、消化不良等，因其治疗效果较好，被录入《浙江省中药炮制规范》。此外，小香勾还可食用，在食物烹饪中得到广泛应用，可发挥祛风除湿、健胃消食的作用。在烧猪脚、鸡等荤菜时，添加小香勾可增加清香，并且减小油腻性。

本文以野生全叶榕（小香勾）为研究对象，对全叶榕的测定条件进行分析，并测定其总黄酮含量。采用盐酸—镁粉显色法测定全叶榕中总黄酮含量，该方法具有简便、快速、准确的特点，测得小香勾总黄酮含量为13.05 g/kg。测定结果表明，小香勾中总黄酮含量丰富，具有一定的保健功能。

材料与方法

材料与处理

新鲜全叶榕，采集于景宁县东坑镇徐垟村树林，用纯水洗净后晒干，将根、茎、叶碾碎，并保证其可通过60目筛，进行密闭保存备用；将根、茎、叶按1∶1 ∶1的比例进行混合，取2 g全叶榕混合样进行精密称定，放入100 mL容量瓶中，加入90 mL 70%乙醇，超声处理45 min，冷却后，用乙醇稀释到刻度线，摇匀后过滤，得到试品溶液。

检测方法

采用盐酸-镁粉显色法对全叶榕中总黄酮含量进行测定，以芦丁为参照。通过盐酸-镁粉反应、三氯化铝反应、四氢化三硼钠反应检测试品溶液总黄酮。

检测条件

芦丁溶液制备：称取适量芦丁，与乙醇混合，制成浓度不同的溶液， 分 别 为0.000、0.102、0.398、0.787 μg/mL和2.000 μg/mL。

1 波长选择

取试品溶液、芦丁溶液各2.0 mL，分别加入有镁粉的具塞刻度试管中，置于15 ℃水中，缓慢加入3.0 mL浓盐酸，摇匀后加乙醇，保证溶液量达到8 mL，摇匀后放入沸水中保温，60 min后取出，冷却至室温，添加乙醇到10 mL，用纯水做空白对照，于400～700 nm波长进行吸光度测定。

2 镁粉用量

镁粉用量分别为50、100、150、200mg和250mg。

3 反应时间选择

取5份样品溶液，每份2.0 mL，放入上述具塞刻度试管中，并按照上述操作执行，于选定波长处进行吸光度测定，反应时间分别为20、40、60、80 min。

4 标准曲线制备

取5份芦丁溶液，每份2.0 mL，放入上述具塞刻度试管中，将试管置于约15 ℃水中，缓慢加入3.0 mL浓盐酸，摇匀，添加乙醇到8 mL，摇匀后放入沸水中保温60 min，取出，冷却至室温，加乙醇，保证溶液量达到10 mL，用纯水做空白对照，测定吸光度。以芦丁溶液浓度为纵坐标，吸光度为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。

结果

试品溶液总黄酮检测结果

盐酸-镁粉反应呈红色，三氯化铝反应呈黄色伴荧光，四氢化三硼钠反应呈红色。

测定条件选择

在526 nm波长处，试品溶液与芦丁溶液的吸光度最大，在此范围中，未显色试品溶液的吸光度最小，因此，可选526 nm为测定波长。

1 反应时间对吸光度的影响

吸光度最大的反应时间是40 min，详见表1。

表1 不同反应时间对吸光度的影响

2 镁粉用量对吸光度的影响

吸光度最大的镁粉用量是100 mg，详见表2。

表2 镁粉用量对吸光度的影响

3 绘制标准曲线

标准曲线的回归方程为y=0.6635x+5E-06（R2=1），如图1所示。

图1 标准曲线结果

样品总黄酮含量测定

当反应时间40 min、镁粉用量100 mg、波长526 nm时，样品溶液吸光度0.786，由回归方程计算得知，样品溶液总黄酮浓度是0.522 μg/mL，含量是13.05 g/kg。

结论

在民间用作小香勾的植物有3种，分别为桑科榕属植物条叶榕、全叶榕和天仙果，土名为细叶牛乳绳、小叶牛奶绳、小攀坡。本文中选用全叶榕为研究对象，其属于落叶小灌木，高度在0.5-1.5 m，全年可采收，挖取根及茎，洗净切厚片，晒干或鲜用。榕属植物富含黄酮类物质，因为黄酮类化合物种类较多，几乎达到8 000余种，其中天然提取物也较多，在用分光光度法测定其总黄酮含量时，非常容易受到基质影响，所以，在对不同提取物的总黄酮含量进行测定的时候，必须结合实际情况，选择适当的测定方法与条件，本检测结果表明全叶榕总黄酮含量13.05 g/kg。全叶榕（小香勾）的黄酮含量比较高，因为黄酮具有强化免疫、调血脂、抗氧化等作用，所以，全叶榕中含有的黄酮可能是其发挥保健作用的物质基础。本文研究显示，从药用、营养保健角度分析，全叶榕开发价值较大，但有待进行动物实验研究，以验证其药用与营养保健价值。