皮肤恶性黑色素瘤手术联合免疫疗法的临床研究

王华斌



皮肤恶性黑色素瘤手术联合免疫疗法的临床研究

王华斌

目的 探讨在皮肤恶性黑色素瘤手术治疗中联合免疫治疗的临床疗效。方法回顾性分析收治的皮肤恶性黑色素瘤患者52例，根据治疗方式不同分为治疗组33例和对照组19例。两组患者均行根治手术治疗；对照组在根治术后直接进行移植皮修复。治疗组在根治术后应用免疫疗法。比较两组患者整个治疗过程所需时间和出血量；比较治疗后第1年、第2年和第3年患者生存率；检测两组血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平。结果治疗组患者整个治疗过程平均所需时间和出血量分别为(2.25±0.43)h和(595.78±149.72)mL，与对照组(2.34±0.51)h和(604.27±155.33)mL比较差异无统计学意义(P<0.05，P<0.01)；治疗后，治疗组患者第2和第3年的生存率明显高于对照组(P<0.05)；治疗组治疗后MMP-2和MMP-9水平均明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.01)。结论在皮肤恶性黑色素瘤手术治疗中采取免疫疗法可提高治疗效果、提高术后生存率和降低血清MMP-2 和MMP-9含量，值得临床应用。

皮肤恶性黑色素瘤；免疫疗法；基质金属蛋白酶-2；基质金属蛋白酶-9

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1553～1555)

皮肤恶性黑色素瘤是黑色素细胞相关恶性肿瘤，在西方国家皮肤癌死亡首因[1]，在我国范围内黑色素瘤发病率增速较快，具有致死性强、易转移和对单纯放化疗不敏感等特点；该病在我国的发病率较低，但随着我国人口疾病谱的变化，其发病率、死亡率正逐年升高，已对人们的健康构成了严重威胁[2]。对恶性黑色素瘤采取免疫疗法已用于临床各科疾病的治疗，本研究中回顾性分析本室2010年4月至2012年7月收治的皮肤恶性黑色素瘤患者52例，结果证实在皮肤黑色素瘤手术治疗中采取联合免疫疗法治疗疗效更佳，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析本院2010年4月至2012年7月收治的皮肤恶性黑色素瘤患者52例，根据手术根治术后处理方式不同分为治疗组33例和对照组19例。其中治疗组男性20例，女性13例；年龄30～60岁，平均(42.1±7.7)岁；病程7个月～5年，平均(2.5±0.9)年；足底部22例，面部4例，上肢2例，下肢3例，胸部1例，肩部1例。创口面积：1.2 cm×1.7 cm～5.2 cm×5.6 cm。表浅扩散型20例，雀斑样型8例，结节型5例；Clark分级：Ⅰ级1例，Ⅱ级9例，Ⅲ级13例，Ⅳ级7例，Ⅴ级3例。治疗组男性12例，女性7例；年龄32～62岁；平均(44.4±7.8)岁；病程9个月～5.6年，平均(2.6±0.7)年；足底部13例，面部2例，上肢1例，下肢1例，胸部1例，肩部1例。创口面积：1.1 cm×1.7 cm～5.1 cm×5.5 cm；表浅扩散型14例，雀斑样型3例，结节型2例；Clark分级：Ⅰ级1例，Ⅱ级3例，Ⅲ级9例，Ⅳ级5例，Ⅴ级1例。两组一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 治疗方法

两组患者均行根治手术治疗，具体方法为：手术均在全麻下进行，沿原发病灶1.5～2.0 cm范围切除病灶，切除深度约至深筋膜。对照组在根治术后，经病理检查证实切缘及肿块深面无肿瘤浸润后，直接进行移植皮修复。治疗组：在根治术后第3 d起，给予α-2b干扰素联合白介素-2进行免疫治疗；具体方法：α-2b干扰素，300万单位/次；白介素-2，100万单位/次；分别肌肉注射15次。术后第3个月和第6个月，再给予上次相同方法各治疗一次。

1.3 观察指标

术中情况比较：记录和比较两组患者整个治疗过程所需时间和出血量。

对所有患者术后3年内进行随访，分别记录和比较治疗后第1年、第2年和第3年患者生存率。

检测两组血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平，均采用酶联免疫法检测，MMP-9试剂盒为上海樊克生物科技有限公司产品，批号FK-pk0069；MMP-9试剂盒为上海冠东生物科技有限公司产品，批号BMH075。

1.4 统计学处理

数据应用SPSS 17.0软件分析，计量资料用表示，分析采取配对t检验，计数资料分析采取χ2检验分，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗所需时间和术中出血量比较

治疗组患者整个治疗过程平均所需时间和出血量分别为(2.25±0.43)h和(595.78±1495.72)mL，明显少于对照组的(2.34±0.51)h和(604.27±155.33)mL，比较差异均无统计学意义(P>0.05)。

2.2 两组患者生存率比较

治疗组治疗后第1年患者生存率高于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)；治疗组第2和第3年生存率明显高于对照组，比较差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组3年内生存率比较(例，%)

2.3 两组血清MMP-2和MMP-9含量比较

两组治疗后血清MMP-2和MMP-9含量均明显下降(P<0.0，P<0.01)；治疗组治疗后MMP-2和MMP-9含量均明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.01)，见表2。

表2 两组血清MMP-2和MMP-9含量比较

3 讨论

皮肤黑色素瘤为最常见皮肤恶性肿瘤，随着大气臭氧层破坏加强，其发病率呈明升高，且远超于其他恶性肿瘤[3]。初步分析其可能与紫外线的过渡照射密切相关[4]。此外，调查发现该病多见于男性，男性多见于背部，女性多见于上肢和腿部。本研究中病例呈现年龄最小30岁，好发于足底部，病理分级以Ⅲ级为主等特点。

皮肤黑色素瘤恶性程度高，好转移，预后多不理想，临床尽早进行手术根治是最理想疗法。但对于病灶切除范围多大更有利于临床根治一直存在争议。以往常认为切除病灶边缘越宽，效果越好；因此，以5 cm边缘灶是过去常用的切除标准[5]。国内学者也认为，皮肤黑色素瘤的手术根治术在病灶切除深度方面更为重要[6]。参照国内外最新标准，本研究沿原发病灶1.5～2.0 cm范围切除病灶，切除深度约至深筋膜，取得良好效果。

应用免疫疗法治疗各种肿瘤的临床研究不断发展，在黑色素瘤的治疗中也已被证实疗效良好。针对恶性黑色素瘤的免疫治疗制剂也有多种，如伊匹单抗等[7]。在目前的临床研究中，在黑色素手术治疗中同时给予免疫治疗的确切疗效及可能作用机制仍需进一步探讨[8]。本研究中笔者在常规手术治疗后，加用免疫制剂α-2b干扰素联合IL-2治疗取得良好效果；α-2b干扰素和IL-2为多肽类活性分子，均由活化的间质细胞或免疫细胞(如单核/巨噬细胞、NK细胞以及B淋巴细胞等)合成分泌[9]。研究证实，α-2b干扰素与IL-2可调节细胞生长、分化成熟，参与免疫应答和炎症反应，促进创伤愈合以及肿瘤消长等作用[9]。

本研究结果显示：两组患者整体治疗过程中手术操作所需时间一致，比较差异无统计学意义(P>0.05)；而治疗后对患者的生存影响结果发现，加用α-2b干扰素联合IL-2后患者的第2和第3年的生存率明显高于对照组(P<0.05)，以上提示在皮肤黑色素瘤手术根治中采取α-2b干扰素联合IL-2对于疾病的整个治疗过程具有重要意义。

肿瘤浸润、转移是一个动态的、复杂的过程，在这一过程中基质金属蛋白酶(MMPs)家族发挥了重要的作用调节作用[10]。目前已经证实，MMP-2 和MMP-9在肺癌、胃癌、乳腺癌和头颈部癌等恶性肿瘤中均高表达，且与肿瘤的复发转移和预后差密切相关[11-12]。但MMP-2 和MMP-9在皮肤黑色素瘤患者外周血中的表达却少见报道。MMP-和MMP-9 均可降解细胞外基质及基膜中的胶原和弹力蛋白等成分，破坏基膜，从而肿瘤细胞侵袭结缔组织，引起小血管和淋巴管而发生转移[13]。

本组研究显示，手术联合α-2b干扰素和IL-2治疗后患者血清MMP-2和MMP-9水平均明显低于治疗前和对照组，比较差异有统计学意义(P<0.01)；提示在皮肤黑色素瘤手术根过程中，采用α-2b干扰素联合IL-2免疫治疗可经免疫作用，增强自身抗肿瘤能力，间接清除手术腔内渗液和组织碎块，这些可能是联合免疫疗法治疗降低患者血清MMP-2和MMP-9水平的重要因素所在，而通过降低患者血清MMP-2和MMP-9水平可能与免疫疗法发挥抑制肿瘤生长密切相关。

[1] Lyth J,Eriksson H,Hansson J,et al.Trends in cutaneous malignant melanoma in Sweden 1997-2011:thinner tumours and improved survival among men〔J〕.Br J Dermatol,2015,172(3):700-706.

[2] 袁 艺,范 清.负压封闭引流技术在肿瘤病人难愈性伤口治疗中的应用〔J〕.长江大学学报,2010,7(3):57-58.

[3] Markovic SN,Erickson LA,Rao RD,et al.Malignant melanoma in the 21st century,part 1:epidemiology,risk factors,screening,prevention,and diagnosis〔J〕.Mayo Clin Proc,2007,82(3):364-380.

[4] Strouse JJ,Fears TR,Tucker MA,et al.Pediatric melanoma:risk factor and survival analysis of the surveillance,epidemiology and end results database〔J〕.J Clin Oncol,2005,23(21):4735-41.

[5] 李荟元.恶性黑素瘤的最新动态(四)〔J〕.中国美容医学,2008,17(4):595-597.

[6] 刘 毅,苏志红,刘蔓华,等.两种治疗足跟与足跖部皮肤恶性黑色素瘤手术的远期疗效评价〔J〕.肿瘤防治研究,2001,28(3):217-219.

[7] 孙 瑶,陈湘磊.黑色素瘤内科治疗的新进展〔J〕.医学与哲学,2015,36(1):12-13.

[8] 罗小美,陈继冰,牛立志.靶向免疫治疗联合放射治疗在晚期黑色素瘤中的研究进展〔J〕.中国肿瘤临床,2015,42(4):255-258.

[9] 刘 毅,张 诚,张鲜英,等.手术联合免疫疗法治疗皮肤恶性黑色素瘤的疗效分析〔J〕.肿瘤防治研究,2012,39(4):442-445.

[10] Clavel C,Polette M,Doco M,et al.Immunolocalization of matrix metallo-proteinases and their tissue inhibitor in human mammary pathology〔J〕.Bull Cancer,1992,79(3):261-270.

[11] Che YL,Luo SJ,Li G,et al.The C3G/Rap1 pathway promotes secretion of MMP-2 and MMP-9 and is involved in serous ovarian cancer metastasis〔J〕.Cancer Lett,2015,359(2):241-249.

[12] Araújo RF Jr,Lira GA,et al.Prognostic and diagnostic implications of MMP-2,MMP-9,and VEGF-α expressions in colorectal cancer〔J〕.Pathol Res Pract,2015,211(1):71-77.

[13] Shi H,Liu L,Liu LM,et al.Inhibition of tumor growth by β-elemene through downregulation of the expression of uPA,uPAR,MMP-2,and MMP-9 in a murine intraocular melanoma model〔J〕.Melanoma Res,2015,25(1):15-21.

(编辑：吴小红)

Clinical Study of Immunotherapy in Operation Treatment for Cutaneous Malignant Melanoma

WANGHuabin.HubeiUmorHospital,Wuhan,430079

Objective To study the clinical value of immunotherapy in operation treatment for cutaneous malignant melanoma.Methods 52 cases of cutaneous malignant melanoma were randomly divided into the treatment group and the control group by different operation treatment.The control group was treated by free tissue flap transplantation after tumor resection.The treatment group was treated by immunotherapy during operation treatment,and then free tissue flap transplanatation.Time and amount of bleeding of whole treatment course were compared between the 2 groups.1-,2- and 3-year survival rates were compared .Serum levels of MMP-2 and MMP-9 were detected of the 2 groups.Results Time and amount of bleeding of whole treatment course in the treatment group were(2.25±0.43)h and (595.78±149.72)mL,which were lower than (2.34±0.51)h and (604.27±155.33)mL in the control group(P>0.05).After treatment,2- and 3-year survival rates of the treatment group were obviously higher than those of the control group(P<0.05).Serum levels of MMP-2 and MMP-9 in the treatment group were remarkably lower than those of the control group (P<0.01).Conclusion In operation treatment of cutaneous malignant melanoma,immunotherapy could increase efficacy,improve survival rate,and decrease serum levels of MMP-2 and MMP-9,it is worthy of clinical application.

Cutaneous malignant melanoma；Immunotherapy；MMP-2；MMP-9

430079 湖北省肿瘤医院

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.09.051

R739.5

A

1001-5930(2016)09-1553-03

2015-10-08

2016-04-05)