上海市某哨点医院2013—2015年儿童流行性感冒病原学监测分析

王平，赵文良，蔡明毅，沈琦，任静，何永频

上海市静安区疾病预防控制中心，上海 200041

·论著·

上海市某哨点医院2013—2015年儿童流行性感冒病原学监测分析

王平，赵文良，蔡明毅，沈琦，任静，何永频

上海市静安区疾病预防控制中心，上海 200041

为了解上海市儿童流行性感冒(简称流感)的流行特征，为儿童流感防控提供实验室依据，本研究按《全国流感监测方案》和《流行性感冒病毒及其实验技术》要求，对上海市某哨点医院2013—2015年采集的流感样患儿标本，采用实时反转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction，RT-PCR)进行核酸检测。共采集咽拭子标本3 359份，检出540份流感病毒阳性，阳性率为16.08%。其中甲型H3流感病毒阳性277例，乙型流感病毒阳性158例，甲型H1N1流感病毒阳性105例。2013—2015年流感病毒检出率依次为10.02%、19.02%和20.81%。阳性率高峰出现在2013年12月—2014年2月(41.77%～64.58%)、2014年7—9月(16.67%～23.29%)、2015年1—3月(35.14%～44.74%)、2015年7—8月(32.65%、40.23%)及2015年12月(41.49%)。1.0岁以下婴儿检出率最低，为7.67%；7.0岁以上最高，为31.83%(148/465)。监测结果显示，流感在冬春季和夏秋季均有一个流行高峰，其中乙型和甲型H1N1流行高峰为冬春季，夏秋季流行高峰主要为甲型H3。引起流感的优势病原亚型在2014年由甲型H3转变为甲型H3/乙型。结果提示，该哨点医院儿童流感的优势病原亚型自2014年开始发生明显改变，应加强对乙型流感等的监测。

流行性感冒；儿童；H3亚型；H1N1

流行性感冒(简称流感)是当今世界上危害人类健康的重要传染病之一。全球每年都有流感流行，流行规模主要取决于流感毒株抗原性的变异程度、每年流感季节类型或优势毒株类型、人群免疫水平及环境与社会等因素[1]。流感病毒属正黏病毒科，根据核蛋白和基质蛋白的抗原性不同分为甲(A)、乙(B)、丙(C)3型[2]。甲型流感病毒宿主范围广，能感染人及猪、马、狗、海豹等多种动物和禽类，并多次引起世界性大流行；乙型流感病毒仅在人和海豹中发现，通常致病性低，偶尔导致局部暴发，但不会引起世界性大流行；丙型流感病毒能在人和猪中分离到，多以散发病例形式出现，一般不引起流行，且感染后症状较轻[2-3]。

儿童是流感高发人群，也是流感重症病例的高危人群[4]。上海市某哨点医院是一家三级甲等综合性儿童医院，也是上海市流感监测网络内的儿童疾病监测点。本研究对该哨点医院2013—2015年儿童流感监测标本的病原进行综合检测和分析，以了解病原传播的季节、年龄和性别分布，探讨其流行病学特征，为儿童流感防控提供实验室依据。

1 材料与方法

1.1 标本种类和来源

该哨点医院依据《全国流感监测方案》，于2013—2015年采集就诊儿童流感样患者(体温≥38 ℃，伴咳嗽或咽痛，缺乏其他实验室确诊依据的急性呼吸道感染)咽拭子标本，共3 359份。标本由经过培训的专业人员在发病早期和抗生素使用前采集，同时填写患儿相关临床信息。标本采集后置于病毒采样液内，24 h内冷链转运至所在区疾病预防控制中心检验科进行处理和分装，-70 ℃冰箱保存备用。

1.2 仪器和试剂

核酸自动抽提仪为瑞士罗氏 MagNA Pure LC 2.0，荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)仪为瑞士罗氏 LightCycler 480，流感病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR)购自江苏硕世生物科技有限公司，流感病毒RNA检测试剂盒购自北京金豪制药股份有限公司。

1.3 检测方法

1.3.1 标本前处理 将咽拭子和鼻拭子标本充分震荡后，用冷冻离心机于4 ℃ 10 000 r/min离心15 min，取上清液用于核酸抽提。

1.3.2 核酸抽提 吸取200 μL标本上清液，用核酸自动抽提仪抽提总核酸，具体操作按仪器说明书进行，设置洗脱体积为100 μL。

1.3.3 核酸检测 采用商品化试剂盒对抽提核酸进行甲型流感病毒通用型、甲型H3、甲型H1N1和乙型流感病毒检测。对初次检测阳性标本，选择另一种商品化试剂盒进行复核。PCR体系和循环参数按试剂盒说明书配制和设定。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0软件进行统计学分析。

2 结果

该哨点医院2013—2015年采集3 359份流感样患儿标本，检出540份流感病毒阳性，阳性率为16.08%。其中277份为甲型H3流感病毒阳性，158份为乙型流感病毒阳性，105份为甲型H1N1流感病毒阳性。结果详见表1。2013—2015年流感病毒阳性检出率逐年提高，其中1月最高，为39.86%；6月最低，为1.05%。患儿发病年龄为1个月～16.0岁，在不同年龄段患儿中均检出甲型H3、甲型H1N1和乙型流感病毒。

2.1 年龄和性别分布

3 599例流感样儿童患者中，5.0岁以下者占68.52%(2 466/3 599)，阳性检出率为12.12%(299/2 466)。其中<1.0岁患儿检测阳性率最低，为7.67%；≥5.0岁儿童阳性检出率为26.99%(241/893)，两者差异显著(P<0.05)。结果详见表2。

540例病原学检测阳性患者中，男性占57.41%(310/540)，女性占42.59%(230/540)。男性患儿流感病毒阳性检出率为15.87%(310/1 953)，女性患儿阳性检出率为16.36%(230/1 406)，两者无统计学差异。结果详见表2。

表1 2013—2015年上海某哨点医院儿童流感样患者中流感病毒核酸检测结果

Tab.1 The nucleic acid detection of influenza virus in the children from a sentinel surveillance hospital in Shanghai during 2013-2015

YearnPositivecaseH3H1N1BPositiverate(%)2013131813298(74．24)28(21．21)6(4．55)10．02201493617875(42．13)39(21．91)64(35．96)19．0220151105230104(45．22)38(16．52)88(38．26)20．81

表2 2013—2015年上海市某哨点医院不同年龄组儿童流感样患者中流感病毒核酸检测结果

Tab.2 The nucleic acid detection of influenza virus in the children at different ages from a sentinel surveillance hospital in Shanghai during 2013-2015

Age(year)GenderMaleFemaleH3H1N1BPositivecasenPositiverate(%)<1．02321211112445747．671．0⁃1．938293515176766510．082．0⁃2．9322137975340113．223．0⁃3．959194616167844117．694．0⁃4．931262613185738514．815．0⁃5．926302715145625022．406．0⁃6．91819165163717820．797．0⁃8．951303614318124233．47≥9．03235337276722330．04Total310230277105158540335916．08

2.2 季节和月份分布

将2013—2015年流感样病例检测结果按月份进行分析。如图1所示，流感病毒感染存在明显的季节流行特征。甲型H3型流感病毒流行高峰2013年出现在冬季，但2014和2015年出现在夏秋季；甲型H1N1和乙型流感病毒流行高峰出现在冬春季。2013年主要是甲型H3流感病毒流行。2014和2015年甲型H3、甲型H1N1、乙型流感病毒呈混合流行趋势，但甲型H3和甲型H1N1占优势。

3 讨论

从20世纪80年代末开始，甲型H1N1、甲型H3、乙型流感病毒循环出现，在全球广泛传播，间隔时间及流行地区也频繁发生变化[5]。2013—2015年监测结果显示，一直在人群中流行的流感病毒为甲型H3、甲型H1N1和乙型，除2013和2014年出现的H7N9禽流感病毒外，未发现其他流感病毒。Russell等研究认为，东亚和东南亚地区由于流感流行季节在时间上重叠，H3N2可在该地区常年持续流行，产生新抗原株并不断向全球各地传播[6]。本研究也发现，2013—2015年甲型H3流感病毒一直是流行优势株，2013年冬春季及2014和 2015年夏秋季流感主要由甲型H3流感病毒引起。

图1 2013—2015年上海市某哨点医院流感儿童患者中病原的月份检测结果

Fig.1 The month distribution of influenza virus in the children from a sentinel surveillance hospital in Shanghai during 2013-2015

2013—2015年流感病毒总阳性检出率为16.08%。不同年龄组中，3.0岁以下儿童阳性率低于总阳性率，其中1.0岁以下儿童最低；而5.0岁以上儿童阳性率则高于总阳性率。有研究认为，流感流行早期大多数病例为儿童，特别是5～19岁[7]。3岁以下属于婴幼儿，主要在家中由专人照顾，偶去公共场所活动，通常时间也较短，被传染的概率相对较低。另一方面，由于母传抗体的保护，出生后至5个月的新生儿和小婴儿极少感染，所以3岁以下儿童病毒检出率低[8]。

流感在温带地区呈现每年冬春季高发的季节性特征；而在热带和亚热带地区，尤其在亚洲，流感的季节性呈高度多样化，既有半年或全年周期性流行，也有全年循环[9-12]。Yu等研究发现，我国甲型流感的年度周期性呈多样化的空间模式和季节性特征，上海等地区呈每年1～2月和6～8月的双周期高峰。而乙型流感在我国大部分地区呈单一冬季高发[13]，与本研究监测结果一致，只是出现高峰的时间提前或延后1个月。2013年乙型流感病毒阳性检出率只有4.55%，2014和2015年则增长至35.96%和38.26%。乙型流感病毒从减弱到再次流行，提示其可能发生了变异。曾晓旭等研究结果显示，1983—2013年乙型流感病毒频繁发生系内重配或不同系间重配，由于人群对新出现的重配病毒预存免疫力较低，从而增加了感染乙型流感病毒的风险[14]。

儿童对甲型H1N1流感病毒普遍易感[15]，但最近3年的监测结果显示，儿童流感样患者中甲型H1N1一直处于较弱的流行状态，阳性检出率仅为3.1%。可能与2009年甲型H1N1流感大流行后大规模接种疫苗有关。尽管目前国内甲型H1N1流感大流行已停止，但随着群体免疫压力的选择，甲型H1N1流感病毒可能会出现新的抗原变异株而导致流行暴发，故需继续监控和关注。

[1] 张静，杨维中， 郭元吉，徐红， 张烨，李梓，郭俊峰，王敏，梁国栋，王文杰，李正懋，孙新华，肖东楼.中国2001—2003年流行性感冒流行特征分析 [J].中华流行病学杂志，2004，25(6)：461-465.

[2] Webster RG, Bean WJ, Gorman OT, Chambers TM, Kawaoka Y. Evolution and ecology of influenza A viruses [J]. Microbiol Rev, 1992, 56(1): 152-179.

[3] Taubenberger JK, Morens DM. 1918 Influenza: the mother of all pandemics [J]. Emerg Infect Dis, 2006, 12(1): 15-22.

[4] Teo SS, Nguyen-Van-Tam JS, Booy R. Influenza burden of illness, diagnosis, treatment, and prevention: what is the evidence in children and where are the gaps? [J]. Arch Dis Child, 2005, 90(5): 532-536.

[5] Cox NJ, Subbarao K. Influenza [J].Lancet, 1999, 354 (9186): 1277-1282.

[6] Russell CA, Jones TC, Barr IG, Cox NJ, Garten RJ, Gregory V, Gust ID, Hampson AW, Hay AJ, Hurt AC, De Jong JC, Kelso A, Klimov AI, Kageyama T, Komadina N, Lapedes AS, Lin YP, Mosterin A, Obuchi M, Odagiri T, Osterhaus AD, Rimmelzwaan GF, Shaw MW, Skepner E, Stohr K, Tashiro M, Fouchier RA, Smith DJ. The global circulation of seasonal influenza A (H3N2) viruses [J]. Science, 2008, 320(5874): 340-346.

[7] Neuzil KM, Zhu Y, Griffin MR, Edwards KM, Thompson JM, Tollefson SJ, Wright PF. Burden of interpandemic influenza in children younger than 5 years: a 25-year prospective study [J]. J Infect Dis, 2002, 185(2): 147-152.

[8] 陈慧中.儿童流感的流行病学特点 [J].中华儿科杂志，2002，40(11)：644-645.

[9] Viboud C, Alonso WJ, Simonsen L. Influenza in tropical regions [J]. PLoS Med, 2006, 3(4): e89.

[10] Azziz Baumgartner E , Dao CN, Nasreen S, Bhuiyan MU, Mah-E-Muneer S, Al Mamun A, Sharker MA, Zaman RU, Cheng PY, Klimov AI, Widdowson MA, Uyeki TM, Luby SP, Mounts A, Bresee J. Seasonality, timing, and climate drivers of influenza activity worldwide [J]. J Infect Dis, 2012, 206(6): 838-846.

[11] Bloom-Feshbach K, Alonso WJ, Charu V, Tamerius J, Simonsen L, Miller MA, Viboud C. Latitudinal variations in seasonal activity of influenza and respiratory syncytial virus (RSV): a global comparative review [J]. PLoS One, 2013, 8(2): e54445.

[12] Zou J, Yang H, Cui H, Shu Y, Xu P, Xu C, Chen T. Geographic divisions and modeling of virological data on seasonal influenza in the Chinese mainland during the 2006-2009 monitoring years [J]. PLoS One, 2013, 8(3): e58434.

[13] Yu H, Alonso WJ, Feng L, Tan Y, Shu Y, Yang W, Viboud C. Characterization of regional influenza seasonality patterns in China and implications for vaccination strategies: spatio-temporal modeling of surveillance data [J]. PLoS Med, 2013, 10(11): e1001552.

[14] 曾晓旭，隗合江，杨磊，李希妍，郭俊峰，蓝雨，邢永才，王大燕，舒跃龙.1983—2013年B型流感病毒的重配研究 [J].中华实验和临床病毒学杂志，2014，28(3)：167-169.

[15] 王相诗，蔡洁皓，姚玮蕾，葛艳玲，朱启镕，曾玫.上海地区儿童新型甲型H1N1流感的临床和分子流行病学特征 [J].中华儿科杂志，2013，51(5)：356-361.

. HE Yongpin, E-mail: heyongpin@126.com

Etiological analysis of influenza in children from a sentinel surveillance hospital in Shanghai during 2013-2015

WANG Ping, ZHAO Wenliang, CAI Mingyi, SHEN Qi, REN Jing, HE Yongpin

Jing′anDistrictCenterforDiseaseControlandPrevention,Shanghai200041,China

The present study aims to investigate the epidemiological characteristics of influenza in Shanghai children during 2013-2015, and to provide evidence-based data for influenza control and prevention. The throat swab samples were collected from the influenza-like cases at a sentinel surveillance hospital in Shanghai during 2013-2015, according to theNationalInfluenzaSurveillanceProgramandInfluenzaVirusandExperimentalTechnology. The samples were subjected to real-time reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) for influenza virus detection. A total of 3 359 samples were collected during 2013-2015, and 540 samples were influenza virus-positive, including 105 influenza A (H1N1), 158 influenza B and 277 H3 subtype, with a positive detection rate of 16.08%. The positive rates of influenza virus were 10.02%, 19.02% and 20.81% in 2013, 2014 and 2015, respectively. The detection rate was the lowest (7.67%) in the infants younger than 1.0 year and the highest (31.83%) in the children older than 7.0 years. The results showed that the peak of influenza epidemic appeared twice in one year. The peak of detection rate of influenza B and H1N1 appeared in winter and spring (December to March), whereas the peak in July to September was caused by H3. The predominant type of influenza virus changed from H3 to H3 and B after 2013. The results suggest that the predominant subtype of influenza virus in children has changed after 2013 in this sentinel surveillance hospital, and the monitoring of influenza B should be strengthened.

Influenza; Child; H3 subtype; H1N1

上海市静安区卫生和计划生育委员会重点学科项目(JWXK201203)

何永频

2016-03-31)