不同炮制法对大红袍橙皮苷含量的影响※

马 琳 钟凌云 任瑶瑶 祝 婧 于 欢 叶喜德*

（1 江西省抚州市妇幼保健院药剂科，抚州 344000；2江西中医药大学药学院，南昌 330006)

不同炮制法对大红袍橙皮苷含量的影响※

马 琳1钟凌云2任瑶瑶2祝 婧2于 欢2叶喜德2*

（1 江西省抚州市妇幼保健院药剂科，抚州 344000；2江西中医药大学药学院，南昌 330006)

目的 探讨不同炮制方法对大红袍中橙皮苷含量变化的影响。方法 依法对大红袍采用蒸制、灶心土炒、炒炭、蜜炙和麸炒等不同炮制方法，以制备不同炮制品，采用HPLC法，比较大红袍不同炮制品中所含橙皮苷之间的变化差异。结果与生品相比，蒸制品中橙皮苷含量变化差别不大；与其他炮制品相比，蒸制品中橙皮苷含量相对较高。结论 蒸制法对大红袍中橙皮苷含量影响较小。

大红袍；炮制方法；橙皮苷

陈皮，原名橘皮，药材分为“陈皮”（为福橘、大红袍 (江西产)和温洲密柑等的干燥成熟果皮） 和“广陈皮”（为茶枝柑和行柑的干燥成熟果皮）[1]。大红袍为芸香科植物橘 (Citrus reticulata Blanco)的栽培变种植物，又名“三湖红桔”，分布于江西省新干县三湖镇，味苦、辛，性温，归肺、脾经。具理气健脾、燥湿化痰之功[1]。现代研究证实，陈皮具有升压[2]、抗血小板聚集[3]、抗氧化[4]、抗衰老[5]、强心[6]、抗休克[7]、抗过敏[8]、抗菌[9]、抗肿瘤等多种作用[10]。主含橙皮苷、川陈皮素等多种成分[11]。

陈皮炮制的历史由来已久，常见有麸炒、蜜炙、灶心土炒、炒炭和蒸制法等等[12]。由于不同炮制方法对陈皮药效影响较大。而橙皮苷为陈皮主要活性成分，并为评价其重要指标之一[13]。显然，不同的炮制方法势必影响到该成分的含量。虽然有文献考察了不同炮制方法对橙皮苷含量影响，但其原药材的来源为广陈皮[14]。对于不同炮制方法对大红袍中主要成分橙皮苷含量的影响，目前未见文献研究报道。大红袍作为药材使用，已经有两千多年历史[15]，自宋朝始，三湖红桔被列为贡品，乾隆皇帝亲赐“大红袍”而得名[16]。大红袍虽然临床疗效确切[17]，但现代文献对其研究报道却甚少。由于药材成分含量受地区、炮制加工等多种因素影响。因此，本研究选取大红袍，采取用炮制方法，来考察对橙皮苷含量变化的影响，不仅对于临床安全用药提供参考，也为深入研究大红袍提供基础。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Ultimate3000 HPLC色谱仪 （型号为LPG-3400SD），AG245电子分析天平，DIGITAL红外测温仪，电热恒温干燥箱（上海沪粤明科学仪器公司），数显恒温水浴锅（国华电器有限公司），KQ-5200型超声波清洗器 （200 W 昆山市超声仪器有限公司）。

1.2 试药 橙皮苷对照品 (批号150123)，甲醇 (色谱纯)(美国 Merck公司)，乙腈 (色谱纯) (美国Merck公司)，重蒸水自制，其他试剂为分析纯。

大红袍购自江西新干县三湖镇药材市场，经江西中医药大学资源教研室鉴定为大红袍。

2 实验方法

2.1 药材的炮制 依法制备大红袍六种不同炮制品。

（1）生品。取原药材，洗净，切丝，晾干后备用。

（2）麸炒品。称取生品10 g，麦麸按10%放入炒置锅内，待麦麸炒至冒白烟时，将生品放入，炒至冒烟，陈皮表面呈焦黄色，迅速出锅，摊开放晾，冷却后，筛去麦麸，得麸炒品[18]。

（3）炒炭品。称取生品10 g，待锅加热后，把预先准备好的生品放入锅内，炒至陈皮外观呈炭黑色，喷淋少许清水，出锅，晾干，即得[19]。

（4）蜜炙品。称取生品10 g，蜂蜜按18.75%放进锅内，先用文火将蜂蜜炼成老蜜，再将生品放入蜂蜜里面，炒至表面呈焦黄色，出锅，摊开晾冷，即得。

（5）蒸制品。取陈皮丝10 g，加入20 ml清水浸泡2小时后，入锅蒸制30 min，出锅置于烘箱烘干即可[20]。

（6）灶心土炒制品。先将5 g灶心土放进锅里炒松后，然后放入10 g陈皮丝翻炒至挂土，出锅后筛去土，晾凉即得。

以上几种陈皮的炮制品制备完成后，用粉碎机将大红袍6种炮制品，分别进行粉碎，过60目筛后，备用。

2.2 橙皮苷含量的测定

2.2.1 对照品的制备 精密称取橙皮苷对照品0.5 mg置于50 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度后摇匀，即为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 分别精密称取经粉碎后的生品、麸炒品、炒炭品、蜜炙品、蒸制品各0.50 g，共6份。分别加入40 mL石油醚，放入65℃的水浴锅中加热，回流提取2~3 h，将石油醚弃去，再加入40 mL甲醇，水浴回流2 h（65℃），过滤后重新加入40 mL甲醇，继续回流1 h（65℃）。冷却后过滤，滤液置于50 mL容量瓶，加甲醇定容至刻度，摇匀。

2.2.3 色谱条件 Diamonsil C18色谱柱 (200×4.6 mm，5 μm)，以甲醇-醋酸-水（35∶4∶61）为流动相，检测波长283 nm，柱温25℃。理论塔板数以橙皮苷计算不低于2000。色谱图见图1~7。

图1 橙皮苷对照品

图2 大红袍生品

图3 麸炒品

图4 炒炭品

图5 蜜炙品

图6 蒸制品

图7 土炒品

2.3 方法学考察

2.3.1 线性关系考察 精密吸取橙皮苷母液0.5，1，1.5，2，2.5 μL置于1 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度线后摇匀，照上述色谱条件，进行分析，测定峰面积；以峰面积为纵坐标（y），进样量为横坐标（x）绘制校准曲线，计算回归方程y=700623X-76787，r2=0.9991。结果表明，橙皮苷在1.5~2.5 μg范围内具良好的线性关系。

2.3.2 精密度实验 精密吸取2.2.1项下对照品溶液，在上述色谱条件下，连续进样6次，每次5 μL，求得橙皮苷峰面积分值的RSD为0.22%，表明仪器的精密度良好。

2.3.4 重现性试验 称取同一批次蒸制陈皮样品粉末5份，每份0.5 g。精密称定后，按2.2.2项下吸取供试品溶液，取2 mL至100 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度后摇匀，照上述色谱条件下，连续进样6次，测定峰面积积分值，计算相对偏差，得橙皮苷的RSD为1.02%，表明重现性良好。

2.3.3 稳定性实验 照2.2.2项下，精密吸取蒸制品供试品溶液1 mL至50 mL容量瓶，加甲醇定容至刻度后摇匀，分别从静置2，4，6，8，10，12，18，24 h后，吸取供试品溶液10 μL，在上述色谱条件下，分别进行测定，并记录峰面积，计算相对偏差。测定结果橙皮苷的RSD为0.15%，表明样品溶液在24 h内稳定。

2.3.5 回收率考察 取蒸制陈皮样品粉末5份，每份1.0 g。精密称定后，分别加入橙皮苷对照品15，15，20，30，30 mg，按照2.2.2项下配置，得到蒸制供试品溶液5份，分别取1 mL至50 mL容量瓶，加甲醇定容至刻度，摇匀后静置，在上述色谱条件下，吸取供试品溶液10 μL，计算回收率，结果见表1。测定橙皮苷的加样回收率在99.75～99.88%之间，RSD为1.46 （n=5）。

表1 加样回收率结果 (n=5)

2.3.6 样品测定 取大红袍生品及其他5种炮制品，按2.2.2项下制备供试品溶液，在上述色谱条件下，吸取供试品溶液10 μL进行分析，比较不同炮制品橙皮苷含量变化差异，结果见表2：

表2 样品测定结果 (n=6)

3 结论

由此可见，陈皮中橙皮苷含量在炮制后均发生了变化。与生品相比，其他各炮制品中橙皮苷的含量均有下降，但蒸制陈皮下降较少，提示蒸法炮制陈皮对橙皮苷含量变化影响较小。因此，陈皮在临床应用中，常采用净制，切丝，阴干的炮制方法。

4 讨论

从原药材来源来说，大红袍为江西道地药材，而非广陈皮，截止目前，未见以大红袍为原药材，开展不同炮制方法对其橙皮苷含量变化的影响研究。可见，本研究新颖性明显。依照实验结果，本研究中所选用的不同炮制方法，均不同程度地对橙皮苷含量产生了影响。说明，大红袍中橙皮苷含量变化受加工炮制影响较大，这对于指导陈皮临床安全用药意义重大。由于所选用的炮制方法，均涉及到加热这一环节，说明大红袍在加热条件下，成分含量影响较大。从研究结果来看，蒸制品中橙皮苷含量影响最小，但文献研究报道[21]，蜜炙法对广陈皮中橙皮苷含量变化不大，说明橙皮苷含量变化，除与炮制加工方法影响外，还与产地有关。由于药材含量变化，还涉及到诸如采收时间、前期加工处理、药材品种等多种因素的影响。

因此，要想全面了解大红袍，需进一步深入研究。

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Effects of Different Processing Methods on the Content of Hesperidin in Dahongpao

MA Lin1,ZHONG Linyun2,REN Yaoyao2,ZHU Jing2,YU Huan2,YE Xide2*
(1.Department of Pharmacy,Fuzhou City Maternity and Child Care Hospital,Jiangxi Province,Fuzhou 344000,China; 2.College of Pharmacy,Jiangxi University of Traditonal Chinese Medicine,Nanchang 330004,China)

Objective To investigate the effect of different processing methods on the content of hesperidin in Dahongpao.Methods Dahongpao was prepared for different processed products by these ways including steam,stoves subsoil fry,charcoal,and honey and stir fried with bran etc.different processing methods.The changs were observed from these processed products contained the differences of contents on hesperidin by HPLC.Results Comparing with the raw materials,the steamed one changed little difference while it had a high content of hesperidin by contrast with other processed products relatively.Conclusion The effect of steaming method was small on the content of hesperidin in Dahongpao.

Dahongpao;processing methods;hesperidin

10.3969/j.issn.1672-2779.2016.23.062

1672-2779（2016）-23-0135-03

李海燕 本文校对：龚千锋

2016-07-19）

江西中医药大学博士启动基金（No：2015BS014）；江西省高等学校教学改革研究省级课题 （No：JXJG14-12-19）；抚州市科技计划项目（No：2015-13）

*通讯作者：552376722@qq.com