中药艾叶组合物对雏鸡免疫功能的影响

高俊波 ， 张华琦 ， 陈 敏 ， 郁建生

(1.铜仁职业技术学院 ， 贵州铜仁554300 ； 2.贵州省中兽药工程研究中心 ， 贵州铜仁554300)

中药艾叶组合物对雏鸡免疫功能的影响

高俊波1,2， 张华琦1， 陈 敏1， 郁建生1,2

(1.铜仁职业技术学院 ， 贵州铜仁554300 ； 2.贵州省中兽药工程研究中心 ， 贵州铜仁554300)

为了探讨中药艾叶组合物对雏鸡免疫功能的影响。将艾叶、陈皮、鱼腥草、益母草、穿心莲5味中药按一定比例制成复方散剂，选取1日龄本地土鸡200只，随机分为试验低、中、高剂量组及对照组，低、中、高剂量组的日粮中分别添加0.3%、0.6%、1%中药艾叶组合物，对照组只饲喂基础日粮。分别于14、28、42日龄测定雏鸡的新城疫抗体效价、免疫器官指数、T淋巴细胞百分率、血清免疫球蛋白含量。结果试验高剂量组的新城疫抗体效价、免疫器官指数、T淋巴细胞百分率、免疫球蛋白含量与对照组相比差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)，中剂量组对上述指标均有不同程度的增强作用，低剂量组的作用效果较差。表明本试验中药艾叶组合物能够通过不同途径有效增强雏鸡的免疫功能。

中药 ； 艾叶 ； 组合物 ； 雏鸡 ； 免疫功能

随着人民生活水平的不断提高，绿色、安全、健康的饮食理念深入人心，土鸡以其丰富的营养价值深受消费者青睐。但由于雏鸡病死率较高，在一定程度上制约了土鸡养殖业的发展。大量研究表明，化学类抗生素可以增强雏鸡的免疫功能，有效的降低其发病率，但长期使用化学类抗生素作为饲料添加剂，可造成药物残留和耐药性的产生，严重危害了人类的健康和土鸡养殖业的发展。

中药含有多种天然化学成分,且无毒副作用，可通过综合调节作用来增强动物的免疫机能。本试验选用艾叶、陈皮、鱼腥草、益母草、穿心莲5味中药作为研究对象,将其制作成复方散剂，采用新城疫疫苗对雏鸡进行免疫，通过分析抗体效价、免疫器官指数、T淋巴细胞百分率及血清免疫球蛋白等指标的变化，探讨该中药艾叶组合物对雏鸡免疫功能的影响, 旨在为生产上开发优质高效的中药饲料添加剂提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 中药艾叶组合物的组方及加工 选取艾叶、陈皮、鱼腥草、益母草、穿心莲5味中草药作为原料，购自贵州省铜仁市民生大药房。将上述原料在热风循环干燥箱50 ℃烘干2 h，超微粉碎，80目过筛，按30%、15%、20%、15%、20%的比例混合，搅拌均匀，装袋备用，密封保存，防止药材质量发生变化。

1.2 基础日粮配方 基础日粮自配，配方参照土鸡饲养标准[1]。日粮配方及营养成分为：玉米61.17%、豆粕30.05%、鱼粉6%、蛋氨酸0.19%、食盐0.37%、石粉1.22%、多维预混料1%。

1.3 试验动物分组及处理 200只1日龄的本地雏鸡，由铜仁职业技术学院生态养殖园提供。采取随机分组的方式，将200只雏鸡分为4组，分别为对照组和试验低、中、高剂量组，每组50只。7日前统一饲喂基础日粮，7日龄以滴鼻点眼的方式接种新城疫 LaSota 株活疫苗。7日后分别在试验低、中、高剂量组的基础日粮中添加0.3%、0.6%、1%中药艾叶组合物，对照组只饲喂相同质量的基础日粮。每组均采取自由饮水，24 h光照，试验用具严格清洗消毒。

1.4 血样和脏器采集 分别于14、28、42日龄时，从各组雏鸡中随机抽取10只精确称量体重，翅下静脉采血并制作血涂片，心脏采血2 mL，离心分离血清，-20 ℃保存备用。采血后将雏鸡颈静脉放血致死，摘取胸腺、脾脏、腔上囊等器官，分离脂肪组织，滤纸吸去表面水分，精确称重。

(1)新城疫抗体水平的测定：采用红细胞凝集抑制试验检测雏鸡新城疫抗体效价，结果以log2表示。

(2)免疫器官指数的测定：免疫器官指数= 免疫器官重(mg)/体重(g)。

(3)T淋巴细胞百分率测定[2]：采用酸性 A -醋酸萘酯酶(ANAE) 染色法检测血涂片中 T 淋巴细胞百分率。对已采集的血涂片镜检，凡胞浆内出现大小和数量不等的深红色颗粒者为ANAE阳性细胞(T淋巴细胞)，无此颗粒为B淋巴细胞。计数100个淋巴细胞，计算ANAE 阳性细胞率。ANAE阳性率=100个淋巴细胞中ANAE 阳性细胞数/100×100%。

(4)血清免疫球蛋白的测定：采用间接酶联免疫吸附分析法测定IgA、IgM和IG的含量。

1.5 数据分析 试验数据用 SPSS19.0分析软件进行处理，LSD进行多重比较，数据用平均值±标准差表示，P<0.05表示差异显著，P<0.01表示差异极显著。

2 结果

2.1 中药艾叶组合物对雏鸡新城疫抗体效价的影响 见表1。

表1 中药艾叶组合物对雏鸡新城疫抗体效价的影响±s, n=10) log2x

注：同行数据右肩注大写字母完全不同表示差异极显著(P<0.01)； 小写字母完全不同表示差异显著(P<0.05)，含有相同字母表示差异不显著(P>0.05)，下表同

由表2可知，雏鸡14、28、42日龄时，中药艾叶组合物高、中、低剂量组的ND-HI抗体效价均高于对照组，高、中剂量组与对照组相比差异极显著(P<0.01)，低剂量组与对照组相比差异不显著(P>0.05)。

2.2 中药艾叶组合物对雏鸡免疫器官指数的影响 见表2。

由表2可知，雏鸡14日龄时，各组间胸腺、脾脏指数差异不显著(P>0.05)，高剂量组的腔上囊指数与对照组相比差异显著(P<0.05)；雏鸡28日龄时，各组间胸腺指数差异不显著(P>0.05)，高剂量组的脾脏指数与对照组相比差异显著(P<0.05)，高剂量组的腔上囊指数与对照组相比差异极显著(P<0.01)，中、低剂量组的腔上囊指数与对照组相比差异显著(P<0.05)；雏鸡42日龄时，高剂量组的胸腺、脾脏、腔上囊指数与对照组相比差异极显著(P<0.01)，中剂量组的胸腺、脾脏指数与对照组相比差异显著(P<0.05)，中剂量组的腔上囊指数与对照组相比差异极显著(P<0.01)，低剂量组的腔上囊指数与对照组相比差异显著(P<0.05)。

表2 中药艾叶组合物对雏鸡免疫器官指数的影响±s, n=10) mg/g

2.3 中药艾叶组合物对雏鸡外周血液T淋巴细胞百分率的影响 见表3。

表3 中药艾叶组合物对雏鸡外周血液T淋巴细胞百分率的影响±s, n=5) %

表4 中药艾叶组合物对雏鸡血清免疫球蛋白含量的影响±s, n=5) g/L

由表4可知, 雏鸡14日龄时，各组间IgA、IgG、IgM含量差异不显著(P>0.05)；28日龄时，高剂量组的IgG含量与对照组相比差异显著(P<0.05)；42日龄时，高剂量组的IgA、IgG、IgM含量与对照组相比差异显著(P<0.05)，中剂量组IgG含量与对照组相比差异显著(P<0.05)。

3 讨论

3.1 中药添艾叶组合物提高雏鸡免疫功能的机理 大量研究表明，诸多中草药均可不同程度地提高动物机体免疫力，其作用机理包括促进免疫器官发育，增强和活化免疫细胞，促进和调节补体、抗体和溶菌酶的产生。如黄芪、枸杞、香菇中的多糖成分可以增加免疫器官指数、激活补体、提高抗体水平来实现增强动物机体免疫功能；党参、柴胡、淫羊藿中的皂苷成分对提高动物机体免疫力均有作用[3]。本文选用的艾叶、陈皮、鱼腥草、益母草、穿心莲等5味中药，含有丰富的多糖、黄酮、生物碱等有机成分，通过测定新城疫抗体水平、免疫器官指数、T淋巴细胞变化、血清免疫球蛋白含量等指标，研究该中药组合物对雏鸡特异性免疫和非特异性免疫的影响。

3.2 中药艾叶组合物对雏鸡新城疫抗体水平的影响 体液免疫是由B细胞介导的特异性免疫，抗体水平的高低是衡量体液免疫的重要标志。研究表明，中药能有效地改善和提高机体体液免疫功能,与抗原同时使用能促进抗体的生成，延长免疫期[4]。本试验高、中剂量组的新城疫抗体水平与对照组相比差异极显著(P<0.01)，且抗体高峰维持时间长，抗体下降慢。表明中药艾叶组合物能显著提高雏鸡新城疫抗体效价，且存在量效关系，高剂量组效果明显优与低剂量组。3.3 中药艾叶组合物对雏鸡免疫器官指数的影响 胸腺、脾脏和腔上囊是禽类的主要免疫器官，三者参与机体的体液免疫和细胞免疫，其相对质量的增加提示机体细胞免疫和体液免疫机能增强[5]。试验高、中剂量组的腔上囊、胸腺、脾脏指数在不同时期与对照组相比差异显著或极显著。表明，不同剂量的中药艾叶组合物能有效地提高雏鸡的胸腺指数、脾脏指数、腔上囊指数，特别对与腔上囊指数的提高更为明显，且各组间存在量效关系，高剂量组的效果明显优与中、低剂量组。

3.4 中药艾叶组合物对雏鸡外周血液T淋巴细胞百分率的影响 ANAE阳性率代表了机体的细胞免疫水平，ANAE阳性率提高表明活化的T细胞显著增多，机体的细胞免疫水平提高。本试验组ANAE阳性率14日龄时与对照组相比变化不明显，但在雏鸡28、42日龄时显著高于对照组。表明随着日龄的不断增加，中药艾叶组合物能显著提高雏鸡的外周血液T淋巴细胞百分率。

3.5 中药艾叶组合物对雏鸡血清免疫球蛋白的影响 免疫球蛋白是介导体液免疫的主要杭体，是参与黏膜免疫反应的主要活性物质，血清抗体的高低在一定程度上反映机体对疾病的抵抗能力[6]。通常检测IgG、IgM、IgA就可以代表血清免疫球蛋白的水平。本试验结果表明,不同剂量组的IgG、IgM、IgA含量在42日龄时明显高于对照组，表明中药艾叶组合物有利于增强雏鸡免疫球蛋白水平。

综上所述，艾叶、陈皮、鱼腥草、益母草、穿心莲5味中药组合物能够显著提高雏鸡的新城疫抗体水平、免疫器官指数、T细胞百分率及血清免疫球蛋白等指标，增强雏鸡的免疫功能。

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2016-02-26

贵州省铜仁市科技计划项目(铜市科研(2013)10-3号)

高俊波(1982-)，男，副教授，硕士，研究方向为基础兽医学.E-mail:751213716@qq.com

S831.5

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0529-6005(2016)11-0073-03